Sexuelle Übertragung von amerikanischen Trypanosomen von Männchen und Weibchen zu Naive Mates

Summary

Die Trypanosomen Trypanosoma Agent der Chagas-Krankheit produziert langlebige asymptomatische Infektionen, die abrupt in klinisch anerkannten Pathologie zu entwickeln. Die folgenden Forschungs-Protokoll beschreibt eine kurzfristige familienbasierte epidemiologische Studie um die T. Trypanosoma Infektion, sexuell übertragbare von übergeordneten an Nachkommen zu entwirren.

Abstract

Amerikanische Trypanosomiasis ist durch Triatomine Fehler durch den Verzehr von kontaminierten Lebensmitteln, durch Bluttransfusionen oder versehentlich in Krankenhäusern und Forschungslaboren auf den Menschen übertragen. Darüber hinaus die Trypanosomen Trypanosoma Infektion wird Geburt an einer Chagasic Mutter auf ihre Nachkommen übertragen, aber der männliche Partner Beitrag im Mutterleib Kontamination ist unbekannt. Die Ergebnisse der Nester und Klumpen von Amastigoten und Trypomastigotes in der Theca-Zellen des Eierstocks, der Goniablasts und in das Lumen der seminiferous Röhrchen legen nahe, dass T. Trypanosoma Infektionen sexuell übertragen werden. Die Forschungs-Protokoll hier präsentiert die Ergebnisse einer Familie Studie Bevölkerung zeigt Parasit Zellkern-DNA in den diploiden mononukleären Blutzellen und in der haploiden Gameten von Versuchspersonen. So bestätigte drei unabhängige biologische Proben ein Jahr auseinander, daß T. Trypanosoma Infektionen sexuell an Nachkommen übertragen wurden. Interessant ist, die spezifischen T. Trypanosoma Antikörper fehlte in den meisten Familien nachkommen, die Immuntoleranz gegen die Parasiten-Antigen zu langweilen. Immuntoleranz zeigte sich nach der ersten Woche des embryonalen Wachstums im refraktär gegenüber T. Trypanosoma Huhn und Küken schlüpften aus den Eiern ist geimpft waren nicht in der Lage, die spezifischen Antikörper zu produzieren. Darüber hinaus ejakuliert der Instillation des menschlichen Spermas, intraperitoneal oder in die Scheide der naive Mäuse ergab T. Trypanosoma Amastigoten im Nebenhoden, seminiferous Röhrchen, Samenleiter und uterine Rohr mit einer Abwesenheit von entzündlichen Reaktionen in den immun privilegierte Organen der Reproduktion. Die Zucht von T. Trypanosoma-infizierten männliche und weibliche Mäusen mit naiven Kumpels führte Erwerb der Infektionen, die später auf die Nachkommen übertragen wurden. Daher gilt eine robuste Bildung, Information und Kommunikation Programm, die die Bevölkerung und sozialen Organisationen umfasst notwendig, Chagas-Krankheit zu verhindern.

Introduction

Einzelliger Parasit Trypanosomen Trypanosoma aus der Familie Trypanosomatidae erfährt Trypomastigote und Amastigote Lebenszyklusphasen Säugetier-Wirte und existiert als Epimastigotes im Insekt-Vektor (Reduviid: Triatominae) Darm und in axenic Kultur. In den letzten Jahrzehnten zeigen mehrere Studien die Anwesenheit der Chagas-Krankheit in Ländern auf vier Kontinenten betrachtet Triatomine Fehler kostenlos^{1,2,3,4,5, 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13}; die Streuung der amerikanischen Trypanosomen wurde zunächst lateinamerikanischen Einwanderer in der nördlichen Hemisphäre zugeschrieben, aber die Möglichkeit, dass einige autochthone Fälle der Chagas-Krankheit kann nicht mehr geleugnet werden,^{3,4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14}. die nur erkennbar endogenen Übertragungsquelle T. Trypanosoma hat die Chagasic Mutter Übertragung des Parasiten auf die Nachkommen in etwa 10 % der Schwangerschaften¹⁵; zugeschrieben worden der männliche Partner Beitrag im Mutterleib Infektionen durch Sperma ejakuliert ist unerkannt geblieben.

