Mit 22 3 Anti-PD-L1-Antikörper konzentrieren sich auf Biopsie und Zytologie Proben von Patienten mit nicht-kleinzelligem Lungenkrebs
Summary
Um die Fähigkeit des Labors weltweit, die Förderfähigkeit von Patienten mit Lungenkrebs Behandlung mit Pembrolizumab, auf eine zuverlässige und reproduzierbare Weise beurteilen zu erweitern, haben wir eine Probe, die das 22 3 Antikörper-Konzentrat auf eine weithin verfügbar verwendet entwickelt. immunhistochemische Autostainer, Biopsie und Zytologie Proben.
Abstract
Pembrolizumab-Monotherapie ist für die First- und Second-Line-Behandlung von Patienten mit PD-L1-mit dem Ausdruck ihrer fortgeschrittenen nicht-kleinzelligen-Lungenkrebs (NSCLC) zugelassen. Test für PD-L1-Ausdruck mit dem PD-L1 Immunhistochemie (IHC) 22 3 Begleiter diagnostischen Assay, wodurch einen Tumor-Anteil (TPS) Gäste, auf Tumorgewebe validiert wurde. Wir entwickelten einen optimierte Labor entwickelten Test (LDT), der 22 3 Antikörper (Ab) Konzentrat auf eine weithin verfügbar IHC Autostainer Biopsie und Zytologie Proben verwendet. Der PD-L1-TPS wurde mit 120 gekoppelten ganze Tumorgewebe Abschnitte und Biopsie Proben ausgewertet und gepaart mit 70 Biopsie und Zytologie Proben (bronchiale Waschungen, n = 40; pleural Ergüsse, n = 30). Die 22 3 Ab das Konzentrat-basierte LDT zeigte eine hohe Übereinstimmung zwischen Biopsie (~ 100 %) und Zytologie (~ 95 %) Exemplare im Vergleich zum PD-L1 IHC Ausdruck anhand der PD-L1 IHC 22 3 Begleiter Assay an beiden TPS Schnitt Punkte (≥1 %, ≥50 %). Die optimierte LDT das hier vorgestellte mit 22 3 Ab Konzentrat den PD-L1-Ausdruck in beiden Tumorgewebe und zytologische Proben bestimmen wird die Fähigkeit des Labors weltweit zur Bewertung der Förderfähigkeit von Patienten mit NSCLC für die Behandlung mit erweitern Pembrolizumab-Monotherapie in zuverlässig und reproduzierbar.
Introduction
Neue klinische Studien belegen die Wirksamkeit von Pembrolizumab, ein humanisierter monoklonaler IgG4 Kappa Isotype Antikörper, die die Interaktion zwischen den programmierten Zelltod 1 (PD-1) blockiert und die Liganden, PD-L1 und PD-L2, bei der Behandlung von Patienten mit fortgeschrittenen NSCLC1,2,3,4.
Derzeit Pembrolizumab zur Behandlung von NSCLC PD-L1 mit dem Ausdruck in beiden Behandlung-naiven Patienten mit PD-L1 Ausdruck TPS ≥50 % und keine epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) oder anaplastische Lymphom Kinase (ALK) Tumor genomische Aberrationen3 zugelassen und für vorher behandelte Patienten mit einem PD-L1-TPS ≥1 %1.
PD-L1-Protein-Expression von IHC erkannt wurde weithin als eine prädiktive Biomarker-Assay für Anti-PD-1/PD-L1 Therapien eingesetzt wurde. In klinischen Studien Pembrolizumab war der PD-L1-TPS mit Formalin fixierten Paraffin-eingebetteten (FFPE) Gewebeproben erhalten anhand der PD-L1 IHC 22 3 Begleiter Assay5. Dieser Test wurde von der US Food and Drug Administration (FDA) genehmigt und wurde CE-Kennzeichnung in Europa für die Bestimmung des Tumors PD-L1 TPS5.
Weitere globale Optionen über Einrichtungen für zuverlässige und qualitativ hochwertige Auswertungen der PD-L1 TPS mit LDTs die 22 3 Antikörper Konzentrat verwenden sind unerlässlich, um klinische Entscheidungen bezüglich Patienten Anspruch auf Pembrolizumab unterstützen Behandlung. Eine große Anzahl von Pathologie-Laboratorien haben keinen Zugriff auf der Begleiter diagnostische PD-L1 IHC 22 3 Test. Daher ist die Entwicklung von zuverlässigen und Konstanten LDTs kompatibel mit zusätzlichen, weithin verfügbar IHC Autostainer Plattformen wichtig.
