במבחנה In Vivo למזהמים סביבתיים T, B והתאים מיאלואידית פעילות מדכא ומענים ההורמונאלית מן המקבלים
Summary
כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לגרום סובלנות ב השתלת ולאחר להעריך חוץ גופית בתוך ויוו הקיבולת המדכא של תאים נפרדים קבוצות משנה של המטופל, את מצב המערכת החיסונית של המטופל כלפי התורם או אנטיגנים אקסוגני.
Abstract
החשש העיקרי של השתלת היא להשיג סובלנות ספציפי באמצעות אינדוקציה של תאים תקינה. ההבנה של מנגנונים סובלנות דורש מודלים אמינים. כאן, אנו מתארים מודלים של סובלנות להשתלת לב בראט, המושרה המצור של אותות costimulation או על ידי קולטנים upregulation של מולקולות immunoregulatory דרך העברה גנטית. כל אחד המודלים האלה מותר ויוו דור של תאים רגולטוריים כמו בתאי T רגולטוריים (Tregs), תאים B רגולטוריות (Bregs) או התאים מיאלואידית רגולטוריות (RegMCs). כתב יד זה, אנו מתארים שני פרוטוקולים משלימים השתמשו כדי לזהות ולהגדיר במבחנה ויוו תא רגולטורי פעילות כדי לקבוע אחריותם סובלנות אינדוקציה ותחזוקה. ראשית, במבחנה מדכאים assay מותר זיהוי מהיר של תאים עם קיבולת מדכאים על תגובות חיסוניות אפקטור באופן תלוי מינון, יכול לשמש עבור ניתוח נוסף כגון ציטוקין מדידה או cytotoxicity. שנית, העברת המאמצת של תאים מן הנמען המטופלים סובלנית לנמען המושתל לקרינה לאחרונה, הדגיש את המאפיינים tolerogenic של תאים אלה שליטה תגובות חיסוניות שתל ביים ו/או המרה (תאים תקינה חדשה כינה סובלנות זיהומיות). שיטות אלה אינם רק תאים עם סמנים פנוטיפי ידוע, ניתן להרחיב את כל אוכלוסיית תאים. יתר על כן, תורם ביים allospecificity של תאים תקינה (מטרה חשובה בתחום) יכול להיות מוערך על ידי באמצעות צד שלישי תורם תאי או להשתיל או בתוך חוץ גופית או ויוו. לבסוף, כדי לקבוע את הקיבולת tolerogenic ספציפיים של תאים רגולטוריים אלה, אנו מספקים פרוטוקולים כדי להעריך את התגובות ההורמונאלית נוגדן אנטי-תורם והיכולת של המטופל לפתח תגובות ההורמונאלית נגד אנטיגנים מוכרים חדשים או לשעבר. הדגמים של סובלנות המתוארת ניתן לאפיין עוד תאים רגולטוריים, לזהות סמנים חדשים, ומולקולות immunoregulatory, והם וישימה השתלת מודלים או מחלות אוטואימוניות מכרסם או אנושיים אחרים.
Introduction
להשתלת לב בעכברוש הוא מודל השתלת איבר אמין כדי להעריך טיפולים אינדוקציה סובלנות, לפענח את המנגנונים של סובלנות אינדוקציה ותחזוקה, ויש לו פוטנציאל לגרום תאים תקינה מבחינה פונקציונלית המוסמכת ודומיננטית. הפרוטוקולים שלהלן מתארים באופן מלא אי-התאמה הטרוטופי לב השתלה של עכברוש התורם 1W לואיס (LEW.1W, RT1u) לתוך לואיס 1A הנמען חולדה (LEW.1A, RT1). שילוב זה שתל, דחייה חריפה מתרחשת במהירות רבה (עוד 7 ימים), יכול להיות מוערך בקלות על ידי שתל להכות מדידה באמצעות מישוש הבטן. כאן אנו מציעים שלושה פרוטוקולים לזירוז עמידות בפני להשתלת לב בעכברוש. דגמים אלה, סובלנות המושרה ו/או המתוחזקים על-ידי סוגי תאים רגולטוריים שונים. קודם כל, החסימה של CD40 CD40L אינטראקציות עם אדנו קידוד CD40Ig (AdCD40Ig) המושרה הדור של CD8+ Tregs מסוגל גרימת רגישות כאשר adoptively הועבר משני הנמענים המושתל1. יתר על כן, דלדול של CD8+ תאים (עם נוגדנים anti-CD8α) נמענים שטופלו AdCD40Ig שנוצר Bregs ו- RegMCs2. ניתוח עמוק של CD8+ Tregs מאפיינים מודגש התפקיד של מספר מולקולות immunoregulatory כהגדרתו אינטרלוקין-34 (IL-34) ו- Fibroleukin-2 (FGL 2)3,4,5,6 . ואילו ביטוי של IL-34 (עם וקטור AAV) הנגרמת Tregs דרך דור של RegMCs, ביטוי של FGL-2 המושרה Bregs, שבבסיס הרשת מורכב של תאים תקינה.
