鼠全层皮肤移植
1Sidney-Kimmel Comprehensive Cancer Center,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Liver and Transplantation Surgery, Chang-Gung Transplantation Institute, Chang-Gung Memorial Hospital,Chang-Gung University College of Medicine, 3Vascularized Composite Allotransplantation Laboratory, Department of Plastic and Reconstructive Surgery,Johns Hopkins University School of Medicine
Summary
鼠全层皮肤移植是一种行之有效的模型来研究排斥同种免疫的设置。在这里，我们提供了执行的BALB / c每个步骤的教程 – >的C57BL / 6的全层皮肤移植。
Abstract
鼠全层皮肤移植是一种行之有效的体内模型来研究同种免疫反应和移植排斥。尽管它的应用有限给人类，小鼠皮肤移植已被广泛用于移植研究。该程序是很容易学习和执行，并且它不需要细腻的显微外科技术，也没有广泛的培训。此外，在该模型中移植排斥反应发生在一个非常可重复的免疫反应，并且容易地通过直接检查和触诊监测。此外，与供体匹配的或第三方皮肤移植继发的皮肤移植可以在更复杂的移植模型作为替代，并评估供体特异性耐受简单的方法进行。的并发症是低，并且在一般限于在手术后麻醉过量或呼吸窘迫。移植失败，另一方面，通常发生作为制备较差克的结果船尾，不正确的定位于移植床上，或包扎不当位置。在这篇文章中，我们提出了小鼠全层皮肤移植的协议，并描述必需的成功过程中的重要步骤。
Introduction
器官移植是选择用于患者的终末期器官衰竭的治疗和结果都与在外科手术和免疫抑制剂的协议的进步显着提高。然而，长期免疫抑制与显著的副作用，以及促进容忍新的战略发展仍然现代移植研究的目标。
许多动物模型已经开发了用于移植的基础研究，研究移植排斥反应的机制和测试用于防止移植排斥和促进长期耐受1-3的免疫抑制方法。小鼠模型已成为免疫学研究的中流砥柱，由于诊断和治疗性抗体和良好定义的近交系和转基因品系的独家和广阔的可用性。皮肤移植的是，不需要特殊的显微技术和可以简单的程序轻松术后监测。总之，小鼠皮肤移植一直是一个特殊的工具来研究许多方面参与同种免疫反应，包括抗原呈递细胞贩运，和移植排斥4,5期间组织破坏。
在这里，我们展示了一步一步的程序使用鼠标模型皮肤全层移植，而我们描述必要的移植皮肤移植成功的重要步骤。
Protocol
所有程序均按照指南的护理与健康研究所（NIH）的实验室动物的用途进行，由约翰霍普金斯大学动物护理和使用委员会（JHUACUC）获得批准。经批准的ACUC协议MO13M292和MO13M370下进行的具体程序。 1.捐赠皮肤丰收麻醉供体小鼠异氟醚（感应蒸发器4％，在维持1 – 2％，通过鼠标锥）。使用脚趾捏撤回反射来监测麻醉深度。 使用电动剃须刀，剃动物的背部，并用10％?…
Representative Results
收件人鼠标绷带的位置是该过程的一个重要步骤。皮肤移植物被定位在接受者躯干，肩膀，臀部和脊柱（ 图1）之间。绷带与折叠纱布和两个塑料粘性绷带的组合制成。收件人鼠标向下放置与接枝在纱布上的绷带的中心。使用两个弯曲微钳，绷带的下端首先拉出，然后将绷带的顶部被缠绕在鼠标腹部。 在完全不匹?…
Discussion
因为由梅达沃，首先在人体研究，然后在兔子和老鼠其介绍，皮肤移植已成为同种异体免疫反应6,7研究的宝贵模型。在这个手稿中，我们提出采用上，下背部皮肤大规模，非血管，皮肤全层移植的典范。各种替代方法，包括使用尾部皮肤或鼠标作为接枝组织来源的耳部皮肤，已经报道了迄今8,9。这些模型展示技术简单的独特优势，并允许高容量的吞吐量。表皮朗格汉斯细胞和真皮…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作是由美国国立卫生研究院资助R01AI077610资助。
Materials
| Straight micro forceps | Sigma | F4017 | |
| Curved micro forceps | Aesculap | BD333R | |
| Curved Stevens tenotomy scissors | Aesculap | BC905R | |
| Mayo dissecting scissors | Sigma | S3146 | |
| Micro needle holder | Aesculap | BM563R | |
| Sterile gauze | Covidien | 441218 | |
| 6-0 Nylon suture | MWI | 31849 | |
| Plastic Strips Band-Aid | Johnson & Johnson | Obtained from pharmacy | |
| 10 cm Petri dish | Fisherbrand | FB0875712 | |
| PBS | Quality Biological | 119069131 | |
| Buprenorphine | DEA Number required; Obtained from hospital pharmacy | ||
| Enrofloxacin | Bayer Health Care | 186599 |
References
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Cite This Article
Cheng, C., Lee, C., Fryer, M., Furtmüller, G. J., Oh, B., Powell, J. D., Brandacher, G. Murine Full-thickness Skin Transplantation. J. Vis. Exp. (119), e55105, doi:10.3791/55105 (2017).