إصابة حروق شديدة في نموذج الخنازير للتقييم اﻻكلينيكي خلع الملابس
Summary
لتقليد عن كثب أن وضع إصابات الحروق يتطلب التفاعل بين الملاحظة الإكلينيكية والدراسات في النماذج الحيوانية. في هذه الدراسة، أنشئ نموذج الخنازير لحروق شديدة الضرر لتقييم خلع ملابس تجريبية في إعدادات الفسيولوجية والفيزيولوجية المرضية.
Abstract
التئام الجروح هو عملية دينامية إصلاح، وهو عملية بيولوجية الأكثر تعقيداً في حياة الإنسان. ردا على حرق الإصابة، تنال التعديلات في الممرات البيولوجية استجابة التهاب، أدى إلى تأخر التئام الجروح. ضعف التئام الجروح كثيرا ما يحدث في المرضى الذين يعانون من مرض السكري مما يؤدي إلى نتائج سلبية مثل بتر الأطراف. ومن ثم، هناك حاجة إلى الضمادات لها تأثير مفيد في تعزيز إصلاح الجرح حرق. الدراسات المتعلقة بمعالجة جرح الحرق غير محدودة بسبب عدم وجود نماذج حيوانية السليم. دراستنا السابقة أظهرت أداء التئام الجروح في نماذج الفئران والخنازير باستخدام تقنية جراحية كسبها. هدفت هذه الدراسة إلى إثبات نموذج الخنازير لحروق شديدة الضرر الذي يلغي تقلص الجرح وأكثر عن كثب يقترب البشرية عمليات إعادة ابيثيلياليزيشن وتشكيل الأنسجة الجديدة. يوفر هذا البروتوكول إجراء مفصل لخلق متسقة حرق الجروح ودراسة أداء التئام تحت معاملة خلع الملابس التجريبية في نموذج الخنازير. ستة حرق الجروح تم إنشاؤها شكل متناظر في دورسوم، التي كانت مغطاة بتضميد السريرية وتتألف من أربع طبقات: طبقة اتصال داخلية المواد التجريبية، طبقة متوسطة داخلية من الفيلم للماء، وطبقة متوسطة خارجي من الشاش، وطبقة لاصقة الجص خارجي. عند انتهاء التجارب، بحثت إغلاق الجرح ومنطقة الجرح ودرجة “مقياس ندبة فانكوفر”. وأعدت الأشيع عينات جلد مستأصل من كل تضحية بعد الحيوان والملون باستخدام الهيماتوكسيلين وتلطيخ ويوزين. كما تم بحث النشاط المضاد للبكتيريا من كل خلع الملابس في سياق التئام الجروح. تطبيق الملابس السريرية للجروح في نموذج الخنازير يحاكي العمليات البيولوجية للإنسان الجرح الشفاء فيما يتعلق بعمليات ابيثيلياليزيشن، وانتشار الهاتف الخلوي، وتولد الأوعية. ولذلك، يوفر هذا النموذج الخنازير طريقة سهلة التعلم، وفعالة من حيث التكلفة، وقوية لتقييم تأثير الضمادات السريرية في حروق شديدة الضرر.
Introduction
يبدأ عملية تحريضية لإصابة حرق والحث على الآثار المرضية المعقدة، والتي تؤثر على العديد من وظائف الجسم فورا بعد وقوع حادث، أسفر عن أثر سلبي على نوعية حياة المرضى. ضعف التئام يسبب كبيرة المراضة والوفيات بين المرضى بالسكري1،2. معظم المرضى الذين يعانون من إصابات الحروق تجربة الألم أثناء حرق الجرح ديبريديمينت، الذي يعرف باسم عملية الموجعة على الرغم من استخدام المسكنات شبه الأفيونية القوية3.