Vor mehr als einem Jahrhundert Ermittler^16,17 beobachtet intrazellulären T. Trypanosoma Amastigoten in der Theca-Zellen des Eierstocks und der Keim Linie Zellen der Hoden von akuten Fällen der Chagas-Krankheit. Die Nester und Klumpen von T. Trypanosoma Trypomastigotes und Amastigoten in Theca-Zellen des Eierstocks, in Goniablasts und in das Lumen der seminiferous Röhrchen (Abbildung 1) der tödlichen akuten Chagas Krankheit Fälle entwickeln immun Privileg in den Organen des Reproduktion in Ermangelung von entzündliche Infiltrate^18,19. In den letzten Jahrzehnten ein paar experimentelle Studien haben Nester der Runde Amastigote Formen von T. Trypanosoma in seminiferous Röhrchen, Nebenhoden und Samenleiter als auch in der Gebärmutter, Röhren und Eierstock Theca-Zellen von akut infizierten Mäusen ^{gezeigt 1,20,21,22}. Darüber hinaus im Laufe der Familie Studien, die Übertragung von Protozoen zu dokumentieren, mitochondriale DNA von elterlichen Chagas Patienten an ihre Nachkommen, T. Trypanosoma Kern-DNA (nDNA) wurde in menschlichen haploiden Keimzellen Linie Zellen²³, überprüft, und Parasit Lebenszyklusphasen wurden in die ejakuliert Chagasic Mäuse²⁴beobachtet. Diese Erkenntnisse sind im Einvernehmen mit Berichten über die Immuntoleranz durch die Nachkommen von T. Trypanosoma –infizierten Hosts in Ermangelung der spezifischen Antikörper^1,25,26erreicht. Darüber hinaus epidemiologische Berichte, die die Verbreitung der Chagas-Krankheit endemisch auf den anderen Kontinenten^{3,4,5,6,7,8 vorgeschlagen ,9,10,11,12,13} sind nun unterstützt durch experimentelle Studien zeigen, dass die Chagas-Krankheit, die sexuell übertragen werden kann¹ . Diese Untersuchung stellt eine epidemiologische Familie Studienprotokoll und zeigt, dass T. Trypanosoma Infektion durch Geschlechtsverkehr propagiert.

Protocol

Der Mensch und das Tier Forschung Ausschüsse von der medizinischen Fakultät der Universität von Brasilia alle Verfahren mit Menschen und Versuchstieren, bzw. im Forschungsprotokolle 2500.167567 und 10411/2011 genehmigt. Die Ethik-Kommission der öffentlichen Stiftung Krankenhaus Gaspar Vianna (Protokoll Nr. 054/2009 und CONEP 11163/2009) genehmigt die freie Zustimmung-Formulare für die Feldstudie mit Erweiterung auf der Ministerium der Gesundheit National Commission on Human Research (CONEP 2585/04). Das Protokoll wu…

Representative Results

Diese Forschung, die nach dem Protokoll soll akute Fälle der Chagas-Krankheit durch klinische und parasitologischen Prüfungen zu erkennen. Venöse Blutproben wurden direkte mikroskopische Untersuchung und in-vitro-Kultur für Parasiten Wachstum ausgesetzt. Einundzwanzig akute Fälle der Chagas-Krankheit zeigten T. Trypanosoma im Blut. Die Forschungs-Protokoll gesichert die Isolation von T. Trypanosoma ECI1-ECI21 von akuten Chagas-Krankheit, und die DNA-Muster ausgestel…

Discussion

Hierin, diskutieren wir eine Familien-basierte Forschungsprotokoll, das beantwortet die Frage, ob menschliche Chagas-Krankheit aus sexuell übertragbare Wiederkäuer T. Trypanosoma stammt Infektionen. Frühe Studien konnte nicht die sexuelle Übertragung von T. Trypanosoma Infektionen, wahrscheinlich nachweisen, weil die verfügbaren Daten und Informationen über die Chagas-Krankheit separat von den einzelnen^{3,4gewonnen wurden,} <sup …

Materials

BCIP and NBT redox system	Sigma-Aldrich	681 451 001
Blood DNA Purification columns	Amersham Biosciences	27-9603-01
d-ATP, [α-32P], 250 µCi.	Perkin Elmer	BLU012H
DNA, Solution Salt Fish Sperm	AMRESCO	064-10G
dNTP Set, 100 mM Solutions	GE Healthcare	28-4065-51
Eco RI	Invitrogen	15202-021
Goat anti-human IgG- alkaline phosphatase conjugated	Southern Biotech	2040-04
Goat anti-human IgG- FITC conjugated	Biocompare	MB5198020
Hybond – N+ nylon membrane	GE Healthcare	RPN303B
Hybridization oven	Thomas Scientific	95-0031-02
Micro imaging software cell Sens software	Olympus, Japan
Molecular probes labeling System	Invitrogen	700-0030
Nsi I	Sigma-Aldrich	R5584 1KU
Plasmid Prep Mini Spin Kit	GE Healthcare	28-9042-70
Plate reader	Bio-Tek GmBH	2015
Rabbit anti-chicken IgG-alkaline phosphatase conjugated	Sigma-Aldrich	A9171
Rabbit anti-chicken IgG-FITC conjugated	Sigma-Aldrich	F8888
Rabbit anti-mouse IgG- alkaline phosphatase conjugated	Sigma Aldrich	A2418
Rabbit anti-mouse IgG-FITC conjugated	Biorad	MCA5787
Spin Columns for radio labeled DNA purification, Sephadex G-25, fine	Sigma-Aldrich	G25DNA-RO
Taq DNA Polymerase Recombinant	Invitrogen	11615-010
Thermal cycler system	Biorad, USA	1709703
Vector Systems	Promega	A1380