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方法論記事

側方腹腔ドリルビット傷害を利用した羊の腰椎椎間板変性モデル

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DOI:

10.3791/55753

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2017年5月25日

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この記事について

サマリー

椎間円板の変性は、背痛および世界的な障害の主要な原因に大きく寄与する。椎間板変性の多くの動物モデルが存在する。一貫した椎間板損傷および再現性のある椎間板変性を達成するドリルビットを利用して、椎間板変性のヒツジモデルを実証する。

要約

椎間板の変性は、背痛の発症および世界的な障害の主要原因に大きく寄与する。椎間板変性の数多くの動物モデルが開発されている。理想的な動物モデルは、形態、生体力学的性質、および脊索細胞の欠如に関して、ヒト椎間板を酷似して模倣すべきである。ヒツジ腰椎椎間板モデルは、これらの基準を満たす。本発明者らは、横方向の後腹膜アプローチによるドリルビット損傷を利用した椎間板変性のヒツジモデルを提示する。側方アプローチは、ヒツジ背骨への伝統的な前方アプローチに伴う切開および潜在的な罹患率を有意に減少させる。ドリルビットの損傷方法を利用することにより、一定の程度の椎間板変性を開始する、正確で寸法の一貫した再現性のある損傷を生成する能力が得られる。環状の焦点の性質核脊髄欠損は、焦点椎間板ヘルニアの臨床状態をより密接に模倣する。羊はこの手順に従って急速に回復し、通常は移動して1時間以内に食べています。椎間板変性が起こり、羊は8週間の期間で検死およびその後の分析を受ける。我々は、椎間板変性のドリルビット損傷モデルが、従来の環状損傷モデルよりも利点があると考えている。

概要

腰痛は世界中の障害の主要原因です1 。腰椎椎間板変性に関連する椎間板形成性疼痛は、腰痛の重大な原因と考えられている2 。変性プロセスの理解を広げ、潜在的な治療法の研究のために、椎間板疾患の信頼できる動物モデルに対する需要が高まっている。

椎間板変性の数多くの動物モデルが存在する3 。変性椎間板疾患の研究に用いられる動物モデルは、マウス4から 、イヌ5 、ヒツジ6 、および非ヒト霊長類7などのより大きな哺乳動物までの大きさの範囲にある。椎間板変性を誘発するために使用される方法は、機械的( 例えば、椎間板の圧迫 ( 例えば、化学的核分解5 )、またはそれほど一般的ではない自発的変性( 例えば 、砂ラット9 )を含むが、これらに限定されない。

人間の椎間板変性の複雑さを考えると、完璧な動物モデルは存在しない。しかし、この状態を模倣するため....

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プロトコル

この原稿で詳述されているプロトコルは、Monash University Animal Ethicsの動物保護ガイドラインに従っています。このプロトコルに関する動物倫理の承認は、Monash University動物倫理によって認められています。倫理承認番号:MMCA / 2014/55

1.羊の準備

注:2〜4歳のEwesを使用した。

  1. 麻酔前18時間の高速羊。操作19の前に6-12時間まで動物に水を供給する。
  2. 手術室への移送を容易にするために、塩酸メデトミジン(0.015-0.020mg / kg)の静脈注射により動物を鎮静させる。
    注:メデトミジン塩酸塩は、手術室への移送のために、他の動物との分離に伴う動物のストレスおよびかき混ぜを軽減するのに役立つ。
  3. 手術室への到着時に麻酔を誘導するためにチオペンオン(10〜13mL / kg)を注入する。
  4. 予防的イントラを管理する静脈内抗生物質(アモキシシリン1g IV)をチオペンタール注射直後に投与する。
  5. 気管内チューブ20内径7.5〜9mmの挿管羊。
  6. 2L /分の流速で100%酸素中で吸入イソフルラン(2〜3%)を用いて麻酔を維持する。羊の耳にパルスオキシメー....

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結果

術前に、ヒツジは根底にある椎間板の形態および変性の評価のためのベースライン3T磁気共鳴画像法(MRI)を受けた。羊は、椎間板レベルの確認および椎間板高さ指数の計算のために、追加の術中側方X線撮影を受けた。 図1に 、3T MRIの術前矢状面スライスと術中X線写真を示します。

figure-results-1
図1:術前3T MRI( A )および術中側方X線写真( B )。 ( A )腰椎1/2(L1 / 2)から腰仙(L6 / S1)椎間板への3T MRI(3T T2強調スピンエコーシーケンス)からの矢状スライス。椎間板は均一な高次の外観を有する重大な.......

