Surveillance des paramètres hémodynamiques systémiques et hépatique chez la souris
Summary
Ce film montre comment acquérir hémodynamique systémique et hépatiques chez les souris. Le tout suivi comprend l'acquisition des paramètres vitaux, la pression artérielle systémique, la pression veineuse centrale, débit de l'artère hépatique commune, et la pression de la veine porte ainsi que le débit de portail chez la souris.
Abstract
L'utilisation de modèles de souris dans la recherche expérimentale est d'une énorme importance pour l'étude de la physiologie hépatique et perturbations physiopathologiques. Toutefois, en raison de la petite taille de la souris, les détails techniques de la procédure de surveillance peropératoire adapté à la souris ont été rarement décrits. Auparavant, nous avons rapporté une procédure de suivi pour obtenir des paramètres hémodynamiques chez le rat. Maintenant, nous avons adapté la procédure pour acquérir des paramètres hémodynamiques systémiques et hépatiques chez la souris, une espèce dix fois plus petit que les rats. Ce film démontre l'instrumentation des animaux ainsi que le processus d'acquisition de données nécessaires à l'évaluation hémodynamique systémique et hépatiques chez les souris. Paramètres vitaux, y compris la température du corps, la fréquence respiratoire et la fréquence cardiaque ont été enregistrées tout au long de la procédure. Paramètres hémodynamiques systémiques sont constitués de la pression de l'artère carotide (PAC) et de la pression veineuse centrale (PVC). Paramètres de perfusion hépatiques comprennent portail vpression ein (PVP), le débit portail ainsi que le taux de l'artère hépatique commune (tableau 1) de flux. Instrumentation et acquisition de données pour enregistrer les valeurs normales ont été accomplies dans 1,5 h. Paramètres hémodynamiques systémiques et hépatiques sont restés dans les limites normales au cours de cette procédure.
Cette procédure est difficile mais faisable. Nous avons appliqué cette procédure pour évaluer l'hémodynamique hépatique chez des souris normales et de 70% pendant une hépatectomie partielle et en lobe de foie de serrage expériences. PVP moyenne après résection (n = 20), était 11,41 ± 2,94 cm H 2 O qui était significativement plus élevée (P <0,05) que avant la résection (6,87 ± 2,39 cm H 2 O). Les résultats de lobe de foie de serrage expérience indiquent que cette procédure de contrôle est sensible et adapté pour détecter de petits changements dans la pression portale et débit portail. En conclusion, cette procédure est fiable dans les mains d'un micro-chirurgien expérimenté, mais devrait être limité à experiments où les souris sont absolument nécessaires.
Introduction
L'objectif global de cette vidéo était de démontrer une procédure de suivi en temps réel pour l'acquisition de paramètres hémodynamiques systémiques et hépatiques. La justification de l'élaboration de cette procédure est sa grande valeur pour les interventions expérimentales chez la souris qui nécessitent l'obtention des paramètres hémodynamiques systémiques et hépatiques. Le procédé peut être appliqué à des animaux naïfs et pendant ou après une intervention chirurgicale expérimentale hépato-biliaire donné, comme une hépatectomie partielle, portail ligature de la veine et de la transplantation du foie.
Acquisition de données hémodynamiques hépatiques chez les rongeurs nécessite une procédure invasive proposé. Perfusion hépatique ne peut pas être obtenu de manière non invasive. Cependant, il existe des alternatives pour l'acquisition de la pression sanguine systémique. Les techniques de surveillance telles que la technique du manchon caudal 8 ont été utilisés pour l'acquisition de la pression artérielle chez le rat et la souris. La technique du manchon caudal peut être appliquée en souci du travail bienanimaux UO. Lors de la mesure de la pression sanguine, l'animal doit être placé et fixé dans une position inconfortable spécifique. Dans le manuel de l'appareil queue-manchette, le fabricant déclare que les souris peuvent devenir nerveux et stressé qui peut diminuer la circulation dans la queue. Sous ces circonstances, la pression artérielle périphérique acquise dans la queue peut être beaucoup plus faible que la pression sanguine centrale.