כי דחייה כרונית מתפתח לאט, הוא ארוך טווח, ניתוח מעמיק נדרש כדי להבחין בין סובלנות נגד דחייה כרונית. שתל בדרך כלל שקובעת חדירה לתא, פיברוזיס, עיבוי של כלי הדם קיר וה משלים C4d תצהיר מאת פראפין7. בעוד שיטות היסטולוגיה דרוש להקריב חיה או להשתיל ביופסיה, כאן אנו מתארים שיטה פשוטה כדי להעריך את תכונות שונות של להשתלת נסבל: הופעתה והתפקוד של תאים רגולטוריים, את תגובות נוגדנים ספציפיים נגד תורם דם דוגמה מאת cytometry זרימה (כאן, השתמשנו תא לפעיל על-ידי קרינה פלואורסצנטית מיון (FACS)).
תחזוקה של סובלנות להשתלת לאחר מעצרו של הטיפול משויכת בדרך כלל תנאי הגיוס של תאים רגולטוריים8. בעשרות השנים האחרונות, מחקרים התמקדו CD4+Tregs פה אחד מאופיין אותם על ידי הסמנים מפתח Foxp3+CD25גבוהה, CD127–9,10,11. באופן דומה, סמני מספר יוחסו CD8+ Tregs, כמו CD122+, CD28–, CD45RCנמוך, PD1+, הליוס+1,12,13,14 , 15 , 16 , 17. שנים, ביטוי של GITR, CTLA4 ו ציטוקינים (IL-10, TGFβ, IL-34, IL-35, FGL-2) היו קשורים בנוסף Treg פרופיל3,4,6,13, 18,19,20,21. עם זאת, מתעוררים תא רגולטורי אוכלוסיות, כגון Bregs, RegMCs או NKTregs, חסרים סמני ספציפי רלוונטי. אכן, Bregs מדווחים בעיקר בתור לא בוגר CD24 תאים+ , עם ביטוי CD27 רב-משמעי, ולעיתים הייצור של IL-10, TGFβ או granzyme B22,23,24. המורכבות של שושלת התאים מיאלואידית דורשת שילוב של מספר סמנים להגדרת הפרופיל שלהם תקינה או proinflammatory כגון CD14, CD16, CD80, CD86, CD40, CD209a או CD16325,26. לבסוף, כמה סימונים דווחו לזהות את NKTregs כמו CD11b+, CD27+, TGFβ+, אך מחקרים נוספים נדרשים עוד יותר phenotypically לתאר אותם27,28,29 ,30,31,32. לפיכך, עדויות של המדכא פעילות נדרשים להכשיר עוד תיאור פנוטיפי לצורך זיהוי סמנים ביולוגיים חדש, מגשרים חדשים immunoregulatory, וכדי להרחיב את ההיקף לטיפולים תאים חדשים.
