마우스의 전신과 간장 혈 역동 학적 파라미터의 모니터링
Summary
이 영화는 생쥐의 조직 및 간 혈류 역학을 취득하는 방법을 보여줍니다. 전체의 모니터링은 중요한 파라미터, 전신 혈압, 중심 정맥압, 간동맥 유량 및 포털 정맥 압력뿐만 아니라 마우스에서 포털 유량의 획득을 포함한다.
Abstract
실험적 연구의 마우스 모델의 사용은 생리학 및 병리학 적 간 장해에 대한 막대한 연구 중요하다. 그러나, 마우스의 작은 크기로, 마우스에 적합한 수술 모니터링 절차의 기술적 상세 설명은 거의 없었다. 이전에 우리는 쥐에 대한 혈역학 적 매개 변수를 얻을 수있는 모니터링 절차를보고있다. 이제, 우리는 생쥐에서 체계적이고 간 혈역학 적 파라미터를 획득하는 절차, 쥐보다 작은 열이 배 종 적응. 이 필름은 동물의 계측뿐만 아니라 마우스에서 전신성 및 간 혈류 역학을 평가하는 데 필요한 데이터 수집 프로세스를 설명한다. 체온, 호흡과 심장 박동을 포함하여 중요한 매개 변수는 전체 과정에 걸쳐 기록되었다. 전신 혈역학은 경동맥 동맥 압력 (CAP) 및 중심 정맥압 (CVP)로 구성되어 있습니다. 간 관류 매개 포털 V를 포함EIN 압력 (PVP), 포털 유량뿐만 아니라 간동맥 (표 1)의 유량. 계측 및 데이터 수집은 일반 값은 1.5 시간 이내에 완료되었다 기록합니다. 전신 및 간 혈역학이 절차를 수행하는 동안 정상 범위 내에서 유지했다.
이 절차는 도전 만 가능하다. 우리는 이미 실험을 클램핑 정상 마우스뿐만 아니라 70 % 부분 간 절제술시 간 엽에서 간 혈류 역학을 평가하기 위해이 절차를 적용했습니다. 절제 (N = 20), 절제 (6.87 ± 2.39 CMH 2 O) 이전보다 유의하게 높았다 CMH이 O (P <0.05) 11.41 ± 2.94 후 PVP를 의미한다. 실험 클램핑 간 로브의 결과는이 모니터링 절차는 포털 압력과 포털 유량의 작은 변화를 검출하기위한 민감하고 적합한 것으로 나타났다. 결론적으로,이 절차는 숙련 된 마이크로 외과 의사의 손에 신뢰할 수 있지만 특급으로 제한해야eriments 마우스는 절대적으로 어디 필요합니다.
Introduction
이 동영상의 전반적인 목적은 전신 및 간 혈역학 파라미터를 획득하기위한 실시간 모니터링 절차를 입증하는 것이었다. 이 절차를 개발하기위한 이론적 근거는 체계적이고 간 혈류 역학적 매개 변수를 얻는 필요로 쥐 실험 개입에 대한 가장 큰 값입니다. 절차는 부분 간 절제술, 포털 정맥 결찰 및 간 이식으로, 순진한 동물과 중 또는 주어진 간담 담도 실험적인 수술 적 치료 후 적용 할 수 있습니다.
설치류 간 혈역학 데이터의 수집은 제안 침략 절차가 필요합니다. 간 관류 비 침습적으로 얻을 수 없다. 그러나, 전신 혈압의 획득을위한 대안이있다. 이러한 꼬리 커프 기법 8로서 모니터링 기술은 래트 및 마우스 모두에서 혈압을 획득에 이용되어왔다. 꼬리 커프 기술은 consci에 적용 할 수 있습니다OU에 동물. 혈압을 측정 할 때, 동물은 특정 불편한 위치에 배치되어 고정 될 필요가있다. 꼬리 즉석 기기의 사용 설명서에서, 제조자는 마우스 긴장되고 꼬리의 순환을 감소 할 수있는 스트레스를 수 있다는 것을 말한다. 그 상황에서, 꼬리에서 취득한 말초 혈압 중앙 혈압보다 훨씬 낮을 수있다.
전체 모니터링 절차는 데이터 수집을위한 일련의 센서를 이용하여 통합 된 다중 – 채널 모니터를 수행 하였다. 혈압 현미경 조심 미세 해부 및 노출 후 각 용기 내에 카테터를 삽입하여 얻었다. 유량은 각 용기 주위 천음속 유동 탐침을 배치하여 측정 하였다.