La procédure de contrôle complet a été effectué avec un moniteur intégré à canaux multiples en utilisant une série de capteurs pour l'acquisition de données. La pression artérielle a été obtenue par insertion d'un cathéter dans le vaisseau respectif après dissection minutieuse microchirurgical et exposition au microscope. La vitesse d'écoulement a été mesurée en plaçant une sonde d'écoulement transsonique autour de chaque récipient.
Nous avons déjà signalé une procédure similaire de surveillance peropératoire pour les rats résultant d'une série complète de données hémodynamiques physiologiques comparables à SINGLe Les données rapportées par les autres groupes 7. Par conséquent nous avons considéré cette procédure pour représenter une bonne base pour l'adapter à la souris, une espèce 10 fois plus petit que le rat. La principale différence de la procédure de rat est l'utilisation de cathéters Millar pour acquérir des données de pression artérielle au lieu d'un système à base de cathéter de fluide. Les données de flux ont été acquis avec des sondes d'écoulement transsonique, seulement beaucoup plus petits que pour les navires de rat correspondant.
En raison de la petite taille de l'animal, de l'instrumentation de la souris est techniquement difficile, mais réalisable. Une fois que l'instrumentation est terminée, l'acquisition de données et l'analyse de données de survie de base est simple, depuis un fichier d'un paramètre prédéfini peut être utilisé. Le fichier de configuration doit être définie une fois au début d'une série d'expériences et peut être stocké et utilisé pour toutes les expériences ultérieures.
Jusqu'à présent, nous avons appliqué cette procédure pour évaluer les effets hémodynamiques hépatiques dans des expériences aiguës. Nous avons mesuré CAP et PVP avant et immédiatement après une hépatectomie partielle de 70% (PH) et dans des expériences de serrage / de-serrage. Nous serré le ligament hépato-duodénal du lobe droit représentant 20% de la masse du foie suivie par une brève (5min) serrage de la médiane et le lobe latéral gauche représente tout à fait 90% de la masse du foie. De-serrage a commencé avec la libération de la pince du lobe droit puis en libérant la médiane et le lobe latéral gauche. Temps de serrage maximale était inférieure à 10 min.
Protocol
Representative Results
Discussion
Surveillance de l'hémodynamique hépatique est un important outil de recherche en hépatologie et chirurgie hépatobiliaire. Acquisition de données hémodynamiques hépatiques contribue à caractériser l'effet des procédures hépatobiliaires sur le système circulatoire. Acquisition de données hémodynamiques hépatiques est également nécessaire d'étudier l'effet de médicaments agissant sur la pression portale et flux portail, par exemple, au besoin dans les études d'évaluat…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche a été financée par le Ministère fédéral allemand de l'Éducation et de la Recherche (BMBF) financé "Foie Virtual Network". Je tiens à remercier Frank Schubert et René Gumpert du centre des médias de l'Hôpital de l'Université d'Iéna pour leur aide dans la production de la vidéo et la création de l'animation et Isabel Jank pour l'enregistrement audio.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| PowerLab 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| Quad Bridge Amp | ADInstruments | FE224 | Bridge amplifier |
| Animal Bio Amp | ADInstruments | FE136 | |
| Needle Electrodes for FE136 (3 pk) | ADInstruments | MLA1213 | |
| Perivascular Flowmeter Module | Transonic | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB/MA1PSB | |
| SPR-1000 Mouse Pressure Catheter | Millar instruments | 841-0001 | |
| fluid filled catheter | Terumo | SR+DU2619PX | 26G, 0.64×19mm |
| micro scissors | F·S·L | No. 14058-09 | |
| micro serrefine | F·S·L | No.18055-05 | |
| Micro clamps applicator | F·S·L | No. 18057-14 | |
| Straight micro forceps | F·S·L | No. 00632-11 | |
| Curved micro forceps | F·S·L | No. 00649-11 | |
| needle-holder | F·S·L | No. 12061-01 | |
| 6-0 silk | ethicon | ||
| 6-0 prolene | ethicon | ||
| 7-0 prolene | ethicon | ||
| 10-0 prolene | ethicon | ||
| Tail cut-off device | Kent Scientific | www.kentscientific.com | |
| LabChart7 | ADInstruments | data analysis software |
References
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