אנו מציעים שתי שיטות משלימות כדי להעריך את הפעילות המדכא של תאים. ראשית, השיטה במבחנה מורכב culturing מדכא תאים עם תוויות אפקטור T תאים מגורה על ידי התורם allogeneic אנטיגן הצגת תאים (נגמ שים)-יחס שונה במשך 6 ימים ולאחר ניתוח אפקטור את תא T התפשטות זה משקף מכוון תורם לדיכוי מערכת החיסון. תאים חולדות שטופלו ניתן להשוות ישירות לתאים של תמים עכברים וחולדות שאינם מטופלים המושתל מדכאים פעילות (או כל האוכלוסייה תא רגולטורי אחרים), בטווח של יחסי משתיק קול: אפקטור. יתר על כן, שיטה זו אינה דורשת כל השתלת, התוצאות מתקבלים שישה ימים. שנית, שיטת ויוו כוללת העברת תאים רגולטוריים המיועד חולדה שטופלו לנמען המושתל לקרינה לאחרונה. בעוד B תאים, התאים מיאלואידית או T תאים מחלון תמימים שאינם מטופלים עכברים לא מצליחות בדרך כלל כדי לעכב דחייה חריפה וכדי להאריך את הישרדות השתל בעת העברה המאמצת, תאים עם potentiated מדכאים פעילות של מטופלים נמענים יש תכונות אלה 1,2,3,4,33. Lymphopenia המושרה על ידי הקרנה של הנמען מומלץ לאפשר הועבר adoptively תאים כדי לא להיות מושפע דם הומאוסטזיס וכדי לשלוט בקלות רבה יותר את תגובות מערכת החיסון נגד התורם. עבור שתי השיטות, ניצול במבחנה של allogeneic צד ג’ נגמ שים או ויוו העברה המאמצת של מדכא תאים לתוך נמענים הושתל בלב חיצוני לאפשר ניתוח של התורם אנטי יחודיות. בעוד השיטה ויוו דורש מספר ניכר של תאים, גרוע ייצג תא subpopulations יכול להיות בקלות רבה יותר שקובעת מדכאים פעילות במבחנה33.
ניתן גם למדוד התגובות ההורמונאלית כדי להעריך את המצב של סובלנות ואת השליטה של נוגדן מכוונת התגובות התורם אנטיגנים. אכן, סובלנות יכול להיות מאופיין על ידי העדר תגובה הומוראלית כלפי התורם אבל שימור היכולת לנמענים לפתח תגובה הומוראלית אנטיגנים חדשים ושימור הזיכרון תגובות. ראשית, עקרון alloantibody זיהוי מבוסס על זיהוי של תאי התורם באמצעות נוגדנים הנמען בעקבות דגירה של התורם סוג התא עם סרום מן הנמען המושתל. שנית, ההורמונאלית תגובות מכוונת ל אקסוגניים אנטיגנים ניתן גירוי הבאים המוערך של נמענים סובלנית לטווח ארוך עם חור המנעול מגנטיים המוציאנין (KLH) emulsified עם מלא אדג’וונט של פרוינד. הנוכחות של נוגדנים ספציפיים IgG ו- IgM נגד אנטיגנים ניתן להבחין 4 ו- 13 ימים, בהתאמה, בעקבות חיסון, אנזים מקושרים ImmunoSorbent Assay (אליסה)34. שלישית, שימור זיכרון המערכת החיסונית תגובות יכול להיות מוערך על ידי הזרקה של תאי דם אדומים xenogeneic (RBCs)-ימי-7 ו +3 השתלת RBCs מכתים עם הנמען סרום שנאספו ימים +8, +17 בעקבות השתלת. כל השיטות האלה מאפשרים זיהוי בנוגדנים יחוברו באמצעות נוגדנים ספציפיים משני, ולא רכישה מהירה של תוצאות פחות מ 1.5 h על-ידי FACS מכתים או כמה שעות מאת אליסה.
בסופו של דבר, פרוטוקולים אלה מיועדים אפיון של השתלת מודלים, והוא יכול להיות, במידה מסוימת, חלה על מודלים מחלות אוטואימוניות. העקרונות של השיטה ניתן משורבב כדי כל המינים.