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ディスカッション

この最小侵襲性の側方アクセスアプローチは、このシリーズで観察された術後ヘルニア、腹部裂開または感染症がなく、有効かつ安全である。深さ止めを有するドリルビット椎間板損傷モデルの使用は、既知の寸法( すなわち 、本研究では直径3.5mm×深さ12mmの損傷)の一貫した椎間板損傷を誘発する再現可能な方法を提供する。我々の経験では、この方法は、従来の卵形メス刃の腰椎椎間板切開モデル6,22(未発表データ)で観察されたものよりも重篤度の低い椎間板変性を生じる。これについては、今後の出版物で説明する。

最初の長手方向の皮膚切開(ステップ2.9)を行う際、切開の正確な長さと位置は、所望の椎間板レベルに基づいて変更されるべきである。より優れたディスクレベル(T12 / L1)は、切開部を肋骨冠部にまで延ばし、腸骨稜部に伸びる切開部は下部腰椎(L5 / L6まで)へのアクセスを可能にする。 10cmのカットは3〜4枚のディスクレベルへのアクセスを容易にしますが、シングルディスクへのアクセスには5cmの小さな切開が必要です。我々は、通常L2 / L3とL3 / 4の2つのレベルで怪我.......

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開示事項

著者らは、開示すべき競合する金銭的利益がないと宣言している。

謝辞

クリス・デイリー博士は、リチャード・ジープソン研究奨学金の手術のための基金の受領者です。著者たちは、Anne Gibbon博士、ドン・ジャン医師、モナッシュ・アニマル・サービス(Monash Animal Services、Monash University)のスタッフに、動物の手術とケアの支援について感謝したいと考えています。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
メデトミジン塩酸塩(10 mL注射)セラポン/ゾエティスPFIDOM10複数のサプライヤー:ゾエティス/イリウム
チオペントントロイトリオチオープントーン複数のサプライヤー:ネオンラボラトリーズ、ヤグソンファーマシューティカル
ティカルズ イソフルラン(酸素中2〜3%)バクスターAHN3636複数のサプライヤー:バクスター/VetOne
アモキシシリン非経口グラクソ・スミスクラインJO1CA04複数のサプライヤー: グラクソ・スミスクライン/メルク
ブピバカイン (0.5% 注射 20 mL)ファイザー005BUP001複数のサプライヤー: ファイザー/アストラゼネカ
PVD ヨウ素溶液Jurox61330複数のサプライヤー: Jurox/Orion
クロルヘキシジン 5%w/vJuroxChlorhex C 5L (SCRUB)複数のサプライヤー: Jurox/ファイザー
経皮フェンタルパッチ(75 μg/h)ヤンセン・シラグS8-Dur7.5複数のサプライヤー:サンド・
ブプレノルフィン ivジュロックス504410複数のサプライヤー:LGM Pharma
アチパメゾール (アンチセダン 0.06 mg/kg - 0.08 mg/kg)ゾエティスPFIANT10複数のサプライヤー:イリウム
・オスター ゴールデン A5 2スピード・クリッパーオスター078005-140-003オスター
20 mL ルアーロック・シリンジテルモ6SS+20L複数のサプライヤー: Medshop Australia/Terumo
21 G IV 針TerumoSG3-1225複数のサプライヤー: Medshop Australia/Terumo
#4 メス ハンドルAustvetAD010/04複数のサプライヤー: Austvet/SurgicalInstruments
#22 scalpel baldesAustvet
Gillies tissue forcepsAustvetAB430/15複数のサプライヤー:Austvet/SurgicalInstruments
Metzenbaum湾曲解剖はさみAustvetAC101/14複数のサプライヤー:Austvet/SurgicalInstruments
Deaver retractorSurgical Instruments23.75.03複数のサプライヤー:Surgical Instrument/Austvet
Hohmann retractorAustvetKA173/35複数のサプライヤー:Austvet/SurgicalInstruments
メイヨー縫合はさみAustvetAC911/14複数のサプライヤー:Austvet / SurgicalInstruments
ニードルホルダー14 cm EliteMedical18-1030複数のサプライヤー: EliteMedical/Austvet
CMT 3.5 mm ブラッドポイントドリルCarbatec516-035-51複数のサプライヤー: Southeast Tool / Carbatec
ドリルビットストップ 4 mmドリル倉庫20121600複数のサプライヤー: Amazon
Bosch 10.8 V コードレスアングルドリルGet Tools DirectGWB10.8V-LIBB複数のサプライヤー:Bunnings/Get Toolsダイレクト
オートクレーブ動物用ドリルバッグAustVetDRA043-AVAustVet
2-0 吸収性合成編組縫合糸EthiconVCP335HEthicon
3-0 吸収性合成編組縫合糸EthiconVCP232HEthicon
Siemens 3 Tesla Skyra Widebore MRISiemensN/ASiemens
9.4 Tesla Agilent (Varian) MRIAgilent TechnologiesN/AAgilent Technologies
Atomscope HF 200 A RadiogaphRadlink330003A複数のサプライヤー: Radlink/DLC オーストラリア
獣医用パルスオキシマイターDLC 192500A複数のサプライヤー:DLC Australi Pty Ltd / AustVet
シュー

参考文献

  1. Hoy, D., March, L., et al. The global burden of low back pain: estimates from the Global Burden of Disease 2010 study. Ann Rheum Dis. 73 (6), 968-974 (2014).
  2. Luoma, K., Riihimäki, H., Luukkonen, R., Raininko, R., Viikari-Juntura, E., Lammine, A. Low back pain in relati....

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