الاستفادة من الأورام المستمدة من المريض في نموذج ما قبل السريرية تحت الجلد هو وسيلة ممتازة لدراسة فعالية علاجات جديدة، واكتشاف العلامات البيولوجية التنبؤي، والمخدرات مسارات المقاومة. هذا النموذج، في عملية التنمية المخدرات، أمر أساسي في تحديد مصير العديد من العلاجات المضادة للسرطان جديدة قبل التحقيق السريري.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تطوير وصيانة للورم المريض قبل السريرية المستمدة طعم أجنبي نموذج للتحقيق في رواية مكافحة السرطان العلاج
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
توفر نماذج
المشتقة من المريض (PDTX) منصة ضرورية لتسهيل تطوير الأدوية المضادة للسرطان قبل التجارب البشرية. يتم حقن قطع الورم البشري تحت الجلد في الفئران العارية الرياضية (التي تعاني من نقص المناعة ، ونقص الخلايا التائية) لإنشاء بنك من الأورام ، وبالتالي يتم نقلها إلى أجيال مختلفة من الفئران من أجل الحفاظ على هذه الأورام من المرضى. الأهم من ذلك ، أن عدم التجانس الخلوي للورم الأصلي تمت محاكاته عن كثب في هذا النموذج ، والذي يوفر نموذجا أكثر صلة سريريا لتقييم دراسات فعالية الدواء (عامل واحد ومركب) ، وتحليل المؤشرات الحيوية ، والمسارات المقاومة ، وبيولوجيا الخلايا الجذعية السرطانية. تشمل بعض قيود نموذج PDTX استبدال السدى البشري بسدى الفأر بعد الجيل الأول في الفئران ، وعدم القدرة على التحقيق في آثار العلاج على ورم خبيث بسبب الحقن تحت الجلد للأورام ، وعدم تقييم العلاجات المناعية بسبب استخدام الفئران التي تعاني من نقص المناعة. ومع ذلك ، حتى مع هذه القيود ، يوفر نموذج PDTX منصة قوية قبل السريرية في عملية اكتشاف الأدوية.
المقدمة
سرطان القولون والمستقيم (CRC) هو مساهم كبير في وفيات السرطان في الولايات المتحدة. في عام 2015، كان هناك ما يقدر ب 132700 حالة جديدة من اتفاقية حقوق الطفل مع 49700 حالة وفاة 1. على الرغم من أن التشخيص في المرضى الذين يعانون من مرض محلية ممتازة، والمرضى الذين يعانون من مرض متقدم لها نتائج سيئة، مما يجعل هذا أولوية رئيسية في تطوير علاجات جديدة. وعلى الرغم من مستوى نظم العلاج الكيميائي الرعاية والبيولوجية الحديثة التي يتم نشرها ضد هذا المرض، كان هناك فقط زيادة تدريجية في البقاء على قيد الحياة. وفقا لذلك، وهناك جهدا كبيرا في فهم مسارات سائق المعنية في تسهيل نمو الورم في هذا المرض. حددت أطلس شبكة السرطان الجينوم مؤخرا العد....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
بيان الأخلاق: تم الحصول على عينات الورم الغدي القولون والمستقيم المستمدة من المريض من بالتراضي المرضى في مستشفى جامعة كولورادو وفقا لبروتوكول المعتمد من قبل مجلس المراجعة المؤسسية متعددة كولورادو (08-0439). تم تنفيذ جميع الأعمال الحيوان تحت بروتوكولات الحيوانية المعتمدة من قبل جامعة كولورادو دنفر المؤسسي رعاية الحيوان واللجنة الاستخدام (IACUC، بروتوكول # 51412 (06) 1E و 96813 (04) 1E).
1. استلام وتحضير الدم للمرضى
- جمع 1-2 مل من الدم في أنبوب فصل الدم / خلية تحتوي على ستر....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
التشابه بين الطفرات المشتركة في نماذج CRC PDTX وTCGA
ونحن التحقيق ما إذا كانت نسبة من الطفرات المشتركة (KRAS، تلك السلطات، BRAF، PIK3CA، APC، CTNNB1 وTP53) في البنك CRC PDTX كانت ممثلة في وتيرة الطفرة ينظر في عدد السكان CRC المريض. كما هو مبين في الشكل 2A (TCGA) و (ب) (CRC PDTX البنك)، كان.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تقدم PDTX منصة اكتشاف الأدوية وتحسين نموذج لأوجه القصور في نماذج ما قبل السريرية الأخرى التي لا يمكن الاعتماد عليها في التنبؤ النشاط السريري للمركبات جديدة. الأهم من ذلك، أورام في هذا النموذج هي مستقرة من الناحية البيولوجية، في الحفاظ على إمكانية النقيلي، وتظهر استجابة مماثلة المخدرات من جيل إلى جيل. في هذا النموذج، يتم حقن المريض المستمدة الأورام في الفئران عارية athymic، passaged، وتستخدم بعد ذلك في التقييم العلاجي. هناك العديد من الخطوات الهامة لبنك PDTX الناجحة التي تشمل: 1) ف.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من خلال المنحة 1R01CA152303-01.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| RPMI أو DMEM | Corning | 10-040-CV | |
| البنسلين والستربتومايسين | Corning | 30-002-CI | |
| الأحماض الأمينية غير الأساسية | Corning | 25-025-CI | |
| مصل الأبقار الجنيني | Corning | 35-010-CV | ذوبان الجليد في -4 درجة ؛ C ، ثم قم بالتنشيط لمدة 30 دقيقة عند 60 درجة ؛ C حمام مائي |
| CPT أنبوب الدم | BD vacutainer | 362761 | |
| أنبوب الطرد المركزي الدقيق | Surelock | A-7002 | |
| ملحي مخزن بالفوسفات | Corning | 21-040-CV | |
| قوارير Cyroking | C0732901 | ||
| طبق قطع الورم البلاستيكي | Trueline | TR4001 | |
| مقص | Roboz | RS-5881 | |
| ملقط | Roboz | RS-5135 | |
| Matrigel (خليط البروتين الجيلاتيني) Corning | 354234 | يحفظ عند -20 أو -80 درجة ؛ C ، ثم تذوب على الجليد ، لا تترك في RT | |
| 10٪ أكواب فورمالين | بروتوكول | 032-059 | |
| تخزين النيتروجين السائل ديوار | CY50900 | ||
| النيتروجين السائل المحمول ديوار | نالجينز | 4150-2000 | |
| ثنائي ميثيل سلفوكسيد | فيشر | 67-68-5 | |
| حاوية التجميد: السيد فروستي | نالجين | 5100-0001 | |
| كحول الأيزوبروبيل | Decon | 64-17-5 | |
| المبازل | البحوث المبتكرة لأمريكا | MP-182 | |
| آلة التخدير | باترسون صندوق التخدير البيطري | ||
| باترسون | |||
| Isoflurane | Vet One | 1038005 | |
| F-Air Canister | Bickford Omnicon | 80120 | |
| ميلوكسيكام | البيطري واحد | 5182-90C | |
| الفرجار | فاولر | 54-100-167 | |
| مقياس الوزن | أوهاوس | الكشافة برو SP601 |
المراجع
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. 2015. CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).
- Comprehensive molecular characterization of human colon and rectal cancer. Nature. 487 (7407), 330-337 (2012).
- Arcaroli, J. J., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