Protocol
Representative Results
Discussion
העברה המאמצת של splenocytes הכולל אל נמען לאחרונה המושתל הוא דרך יעילה כדי לזהות הנוכחות של תאים תקינה הנגרמת או potentiated על ידי טיפול. הקרנה-induced lymphopenia ארעי מארח מקדמת תא ההישרדות לאחר העברת והקמת סובלנות. יתר על כן, הקרנה תת קטלני משאיר זמן עבור תאים עם מאפיינים tolerogenic כדי להמיר תאים רגולטוריים ח?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו מומש בהקשר של הפרויקט Labex IGO (n ° ANR-11-LABX-0016-01) המהווה חלק מנוהל על ידי את ANR (ANR-11-LABX-0016-01) על ידי IHU-צ’סטי הפרוייקט ממומן גם על ידי התוכנית ממשלת צרפת “Investissements d’Avenir” ” תוכנית ממשלת צרפת Investissements d’Avenir”, מנוהלים על ידי הצרפתי הלאומי מחקר סוכנות (ANR) (ANR-10-IBHU-005). פרויקט IHU-צ’סטי נתמך גם על ידי נאנט Métropole Région פיי דה לה לואר.
Materials
| animals | |||
| LEW.1W and LEW.1A rats | Janvier Labs, France | 8 weeks old, | |
| BN third party donor rats | Janvier Labs, France | 8 weeks old, | |
| name | company | catalogue number | comments |
| reagents | |||
| AdCD40Ig | Viral Vector Core, INSERM UMR 1089, Nantes, France | home made plasmids | |
| IL34-AAV | Viral Vector Core, INSERM UMR 1089, Nantes, France | home made plasmids | |
| FGL2-AAV | Viral Vector Core, INSERM UMR 1089, Nantes, France | home made plasmids | |
| anti-TCR | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | R7/3 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD25 | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | OX39 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD8 | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | OX8 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD45RA | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | OX33 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD161 | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | 3.2.3 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD11b/c | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | OX42 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-TCRgd | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | V65 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD45RC | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | OX22 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD4 | Hybridoma from European Collection of Cell Culture, Salisbury, U.K | OX35 clone | Home made culture, purification and fluororophore coupling |
| anti-CD45R | BD Biosciences, Mountain View, CA | #554881, His24 clone | |
| anti-rat IgG-FITC | Jackson ImmunoResearch Laboratories, INC, Baltimore, USA | #112-096-071 | |
| anti-rat IgG1 | Serotec | #MCA 194 | |
| anti-rat IgG2a | Serotec | #MCA 278 | |
| anti-rat IgG2b | Serotec | #MCA 195 | |
| anti-rat IgM-FITC | Jackson ImmunoResearch Laboratories, INC, Baltimore, USA | #115-095-164 | |
| streptavidin HRP | BD Biosciences, Mountain View, CA | #554066 | |
| KLH | Sigma Aldrich, St. Louis, USA | #9013-72-3 | |
| PBS 1X | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | Phosphate Buffer Solution without calcium and magnesium, | |
| Tween 20 | Sigma, Saint-Louis, USA | #9005-64-5 | |
| TMB substrate reagent kit | BD Biosciences, Mountain View, CA | #555214 | |
| CellTraceTM CFSE cell proliferation kit | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #C34554 | |
| RPMI 1640 medium 1X | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #31870-025 | |
| penicilline streptomycine | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #15140-122 | |
| Hepes Buffer | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #15630-056 | |
| non essential amino acids | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #11140-035 | |
| Sodium pyruvate | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #11360-039 | |
| 2 beta mercaptoethanol | Sigma, Saint-Louis, USA | #M3148 | |
| Cell Proliferation Dye eFluor® 450 Cell | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #65-0842-85 | |
| Glutamine | Sigma, Saint-Louis, USA | #G3126 | |
