Lesione grave ustione in un modello di suina per valutazione clinica Dressing
Summary
Per strettamente imitare la modalità delle lesioni di ustione richiede l’interazione tra l’osservazione clinica e studi in modelli animali. In questo studio, un modello di suina della ferita di ustione severa è stato istituito per valutare una medicazione sperimentale nelle impostazioni fisiologiche e patofisiologiche.
Abstract
Guarigione delle ferite è un processo di ripristino dinamico ed è il più complesso processo biologico nella vita umana. In risposta alla lesione da ustione, alterazioni nelle vie biologiche alterano la risposta di infiammazione, con conseguente ritardata guarigione delle ferite. Alterata cicatrizzazione si verifica frequentemente nei pazienti con diabete che conduce a risultati sfavorevoli come l’amputazione. Quindi, avendo un effetto benefico nel promuovere la riparazione della ferita di ustione di medicazioni sono necessari. Tuttavia, gli studi sul trattamento della ferita dell’ustione sono limitati a causa della mancanza di modelli animali corretto. Il nostro studio precedente ha dimostrato prestazioni cicatrizzazione in modelli di ratto e suina utilizzando una tecnica chirurgica mini-invasiva. Questo studio ha mirato a dimostrare un modello suina della ferita di ustione severa che elimina la contrazione della ferita e più si avvicina i processi umani di riepitelizzazione e formazione di nuovo tessuto. Questo protocollo fornisce una procedura dettagliata per la creazione di ferite da ustione coerente ed esaminando le prestazioni di guarigione nell’ambito del trattamento di una medicazione sperimentale in un modello di suina. Sei ferite da ustione sono state create simmetricamente sul dorsum, che sono stati coperti con una medicazione clinica composta da quattro strati: uno strato interno di contatto di materiali sperimentali, uno strato intermedio interno di pellicola impermeabile, strato intermedio esterno di garza, e uno strato esterno di cerotto adesivo. Al termine degli esperimenti, la chiusura della ferita, zona della ferita e Punteggio di Vancouver Scar Scale sono stato esaminato. I campioni di pelle resecato da ogni post-sacrificio animale istologicamente sono stati preparati e colorati con ematossilina ed eosina. Inoltre è stato esaminato l’attività antibatterica di ogni medicazione nel contesto della guarigione della ferita. L’applicazione della medicazione clinica per le ferite nel modello suina imita i processi biologici di cicatrizzazione umana rispetto ai processi di epithelialization, proliferazione cellulare e l’angiogenesi. Pertanto, questo modello di suina fornisce un metodo facile da imparare, conveniente e affidabile per valutare l’effetto di medicazioni cliniche in gravi ustioni.
Introduction
Una lesione da ustione avvia il processo infiammatorio e induce effetti patologici complessi, che influenzano numerose funzioni del corpo immediatamente dopo un incidente, con conseguente impatto negativo sulla qualità della vita dei pazienti. Alterata cicatrizzazione causa significativa morbidità e mortalità tra i pazienti con diabete mellito1,2. Maggior parte dei pazienti con le lesioni da ustione provare dolore durante sbrigliamento della ferita di ustione, che è conosciuto come un processo straziante nonostante l’uso di analgesici oppioidi potente3.
