Mürin Tam kat Cilt Nakli
Summary
Mürin tam kalınlıkta deri transplantasyonu alloimmun ortamda reddini incelemek için iyi kurulmuş bir modeldir. > C57BL / 6 tam kalınlıkta deri nakli – Burada bir BALB / c performans katılan her adımda bir öğretici sağlar.
Abstract
Mürin tam kalınlıkta deri transplantasyonu alloimmun tepki ve greft reddini incelemek için iyi kurulmuş bir in vivo modeldir. insanlara sınırlı uygulanmasına rağmen, farelerde deri transplantasyon yaygın Nakil için kullanılmıştır. Prosedür öğrenmek ve kolay uygulanabilir olması ve hassas mikrocerrahi teknikler de kapsamlı bir eğitim gerektirmez. Ayrıca, bu modelde graft reddi çok tekrarlanabilir immünolojik reaksiyon meydana gelir ve kolayca doğrudan kontrol ve elle muayene ile izlenir. Buna ek olarak, donör uyumlu veya üçüncü taraf deri grefti ile ikincil deri nakli alternatif ve donör spesifik tolerans değerlendirmek için basit bir yöntem olarak daha karmaşık nakli modellerinde yapılabilir. komplikasyonlar düşük ve işlem sonrası anestezi doz aşımı ya da solunum sıkıntısı ile sınırlı genel olarak. Greft yetmezliği, diğer taraftan, gr yetersiz hazırlık sonucu sık görülürgreft yatakta kıç, yanlış konumlandırma, ya da bandaj uygunsuz yerleştirme. Bu yazıda, farelerde tam kalınlıkta deri transplantasyonu için bir protokol mevcut ve başarılı bir işlem için gerekli olan önemli adımları açıklar.
Introduction
Organ nakli son dönem organ yetmezliği olan hastalarda tercih edilen tedavi olup, sonuçlar cerrahi işlemler ve immünsüpresyondaki gelişmeler ile son derece düzeldi. Ancak, uzun süreli immünsüpresyon önemli yan etkileri ile ilişkilidir ve hoşgörüyü teşvik yeni stratejilerin geliştirilmesi, modern nakli araştırmanın amacı kalır.
Çeşitli hayvan modelleri allograft reddinin mekanizmaları incelemek ve immünosupresyon aşı reddinin engellenmesi için ve uzun vadeli dayanıklılık 1-3 teşvik etmek için yaklaşımlar test etmek için, transplantasyon temel araştırma için geliştirilmiştir. Fare modelleri nedeniyle tanı ve tedavi antikorlar ve iyi tanımlanmış kendilenmiş ve transgenik suşlar seçkin ve geniş müsaitlik durumuna immünolojik araştırmaların temelini haline gelmiştir. Cilt nakli özel mikrocerrahi beceri gerektiren ve can değil basit bir işlemdirKolayca postoperatif izlenecektir. Birlikte ele alındığında, fare deri nakli greft reddi 4,5 sırasında antijen sunumu, hücre kaçakçılığı ve doku yıkımı da dahil olmak üzere immün yanıt katılan birçok açıdan incelemek için olağanüstü bir araç olmuştur.
Burada, fare modeli kullanılarak tam kalınlıkta deri transplantasyonu için adım-adım prosedürü göstermek ve biz nakledilen deri başarılı bütünleşme için gerekli önemli adımlar açıklanmaktadır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Tavşan ve farelerde daha sonra insan çalışmalarında ilk ve Medawar tarafından piyasaya sunulmasından bu yana, deri transplantasyonu allojenik bağışıklık tepkilerinin 6,7 çalışmaları için paha biçilmez bir model olmuştur. Bu yazıda, üst ve alt sırt derisi kullanılarak büyük ölçekli, non-vaskülarize, tam kalınlıkta deri nakli bir model sunuyoruz. Kuyruk deri veya Nakledilecek doku kaynağı olarak fare kulak derisi kullanılarak da dahil olmak üzere çeşitli alternatif yöntemler…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma NIH hibe R01AI077610 tarafından finanse edildi.
Materials
| Straight micro forceps | Sigma | F4017 | |
| Curved micro forceps | Aesculap | BD333R | |
| Curved Stevens tenotomy scissors | Aesculap | BC905R | |
| Mayo dissecting scissors | Sigma | S3146 | |
| Micro needle holder | Aesculap | BM563R | |
| Sterile gauze | Covidien | 441218 | |
| 6-0 Nylon suture | MWI | 31849 | |
| Plastic Strips Band-Aid | Johnson & Johnson | Obtained from pharmacy | |
| 10 cm Petri dish | Fisherbrand | FB0875712 | |
| PBS | Quality Biological | 119069131 | |
| Buprenorphine | DEA Number required; Obtained from hospital pharmacy | ||
| Enrofloxacin | Bayer Health Care | 186599 |
References
- Furtmuller, G. J., et al. Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse. J Vis Exp. , (2016).
- Oh, B., et al. A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice. J Vis Exp. , (2016).
- Oberhuber, R., et al. Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique. J Vis Exp. , e50753 (2014).
- Jones, T. R., Shirasugi, N., Adams, A. B., Pearson, T. C., Larsen, C. P. Intravital microscopy identifies selectins that regulate T cell traffic into allografts. J Clin Invest. 112, 1714-1723 (2003).
- Celli, S., Albert, M. L., Bousso, P. Visualizing the innate and adaptive immune responses underlying allograft rejection by two-photon microscopy. Nat Med. 17, 744-749 (2011).
- Medawar, P. B. The behaviour and fate of skin autografts and skin homografts in rabbits: A report to the War Wounds Committee of the Medical Research Council. J Anat. 78, 176-199 (1944).
- Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B., Sparrow, E. M. Quantitative studies on tissue transplantation immunity. I. The survival times of skin homografts exchanged between members of different inbred strains of mice. Proc R Soc Lond B Biol Sci. 143, 43-58 (1954).
- Garrod, K. R., Cahalan, M. D. Murine skin transplantation. J Vis Exp. , (2008).
- Schmaler, M., Broggi, M. A., Rossi, S. W. Transplantation of tail skin to study allogeneic CD4 T cell responses in mice. J Vis Exp. , e51724 (2014).
- Bergstresser, P. R., Toews, G. B., Gilliam, J. N., Streilein, J. W. Unusual numbers and distribution of Langerhans cells in skin with unique immunologic properties. J Invest Dermatol. 74, 312-314 (1980).
- Chen, H. D., Silvers, W. K. Influence of Langerhans cells on the survival of H-Y incompatible skin grafts in rats. J Invest Dermatol. 81, 20-23 (1983).
- Chong, A. S., Alegre, M. L., Miller, M. L., Fairchild, R. L. Lessons and limits of mouse models. Cold Spring Harb Perspect Med. 3, a015495 (2013).
- Mayumi, H., Nomoto, K., Good, R. A. A surgical technique for experimental free skin grafting in mice. Jpn J Surg. 18, 548-557 (1988).
- McFarland, H. I., Rosenberg, A. S. Skin allograft rejection. Curr Protoc Immunol. Chapter 4, (2009).
- Lee, C. F., et al. Preventing Allograft Rejection by Targeting Immune Metabolism. Cell reports. 13, 760-770 (2015).
- Pollizzi, K. N., Powell, J. D. Integrating canonical and metabolic signalling programmes in the regulation of T cell responses. Nat Rev Immunol. 14, 435-446 (2014).
- Pearce, E. L., Poffenberger, M. C., Chang, C. H., Jones, R. G. Fueling immunity: insights into metabolism and lymphocyte function. Science. 342, 1242454 (2013).