| DAPI | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | #D1306 | |
| Collagenase D | Roche Diagnostics, Germany | #11088882001 | |
| EDTA | Sigma, Saint-Louis, USA | #E5134 | |
| NaCl 0.9% | Fresenius Kabi | #B230561 | |
| Magnetic dynabeads | Dynal, Invitrogen | #11033 | Goat anti-mouse IgG |
| One Comp eBeads | Ebiosciences, San Diego, USA | #01-1111-42 | |
| Betadine | Refer to the institutional guidelines | ||
| Isoflurane | Refer to the institutional guidelines | ||
| Naplbuphine | Refer to the institutional guidelines | ||
| Terramycine | Refer to the institutional guidelines | ||
| Buprenorphine | Refer to the institutional guidelines | ||
| Meloxicam | Refer to the institutional guidelines | ||
| Complete Freund's adjuvant | |||
| Rompun | Refer to the institutional guidelines | ||
| Ringer lactate | Refer to the institutional guidelines | ||
| Ketamine | Refer to the institutional guidelines | ||
| Red blood cell lysis solution | Dilute 8,29g NH4Cl (Sigma, Saint-Louis, USA A-9434), 1g KHCO3 (Prolabo 26 733.292) and 37.2mg EDTA (Sigma, Saint-Louis, USA E5134) in 800ml H2O. Adjust pH to 7.2-7.4 and complete to 1L with H2O. | ||
| Collagenase D | Dilute 1g collagenase in 500 ml RPMI-1640 + 5 ml Hepes + 2% FCS | ||
| PBS-FCS (2%)-EDTA (0.5%) | Add 5 mL EDTA 0,1M (Sigma, Saint-Louis, USA E5134) and 20ml FCS to 1ml PBS 1X | ||
| CFSE (Vybrant CFDA SE Cell Tracer Kit Invitrogen) | Dilute 50µg (=1 vial) of CFDA SE (component A) in 90μl DMSO (component B) solution to obtain a 10mM stock solution. Then, dilute stock solution at 1/20 000 in PBS 1X to obtain a 0.5μM solution | ||
| complete medium for coculture | 500ml complete RPMI-1640 medium with 5 ml Penicillin (80 unit/ml)-Steptomycin (80 mg/ml), 5 ml L-Glutamine, 5 ml Non Essential Amino Acids (100X), 5ml Pyruvate Sodium (100mM), 5 ml HEPES buffer (1M), 2.5 ml b mercaptomethanol (7 ml of 2-bmercaptoethanol stock diluted in 10 ml RPMI), 10% FCS | ||
| name | company | catalog number | comments |
| equipments | |||
| falcon 50ml | BD Biosciences, Mountain View, CA | #227261 | |
| falcon 15ml | BD Biosciences, Mountain View, CA | #188271 | |
| sieve | |||
| Corning plastic culture dishes | VWR, Pessac | #391-0439 | |
| 100µm and 60µm tissue filters | Sefar NITEX, Heiden, Switzerland | #03-100/44 and #03-60/35 | |
| 96 wells U bottom plates for coculture | Falcon U-bottom Tissue Culture plate, sterile, Corning | #353077 | |
| 96 wells V bottom plates for FACS staining | ThermoScientifique, Danemark | #249570 | |
| 96 wells flat bottom ELISA plates | Nunc Maxisorb | ||
| seringue for spleen crush | BD Biosciences, Mountain View, CA | #309649 | |
| ELISA reader | SPARK 10M, Tecan, Switzerland | SPARK 10M, Tecan, Switzerland | |
| centrifuge | |||
| bain marie | |||
| X rays irradiator | Lincolshire, England | Faxitron CP160 | |
| solar agitator | |||
| FACS Canto II | BD Biosciences, Mountain View, CA | ||
| FACS Aria II | BD Biosciences, Mountain View, CA | ||
| magnet | Thermo Fisher Scientific Inc, USA | 12302D |
References
- Guillonneau, C., et al. CD40Ig treatment results in allograft acceptance mediated by CD8CD45RC T cells, IFN-gamma, and indoleamine 2,3-dioxygenase. J Clin Invest. 117 (4), 1096-1106 (2007).
- Bézie, S., et al. Compensatory Regulatory Networks between CD8 T, B, and Myeloid Cells in Organ Transplantation Tolerance. J Immunol. 195 (12), 5805-5815 (2015).
- Bézie, S., et al. Fibrinogen-Like Protein 2/Fibroleukin Induces Long-Term Allograft Survival in a Rat Model through Regulatory B Cells. PloS One. 10 (3), e0119686 (2015).
- Bézie, S., et al. IL-34 is a Treg-specific cytokine and mediates transplant tolerance. J Clin Invest. 125 (10), 3952-3964 (2015).
- Li, X. L., et al. Mechanism and localization of CD8 regulatory T cells in a heart transplant model of tolerance. J Immunol. 185 (2), 823-833 (2010).
- Guillonneau, C., Bézie, S., Anegon, I. Immunoregulatory properties of the cytokine IL-34. Cell Mol Life Sci. , (2017).