우리는 이미 자장에 비교 생리 학적 혈역학 데이터의 포괄적 인 일련의 결과로 쥐를 위해 유사한 수술 모니터링 절차를보고다른 그룹 7에서보고 된 전자 데이터입니다. 따라서 우리는 마우스, 쥐보다 작은 10 배 종에 적응하기위한 좋은 기초를 표현하기 위해이 절차를 고려했다. 쥐 절차 주요 차이점은 혈압 데이터 대신에 유체 도관 기반 시스템을 취득 밀라 카테터의 사용이다. 데이터 흐름은 또한 천음속 유동 프로브 대응 쥐 혈관보다 단지 더 작은 것들로 획득 하였다.
때문에 동물의 작은 크기로, 마우스의 계측 기술적 도전하지만 가능하다. 계측이 완료되면 미리 정의 된 설정 파일이 사용될 수 있기 때문에, 데이터 수집 및 기본 수명 데이터의 분석은 간단하다. 설정 파일은 일련의 실험의 시작시에 한 번만 정의 될 저장 및 모든 후속 실험에 사용될 수있다.
지금까지 우리는 급성 실험에서 간 혈류 역학적 효과를 평가하기 위해이 절차를 적용했다. 우리는 CA를 측정P와 PVP 전에 즉시 70 % 부분 간 절제술 (PH) 후 및 / 드 클램핑 실험을 클램핑한다. 우리는 간 질량의 완전히 90 %를 나타내는 질량 중간의 개요 (5 분) 클램핑과 왼쪽 측면 엽 다음에 간 20 %를 나타내는 우엽의 간담 – 십이지장 인대를 고정. 드 – 클램핑은 중간과 왼쪽 측면 로브를 해제 한 다음 오른쪽 엽에서 클램프를 해제와 함께 시작했다. 클램핑 최대 시간은 10 분 미만이었다.
Protocol
Representative Results
Discussion
간 혈류 역학의 모니터링은 간 장학 및 간담도 수술에서 중요한 연구 도구입니다. 간 혈역학 데이터 취득 순환계에 간담 절차의 효과를 특성화하는 데 도움. 혈관 활성 약물을 평가하는 연구에서 필요에 따라 간 혈역학 데이터의 수집은, 예를 들면 포털 압력과 포털 흐름에 영향을 미치는 약물의 효과를 연구 할 필요가있다.
작은 크기에도 불구하고, 전신 중요한 매개 …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 "가상 간 네트워크"투자 교육 및 연구를위한 독일 연방 Ministery (BMBF)에 의해 지원되었다. 나는 비디오를 생산 및 오디오를 기록하는 애니메이션과 이사벨 Jank을 만드는 그들의 도움에 대한 예나 대학 병원의 미디어 센터에서 프랭크 슈베르트 르네 Gumpert 감사드립니다.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| PowerLab 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| Quad Bridge Amp | ADInstruments | FE224 | Bridge amplifier |
| Animal Bio Amp | ADInstruments | FE136 | |
| Needle Electrodes for FE136 (3 pk) | ADInstruments | MLA1213 | |
| Perivascular Flowmeter Module | Transonic | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB/MA1PSB | |
| SPR-1000 Mouse Pressure Catheter | Millar instruments | 841-0001 | |
| fluid filled catheter | Terumo | SR+DU2619PX | 26G, 0.64×19mm |
| micro scissors | F·S·L | No. 14058-09 | |
| micro serrefine | F·S·L | No.18055-05 | |
| Micro clamps applicator | F·S·L | No. 18057-14 | |
| Straight micro forceps | F·S·L | No. 00632-11 | |
| Curved micro forceps | F·S·L | No. 00649-11 | |
| needle-holder | F·S·L | No. 12061-01 | |
| 6-0 silk | ethicon | ||
| 6-0 prolene | ethicon | ||
| 7-0 prolene | ethicon | ||
| 10-0 prolene | ethicon | ||
| Tail cut-off device | Kent Scientific | www.kentscientific.com | |
| LabChart7 | ADInstruments | data analysis software |
References
- Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).
- Bernhard, W., et al. Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25 (6), 725-731 (2001).
- Cheever, A. W., Warren, K. S. Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow. 18, 405-407 (1963).
- Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine. Acta Trop. 89 (1), 13-16 (2003).
- Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. Venous resistance increases during rat anaphylactic shock. Shock. 29 (6), 733-739 (2008).
- Geerts, A. M., et al. Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation. Int. J. Exp. Pathol. 89 (4), 251-263 (2008).
- Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats. Lab Anim. 44 (3), 254-263 (2010).
- Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice. Hypertension. 25 (5), 1111-1115 (1995).
- Kuga, N., et al. Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse. J. Physiol.. 587 (Pt 4), 745-752 (2009).
- Muraki, T., Strain Kato, R. difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice. Psychopharmacology (Berl). 89 (1), 60-64 (1986).
- Nielsen, J. M., et al. Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration. Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293 (1), H534-H540 (2007).
- Sakamoto, M., et al. Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen. Eur. J. Clin. Invest. 35 (3), 220-225 (2005).
- Reverter, E., et al. Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis. Liver Int. 34 (1), 16-25 (2014).