A differenza di altri mammiferi, suina condivisione diverse caratteristiche anatomiche e fisiologiche con gli esseri umani per quanto riguarda il processo di epithelialization, proliferazione cellulare e l’angiogenesi. Questo rende suina un modello potenzialmente migliore per alcune procedure e studi, e sono spesso utilizzati negli studi successivi che ha dimostrato risultati promettenti in topi. Queste caratteristiche hanno portato all’uso crescente di porci come una specie maggiore in fase di test preclinici. Recentemente, un rapido aumento nella ricerca biomedica con rispetto a cardiovascolare, urinario, tegumentario e sistemi digestivi è stato osservato4,5,6. Questo studio mira a dimostrare un modello suina della ferita di ustione severa che elimina la contrazione della ferita e fornisce una migliore approssimazione dei processi di guarigione della ferita umana e la formazione di nuovo tessuto. Sei ferite da ustione sono state create simmetricamente sul dorsum, tre su ogni lato della spina dorsale del suino. Successivamente, anexperimental medicazione è stata esaminata in un modello di suina della lesione da ustione grave, che può essere adattato per replicare la guarigione della ferita umana (Figura 1). Le ferite sono stati coperti con una medicazione clinica, che si compone di quattro strati: uno strato interno di contatto di materiali sperimentali, uno strato intermedio interno di pellicola impermeabile, strato intermedio esterno di garza e uno strato esterno di cerotto adesivo. Una pellicola impermeabile mantiene la ferita in ambiente umido impedendo l’infezione batterica e permettendo gas a permeare la medicazione. Lo strato intermedio esterno di garza è stato applicato sui film impermeabile e protetto da uno strato esterno di cerotto adesivo. Al completamento degli esperimenti, sono stato esaminato la chiusura della ferita, zona della ferita e il Punteggio di Vancouver Scar scala (VSS). I campioni di pelle resecato da ogni post-sacrificio animale istologicamente sono stati preparati e colorati con ematossilina ed eosina (lui). Attività antibatterica di ogni medicazione nel contesto della guarigione della ferita inoltre è stato esaminato in questo modello. Il nostro studio precedente ha dimostrato prestazioni cicatrizzazione nel modello di ratto e suina usando una tecnica chirurgica mini-invasiva7. Dato che c’erano che sei ustioni sul dorsum all’interno di ogni suino, ogni medicazione sperimentale è stato testato e valutato in tutte le posizioni di minimizzare bias legate alla ferita il processo di guarigione in diversi punti sul dorsum suina. Pertanto, il modello di suina della lesione da ustione grave stabilita in questo studio fornisce un nuovo approccio per la valutazione di medicazioni cliniche e facilita lo sviluppo di un nuovo trattamento per lesione da ustione. Questo studio fornisce strumenti fondamentali per scoprire la patofisiologia di guarigione della ferita di ustione.
Protocol
Representative Results
Discussion
Lo studio presente ha stabilito un modello di suina della ferita di ustione severa ed esaminato il modello utilizzando una medicazione CAPS-contenente. I nostri risultati indicano che questo modello di suina può essere utilizzato per monitorare l’andamento clinico dei condimenti sperimentali, tra cui proprietà antibatterica. Cicatrizzazione di tasso, la chiusura della ferita e attività antibatterica inoltre sono stati analizzati mediante test di colorazione ed antibatterico VSS, H & E. L’uso di modelli animali ustione…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo studio è stato sostenuto da una sovvenzione del Tri-Service General Hospital; Centro medico della difesa nazionale, Taiwan (TSGH-C107-042); Ministero della scienza e della tecnologia, Taiwan (maggior parte 106-2314-B-016-014); e il centro medico della difesa nazionale (MAB-106-055; MAB-106-010; MAB-107-064).
Materials
| Sedation: | ||||
| Ketamine | Merial | 2528 ESP | 10 mL vial | |
| Azaperone | China chemical & pharmaceutical | 47W406 | 100 mL vial | |
| Atropine | Oriental chemical works | IN120802 | 1 mL vial | |
| Anesthetic: | ||||
| Tiletamine+Zolazepam | Virbac | BC91 | 5 mL vial | |
| Isoflurane | Baxter | N002A225 | 100 mL vial | |
| Surgery: | ||||
| Hair clippers | Moser | – | – | |
| Povidone iodine scrub solution | Ever star | HA161202 | 4 L barrel | |
| Modified iron | – | – | – | |
| Electronic thermometer | Dogger | A9SA-ST9215C | – 50~300℃ | |
| 0.9% saline solution | CHI SHENG | KC130 | 500 mL vial | |
| Gauze | China Surgical Dressings Center | MO15900080 | 10 x10 cm | |
| CAPS | CoreLeader Biotech Co., Ltd, Taipei, Taiwan | – | – | |
| Paper tape | 3M | NDC-8333-1530-01 | 2.5 cm x 9.1m | |
| Waterproof film | 3M | NDC-8333-1600-40 | 10 cm x 10 m | |
| Adhesive plaster | Young chemical | BH1426015 | 10 cm x 10 m | |
| Dissection: | ||||
| Pair of standard sharp/blunt straight scissors (14 cm) | Shinetec instruments | ST-S114 | – | |
| Halstead-Mosquito (12.5 cm) | Shinetec instruments | ST-H012 | – | |
| Handle(# 4) | Shinetec instruments | ST-H004 | – | |
| Surgical Blade(#21) | Shinetec instruments | ST-B021 | – | |
| Post-Fixation & Storage: | ||||
| 50 ml Plastic centrifuge tube | Falcon | 352070 | – | |
| 10% neutral buffered formalin | Leica | 3800604EG | – | |
| Bacterial Growth Experiments | ||||
| Blood agar plate (BAP) (TSA with 5% sheep blood) | CMP | – | 90 mm Mono |
References
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