Transmission sexuelle du trypanosome américaine des mâles et des femelles à des camarades de Naive
Summary
L’agent de la maladie de Chagas de Trypanosoma cruzi produit durable des infections asymptomatiques qui brusquement se développent en pathologie cliniquement reconnue. Le protocole de recherche suivant décrit une étude épidémiologique axée sur la famille de court terme pour démêler l’infection de T. cruzi transmise sexuellement des parents aux descendants.
Abstract
Trypanosomiase américaine est transmise aux humains par punaises triatomes par l’ingestion d’aliments contaminés, par transfusion sanguine ou accidentellement dans les hôpitaux et les laboratoires de recherche. En outre, l’infection par Trypanosoma cruzi est congénitalement transmise d’une mère chagasic à sa progéniture, mais la contribution du partenaire masculin à une contamination in utero est inconnue. Les résultats des nids et des touffes d’amastigotes et des trypomastigotes dans les cellules de la thèque de l’ovaire, dans le goniablasts et dans la lumière des tubules séminifères suggèrent que les infections de T. cruzi sont transmises sexuellement. Le protocole de recherche ci-après présente les résultats d’une étude familiale population montrant parasite ADN nucléaire dans les cellules mononucléaires de sang diploïde et chez les gamètes haploïdes de sujets humains. Ainsi, trois échantillons biologiques indépendants recueillis un an d’intervalle confirment que T. cruzi infections ont été sexuellement transmissibles à la descendance. Fait intéressant, le spécifique anticorps T. cruzi est absent dans la plupart des descendants famille qui portait une tolérance immunitaire à l’antigène de parasite. Tolérance immunitaire a été démontrée dans le poulet réfractaire T. cruzi après la première semaine de croissance embryonnaire et poussins éclos des oeufs inoculés flagellé étaient incapables de produire l’anticorps spécifique. En outre, l’instillation du sperme humain éjacule par voie intrapéritonéale ou dans le vagin de souris naïves a donné T. cruzi amastigotes dans l’épididyme, canal déférent et tube séminifère, tube utérin avec l’absence d’inflammatoire réactions dans les organes immunitaires privilégiés de reproduction. L’élevage de T. cruzi-des souris mâles et femelles infectées avec des camarades de naïf a abouti à l’acquisition des infections, qui ont été ensuite transmis à la descendance. Par conséquent, un solide programme d’éducation, information et communication qui implique la population et les organisations sociales est jugé nécessaire pour empêcher la maladie de Chagas.
Introduction
Le protozoaire parasite Trypanosoma cruzi , appartenant à la famille des Trypanosomatidae subit des trypomastigotes et amastigote étapes du cycle de vie chez les hôtes mammifères et existe sous la forme épimastigotes dans de l’insecte vecteur (Reduve : Triatominae) tube digestif et en culture axénique. Ces dernières décennies, plusieurs études ont montré la présence de la maladie de Chagas dans les pays sur quatre continents, a examiné les triatomes bug gratuit1,2,3,4,5, 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13; la dispersion des trypanosomes américains a été initialement attribuée à des immigrants latino-américains à l’hémisphère Nord, mais il est possible que certains soient des cas autochtones de la maladie de Chagas peut ne plus nier3,4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14. la source endogène uniquement reconnaissable de transmission de T. cruzi a été attribuée au transfert de la mère chagasic du parasite à la descendance dans environ 10 % des grossesses15; contribution du partenaire masculin aux infections in utero par le biais de sperme éjaculats est restée méconnue.