- Nickeleit, V., Zeiler, M., Gudat, F., Thiel, G., Mihatsch, M. J. Detection of the complement degradation product C4d in renal allografts: diagnostic and therapeutic implications. J Am Soc Nephrol. 13 (1), 242-251 (2002).
- Chiffoleau, E., et al. Induction of donor-specific allograft tolerance by short-term treatment with LF15-0195 after transplantation. Evidence for a direct effect on T-cell differentiation. Am J Transplant. 2 (8), 745-757 (2002).
- Khattri, R., Cox, T., Yasayko, S. A., Ramsdell, F. An essential role for Scurfin in CD4+CD25+ T regulatory cells. Nat Immunol. 4 (4), 337-342 (2003).
- Liu, W., et al. CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ T reg cells. J Exp Med. 203 (7), 1701-1711 (2006).
- Sakaguchi, S., Sakaguchi, N., Asano, M., Itoh, M., Toda, M. Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor alpha-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance causes various autoimmune diseases. J Immunol. 155 (3), 1151-1164 (1995).
- Dai, Z., et al. Natural CD8+CD122+ T cells are more potent in suppression of allograft rejection than CD4+CD25+ regulatory T cells. Am J Transplant. 14 (1), 39-48 (2014).
- Guillonneau, C., Picarda, E., Anegon, I. CD8+ regulatory T cells in solid organ transplantation. Curr Opin Organ Transplant. 15 (6), 751-756 (2010).
- Kim, H. J., et al. Stable inhibitory activity of regulatory T cells requires the transcription factor Helios. Science. 350 (6258), 334-339 (2015).
- Manavalan, J. S., et al. Alloantigen specific CD8+CD28- FOXP3+ T suppressor cells induce ILT3+ ILT4+ tolerogenic endothelial cells, inhibiting alloreactivity. Int Immunol. 16 (8), 1055-1068 (2004).
- Picarda, E., et al. Transient antibody targeting of CD45RC induces transplant tolerance and potent antigen-specific regulatory T cells. JCI Insight. 2 (3), e90088 (2017).
- Ménoret, S., et al. Phenotypic and functional characterization of CD8(+) T regulatory cells. Methods Mol Biol. 677, 63-83 (2011).
- Boor, P. P. C., et al. Human plasmacytoid dendritic cells induce CD8+ LAG-3+ Foxp3+ CTLA-4+ regulatory T cells that suppress allo-reactive memory T cells. Eur J Immunol. 41 (6), 1663-1674 (2011).
- Olson, B. M., Sullivan, J. A., Burlingham, W. J. Interleukin 35: a key mediator of suppression and the propagation of infectious tolerance. Front Immunol. 4, 315 (2013).
- Shimizu, J., Yamazaki, S., Takahashi, T., Ishida, Y., Sakaguchi, S. Stimulation of CD25(+)CD4(+) regulatory T cells through GITR breaks immunological self-tolerance. Nat Immunol. 3 (2), 135-142 (2002).
- Myers, L., Croft, M., Kwon, B. S., Mittler, R. S., Vella, A. T. Peptide-specific CD8 T regulatory cells use IFN-gamma to elaborate TGF-beta-based suppression. J Immunol. 174 (12), 7625-7632 (2005).
- Bouaziz, J. D., Le Buanec, H., Saussine, A., Bensussan, A., Bagot, M. IL-10 producing regulatory B cells in mice and humans: state of the art. Curr Mol Med. 12 (5), 519-527 (2012).
- Durand, J., Chiffoleau, E. B cells with regulatory properties in transplantation tolerance. World J Transplant. 5 (4), 196-208 (2015).
- Pallier, A., et al. Patients with drug-free long-term graft function display increased numbers of peripheral B cells with a memory and inhibitory phenotype. Kidney Int. 78 (5), 503-513 (2010).
- Guillonneau, C. Efficacy of Myeloid Derived Suppressor Cells on Transplant Survival. Transplantation. 99 (10), 2017-2019 (2015).
- Wood, K. J., Bushell, A., Hester, J. Regulatory immune cells in transplantation. Nat Rev Immunol. 12 (6), 417-430 (2012).
- Han, Y., et al. Pathogen-expanded CD11b+ invariant NKT cells feedback inhibit T cell proliferation via membrane-bound TGF-β1. J Autoimmun. 58, 21-35 (2015).