خلافا لغيرها من الثدييات، الخنازير بمشاركة العديد من الخصائص التشريحية والفسيولوجية مع البشر فيما يتعلق بعملية ابيثيلياليزيشن، وانتشار الهاتف الخلوي، وتولد الأوعية. وهذا يجعل الخنازير يحتمل أن تكون أفضل نموذج لبعض الإجراءات والدراسات، وهي غالباً ما تستخدم في الدراسات اللاحقة التي أظهرت نتائج واعدة في الفئران. وأدت هذه الميزات إلى الاستخدام المتزايد للخنازير كأنواع رئيسية في التجارب السريرية. في الآونة الأخيرة، لوحظ زيادة سريعة في البحوث الطبية الحيوية مع الاحترام القلب والأوعية الدموية، والمسالك البولية، غلافي، ونظم الجهاز الهضمي4،،من56. تهدف هذه الدراسة إلى إظهار نموذج الخنازير لحروق شديدة الضرر الذي يلغي تقلص الجرح ويوفر تقريب أكثر قربا من عمليات شفاء الجروح البشرية وتكوين أنسجة جديدة. تم إنشاؤها ستة حرق الجروح شكل متناظر في دورسوم، ثلاثة على كل جانب من العمود الفقري للخنازير. بعد ذلك، تم بحث أنيكسبيريمينتال خلع الملابس في نموذج الخنازير لحروق شديدة الضرر، التي يمكن تكييفها لتكرار التئام البشرية (الشكل 1). الجروح كانت مغطاة بخلع ملابس سريرية، وهي مؤلفة من أربع طبقات: طبقة اتصال داخلي للمواد التجريبية وطبقة متوسطة داخلية من الفيلم للماء وطبقة متوسطة خارجي من الشاش وطبقة لاصقة الجص خارجي. فيلم لماء تبقى البيئة الجرح رطبة بينما منع العدوى البكتيرية والسماح للغازات أن تتخلل خلع الملابس. كان يطبق على أفلام للماء الخارجي طبقة متوسطة من الشاش وتأمين طبقة لاصقة الجص خارجي. وبحثت في انتهاء التجارب، إغلاق الجرح ومنطقة الجرح ودرجة مقياس ندبة فانكوفر (VSS). عينات جلد مستأصل من كل تضحية بعد الحيوان وأعدت الأشيع والملون باستخدام الهيماتوكسيلين وتلطيخ ويوزين (أنه). كما تم بحث النشاط المضاد للبكتيريا من كل خلع الملابس في سياق التئام في هذا النموذج. دراستنا السابقة أثبتت التئام الأداء في نموذج الفئران والخنازير باستخدام تقنية جراحية كسبها7. نظراً لوجود ستة حرق الجروح على دورسوم داخل كل الخنازير، كل خلع الملابس التجريبية اختبارها وتقييمها في جميع الوظائف للتقليل من التحيز المتصلة بالجرح عملية الشفاء في مواقع مختلفة في دورسوم الخنازير. ولذلك، نموذج الخنازير من حروق شديدة الضرر في هذه الدراسة يقدم نهجاً جديداً لتقييم الضمادات السريرية ويسهل تطوير علاج إصابة حرق الرواية. وتوفر هذه الدراسة أدوات حاسمة لكشف الفسيولوجيا المرضية لحرق التئام الجروح.
Protocol
Representative Results
Discussion
هذه الدراسة وضعت نموذجا الخنازير لحروق شديدة الضرر وبحث في نموذج باستخدام خلع ملابس التي تحتوي على أحرف استهلالية. نتائجنا تشير إلى أن هذا النموذج الخنازير يمكن استخدامها لرصد أداء السريرية من الضمادات تجريبية، بما في ذلك الخصائص المضادة للبكتيريا. الجرح الشفاء معدل وإغلاق الجرح والنشا?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
كان يؤيد هذه الدراسة بمنحه من المستشفى تراي-الخدمة العامة؛ المركز الطبي للدفاع الوطني، وتايوان (تسغ-C107-042)؛ وزارة العلوم والتكنولوجيا، وتايوان (معظم 106-2314-ب-016-014)؛ والمركز الطبي الدفاع الوطني (ماب-106-055؛ ماب-106-010؛ MAB-107-064).
Materials
| Sedation: | ||||
| Ketamine | Merial | 2528 ESP | 10 mL vial | |
| Azaperone | China chemical & pharmaceutical | 47W406 | 100 mL vial | |
| Atropine | Oriental chemical works | IN120802 | 1 mL vial | |
| Anesthetic: | ||||
| Tiletamine+Zolazepam | Virbac | BC91 | 5 mL vial | |
| Isoflurane | Baxter | N002A225 | 100 mL vial | |
| Surgery: | ||||
| Hair clippers | Moser | – | – | |
| Povidone iodine scrub solution | Ever star | HA161202 | 4 L barrel | |
| Modified iron | – | – | – | |
| Electronic thermometer | Dogger | A9SA-ST9215C | – 50~300℃ | |
| 0.9% saline solution | CHI SHENG | KC130 | 500 mL vial | |
| Gauze | China Surgical Dressings Center | MO15900080 | 10 x10 cm | |
| CAPS | CoreLeader Biotech Co., Ltd, Taipei, Taiwan | – | – | |
| Paper tape | 3M | NDC-8333-1530-01 | 2.5 cm x 9.1m | |
| Waterproof film | 3M | NDC-8333-1600-40 | 10 cm x 10 m | |
| Adhesive plaster | Young chemical | BH1426015 | 10 cm x 10 m | |
| Dissection: | ||||
| Pair of standard sharp/blunt straight scissors (14 cm) | Shinetec instruments | ST-S114 | – | |
| Halstead-Mosquito (12.5 cm) | Shinetec instruments | ST-H012 | – | |
| Handle(# 4) | Shinetec instruments | ST-H004 | – | |
| Surgical Blade(#21) | Shinetec instruments | ST-B021 | – | |
| Post-Fixation & Storage: | ||||
| 50 ml Plastic centrifuge tube | Falcon | 352070 | – | |
| 10% neutral buffered formalin | Leica | 3800604EG | – | |
| Bacterial Growth Experiments | ||||
| Blood agar plate (BAP) (TSA with 5% sheep blood) | CMP | – | 90 mm Mono |
References
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair Regeneration. 17, 763-771 (2009).
- Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regeneration. 17, 1-18 (2009).
- Verhaegen, P. D., et al. Differences in collagen architecture between keloid, hypertrophic scar, normotrophic scar, and normal skin: an objective histopathological analysis. Wound Repair Regeneration. 17, 649-656 (2009).
- Swindle, M. M., Adams, R. J. . Experimental Surgery and Physiology: Induced Animal Models of Human Disease. , (1988).
- Swindle, M. M., Smith, A. C. . Swine as Models in Biomedical Research. , (1992).
- Tumbleson, M. E., Schook, L. B. . Advances in Swine in Biomedical Research. Vols 1-2. , (1996).
- Wang, C. H., et al. Enhanced wound-healing performance of a phyto-polysaccharide-enriched dressing – a preclinical small and large animal study. International Wound Journal. 14, 1359-1369 (2017).
- Rowan, M. P., Cancio, L. C., Elster, E. A., Burmeister, D. M., Rose, L. F., Natesan, S., Chan, R. K., Christy, R. J., Chung, K. K. Burn wound healing and treatment: review and advancements. Journal of Critical Care. 19, 243 (2015).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 969618, 8 (2011).
- Gaines, C., Poranki, D., Du, W., Clark, R. A., Van Dyke, M. Development of a porcine deep partial thickness burn model. Burns. 39, 311-319 (2013).
- Gnyawali, S. C., Barki, K. G., Mathew-Steiner, S. S., Dixith, S., Vanzant, D., Kim, J., Dickerson, J. L., Datta, S., Powell, H., Roy, S., Bergdall, V., Sen, C. K. High-resolution harmonics ultrasound imaging for non-invasive characterization of wound healing in a pre-clinical swine model. PLoS One. 10 (3), e0122327 (2015).
- Eaglstein, W. H., Mertz, P. M. New methods for assessing epidermal wound healing: the effects of triamcinolone acetonide and polyethelene film occlusion. Journal of Investigative Dermatology. 71, 332-384 (1978).
- Swindle, M. M., Smith, A. C. Comparative anatomy and physiology of the pig. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Sciences. 25, 1-10 (1998).
- Swindle, M. M. . Swine in the Laboratory: Surgery, Anesthesia, Imaging and Experimental Techniques. , (2007).
- Mertz, P. M., et al. IL-1 as a potent inducer of wound re-epithelization. Progress in Clinical and Biological Research. 365, 473-480 (1991).
- Eming, S. A., Martin, P., Tomic-Canic, M. Wound repair and regeneration: mechanisms, signaling, and translation. Science Translation Medicine. 6, 265-266 (2014).
- Aryza, M. J., Baryza, G. A. The Vancouver Scar Scale: an administration tool and its interrater reliability. The Journal of Burn & Rehabilitation. 16, 535-538 (1995).
- Bystrom, A., Claesson, R., Sundqvist, G. The antibacterial effect of camphorated paramonochlorophenol, camphorated phenol and calcium hydroxide in the treatment of infected root canals. Endodontics & Dental Traumatology. 1, 170-175 (1985).
- Reig, A., Tejerina, C., Codina, J., Hidalgo, J., Mirabet, V. Application of a new cicatrization dressing in treating second-degree burns and donor sites. Annals of Burn and Fire Disasters. 4, 174 (1991).
- Hindy, A. Comparative study between sodium carboxymethyl-cellulose silver, moist exposed burn ointment, and saline-soaked dressing for treatment of facial burns. Annals of Burn and Fire Disasters. 22, 131-137 (2009).
- Galiano, R. D., et al. Topical vascular endothelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells. The American Journal of Pathology. 164, 1935-1947 (2004).
- Thangarajah, H., et al. The molecular basis for impaired hypoxia-induced VEGF expression in diabetic tissues. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 13505-13510 (2009).