Il y a plus d’un siècle les enquêteurs16,17 observé intracellulaire T. cruzi amastigotes dans les cellules de la thèque de l’ovaire et dans le germe de la ligne des cellules des testicules des cas aigus de la maladie de Chagas. Les nids et les touffes de T. cruzi trypomastigotes et amastigotes dans les cellules de la thèque de l’ovaire, dans goniablasts et dans la lumière des tubes séminifères (Figure 1) des cas de maladie de Chagas aiguës mortels développent privilège immunitaire dans les organes de reproduction en l’absence d’inflammatoire infiltre18,19. Ces dernières décennies, quelques études expérimentales ont démontré les nids des formes amastigotes rond de T. cruzi dans le tube séminifère, l’épididyme et des canaux déférents ainsi que dans l’utérus, les tubes et les ovaires cellules de la thèque de souris infectées aiguë 1,20,21,22. En outre, dans le cadre des études familiales de documenter le transfert de protozoaire l’ADN mitochondrial de parental Chagas patients à leurs descendants, T. cruzi ADN nucléaire (Adnn) a été vérifiée en ligne de humaine germinale haploïde cellules23, et étapes du cycle de vie parasite ont été observés dans les éjaculats de chagasic souris24. Ces résultats sont en accord avec les rapports sur la tolérance immunitaire atteint par les descendants des hôtes T. cruzi –infectées en l’absence de l’anticorps spécifique1,25,26. En outre, les rapports épidémiologiques qui a suggéré la propagation de la maladie de Chagas endémique aux autres continents3,4,5,6,7,8 ,9,10,11,12,13 sont actuellement supportés par des études expérimentales montrant que la maladie de Chagas peut être transmise sexuellement1 . La présente enquête présente un protocole de l’étude épidémiologique de famille et montre que l’infection par T. cruzi se propage par les rapports sexuels.
Protocol
Representative Results
Discussion
Ici, nous discutons un protocole de recherche axée sur la famille qui ont répondu à la question de savoir si trypanosomiase humaine découle sexuellement intraspécifique T. cruzi infections. Les premières études ne pouvaient pas fournir la preuve de la transmission sexuelle des infections de T. cruzi , probablement parce que les données disponibles et des informations sur la maladie de Chagas ont été obtenus séparément de l’individuel3,4<…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous reconnaissons les installations de laboratoire et les commentaires critiques de Izabela Dourado, Carla Araujo et habile Gomes et l’assistance technique de Bruno Dalago et Rafael Andrade. Nous sommes reconnaissants à la Fondation pour l’avancement des sciences (FAPDF), le Conseil National de recherches, ministère de la Science et de technologie (CNPq/MCT) et l’agence de formation des ressources humaines, ministère de l’éducation (CAPES / ME), Brésil, pour soutenir ces enquêtes.
Materials
| BCIP and NBT redox system | Sigma-Aldrich | 681 451 001 | |
| Blood DNA Purification columns | Amersham Biosciences | 27-9603-01 | |
| d-ATP, [α-32P], 250 µCi. | Perkin Elmer | BLU012H | |
| DNA, Solution Salt Fish Sperm | AMRESCO | 064-10G | |
| dNTP Set, 100 mM Solutions | GE Healthcare | 28-4065-51 | |
| Eco RI | Invitrogen | 15202-021 | |
| Goat anti-human IgG- alkaline phosphatase conjugated | Southern Biotech | 2040-04 | |
| Goat anti-human IgG- FITC conjugated | Biocompare | MB5198020 | |
| Hybond – N+ nylon membrane | GE Healthcare | RPN303B | |
| Hybridization oven | Thomas Scientific | 95-0031-02 | |
| Micro imaging software cell Sens software | Olympus, Japan | ||
| Molecular probes labeling System | Invitrogen | 700-0030 | |
| Nsi I | Sigma-Aldrich | R5584 1KU | |
| Plasmid Prep Mini Spin Kit | GE Healthcare | 28-9042-70 | |
| Plate reader | Bio-Tek GmBH | 2015 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-alkaline phosphatase conjugated | Sigma-Aldrich | A9171 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-FITC conjugated | Sigma-Aldrich | F8888 | |
| Rabbit anti-mouse IgG- alkaline phosphatase conjugated | Sigma Aldrich | A2418 | |
| Rabbit anti-mouse IgG-FITC conjugated | Biorad | MCA5787 | |
| Spin Columns for radio labeled DNA purification, Sephadex G-25, fine | Sigma-Aldrich | G25DNA-RO | |
| Taq DNA Polymerase Recombinant | Invitrogen | 11615-010 | |
| Thermal cycler system | Biorad, USA | 1709703 | |
| Vector Systems | Promega | A1380 |
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