- Mesnard, L., et al. Invariant natural killer T cells and TGF-beta attenuate anti-GBM glomerulonephritis. J Am Soc Nephrol. 20 (6), 1282-1292 (2009).
- Mi, Q. S., Ly, D., Zucker, P., McGarry, M., Delovitch, T. L. Interleukin-4 but not interleukin-10 protects against spontaneous and recurrent type 1 diabetes by activated CD1d-restricted invariant natural killer T-cells. Diabetes. 53 (5), 1303-1310 (2004).
- Sharif, S., et al. Activation of natural killer T cells by alpha-galactosylceramide treatment prevents the onset and recurrence of autoimmune Type 1 diabetes. Nat Med. 7 (9), 1057-1062 (2001).
- Wermeling, F., Lind, S. M., Jordö, E. D., Cardell, S. L., Karlsson, M. C. I. Invariant NKT cells limit activation of autoreactive CD1d-positive B cells. J Exp Med. 207 (5), 943-952 (2010).
- Yang, S. H., et al. Sulfatide-reactive natural killer T cells abrogate ischemia-reperfusion injury. J Am Soc Nephrol. 22 (7), 1305-1314 (2011).
- Picarda, E., et al. MHC-derived allopeptide activates TCR-biased CD8+ Tregs and suppresses organ rejection. J Clin Invest. 124 (6), 2497-2512 (2014).
- Guillot, C., et al. Prolonged blockade of CD40-CD40 ligand interactions by gene transfer of CD40Ig results in long-term heart allograft survival and donor-specific hyporesponsiveness, but does not prevent chronic rejection. J Immunol. 168 (4), 1600-1609 (2002).
- Guillonneau, C., et al. Inhibition of chronic rejection and development of tolerogenic T cells after ICOS-ICOSL and CD40-CD40L co-stimulation blockade. Transplantation. 80 (4), 546-554 (2005).
- Guillonneau, C., et al. Anti-CD28 antibodies modify regulatory mechanisms and reinforce tolerance in CD40Ig-treated heart allograft recipients. J Immunol. 179 (12), 8164-8171 (2007).
- Qin, S., et al. "Infectious" transplantation tolerance. Science. 259 (5097), 974-977 (1993).
- Picarda, &. #. 2. 0. 1. ;., Ossart, J., Bézie, S., Guillonneau, C. Key role of allopeptide-specific CD8(+) Tregs in transplantation. Médecine Sci (Paris). 31 (1), 22-24 (2015).
- Chevalier, S., Lacroix, H., Moreau, J. F., Soulillou, J. P. Blood transfusion plus allograft–but not blood transfusion alone–induce IL 2-producing suppressor cells in Lew-1A recipients of LEW-1W heart allograft. Transplant Proc. 19 (1 Pt 1), 544-546 (1987).
- Fang, C., et al. Autoimmune responses against renal tissue proteins in long-term surviving allograft recipients. Transpl Int. 22 (11), 1091-1099 (2009).
- Yang, C. P., Bell, E. B. Persisting alloantigen prevents primed CD45RC- CD4 T cells from inducing allograft rejection: implications for immunological memory. Eur J Immunol. 29 (7), 2177-2186 (1999).
- Durand, J., et al. Regulatory B Cells with a Partial Defect in CD40 Signaling and Overexpressing Granzyme B Transfer Allograft Tolerance in Rodents. J Immunol. 195 (10), 5035-5044 (2015).
- Iwata, Y., et al. Characterization of a rare IL-10-competent B-cell subset in humans that parallels mouse regulatory B10 cells. Blood. 117 (2), 530-541 (2011).
- Newell, K. A., et al. Identification of a B cell signature associated with renal transplant tolerance in humans. J Clin Invest. 120 (6), 1836-1847 (2010).
- Sagoo, P., et al. Development of a cross-platform biomarker signature to detect renal transplant tolerance in humans. J Clin Invest. 120 (6), 1848-1861 (2010).
- Guillonneau, C., David, L., Anegon, I. Improved Analyses of CD8+ T Cell Specificities Using Multimers of Peptide MHC Complexes Coupled to DNA Barcodes. Transplantation. 101 (2), 219-221 (2017).