Darüber hinaus gibt es eine notwendige Schaffung LDTs mit zytologische Proben, die einzige Exemplar von NSCLC-Patienten häufig erhältlich sind. Der PD-L1 IHC 22 3 Begleiter Assay ist validiert für Resektionen, Kern Nadel Biopsien und Bronchoscopies nur dann, wenn die Bronchoskopie 100 Tumorzellen ergibt. Obwohl die oben genannten Probenarten häufig erhalten werden, zytologische Proben werden leichter gesammelt und sind die am weitesten verbreitete Probentyp in einigen Institutionen6,7. Allerdings gibt es derzeit keine validierten diagnostischen Test für die Auswertung des Ausdrucks PD-L1 in zytologische Proben zur Verfügung; kompatibel mit zytologische Proben zuverlässig LDTs würde weiter qualitativ hochwertige PD-L1 Prüfung erleichtern.
Darüber hinaus sollte bei der Festlegung der klinischen Validierung eine LDT der IHC in ähnlicher Weise auf die entsprechenden klinisch validierte kommerziellen Test8durchgeführt werden. Zum Beispiel sollte mehrere kritische Schritte überprüft werden, um das gleiche Signal in Schnittserien wie Antikörper-Titration, Vorbehandlung Verzögerungen, Inkubationszeit und Verstärkung Systeme9zu erhalten.
Wir haben vor kurzem eine optimierte LDT, die das 22 3 Antikörper-Konzentrat verwendet den PD-L1-Ausdruck auf Tumor Biopsien und zytologische Proben10,11auswerten entwickelt. Wir fanden eine hohe Übereinstimmung mit der LDT im Vergleich zu der “Goldstandard” PD-L1 IHC 22 3 Assay10,11. Dieses klinisch validierte Protokoll wird zuverlässige, qualitativ hochwertige PD-L1 Tests in den Regionen weltweit unterstützen.
Protocol
Representative Results
Discussion
Wir haben eine optimierte LDT mit den 22 3 PD-L1-Antikörper-Konzentrat, durch den Vergleich mit den entsprechenden klinisch validierte kommerziellen Test10,11validiert. Die 22 3 konzentriert Antikörper-basierten LDT zeigten eine hohe Übereinstimmung zwischen Biopsie (~ 100 %) und Zytologie (~ 95 %) Exemplare im Vergleich zu den PD-L1 IHC-Ausdruck mit Hilfe des PD-L1 IHC 22 3 Tests bei ≥1 % TPS und ≥50 % TPS Schnitt Punkte ermittelt. Wie vor kurzem empfohle…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Studie wurde unterstützt von Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA. Die Geldgeber spielte keine Rolle im Studiendesign, Datenerfassung und Analyse, Entscheidung, zu veröffentlichen oder der Manuskripterstellung.
Materials
| NovaPrep HQ1 | Novacyt | NA | Preservative solution for cytology specimens |
| Novaprep® HQ+ B | Novacyt | NA | Mucolytic solution |
| Tissue-Tek VIP 6 | Sakura | 6042 VIP 6 | |
| Tissue-Tek TEC 5 Tissue Embedding Console System | Sakura | 5229 TEC 5 | |
| microscope glass slide SuperFrost Plus | Thermo Fisher Scientific | 4951PLUS4 | |
| DL-Dithiothreitol powder | Sigma-Aldrich | D3801 | |
| Heidolph Multi Reax Vortex Shaker | Thermo Fisher Scientific | 13-889-410 | |
| Shandon Cytoblock | Thermo Fisher Scientific | 7401150 | |
| 22C3 anti-PD-L1 concentrate antibody | Agilent Dako | #M365329 | |
| PD-L1 IHC 22C3 pharmDx | Agilent Dako | SK006 | |
| Autostainer Link 48 | Agilent Dako | AS480 | |
| BenchMark ULTRA autostainer | Ventana | #750-600 | |
| OptiView HQ Universal Linker | Ventana | #760-700 | |
| OptiView HRP Multimer | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Amplification H2O2 | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplifier | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplification Multimer | Ventana | #760-100 | |
| OptiView DAB | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Copper | Ventana | #760-700 | |
| Hematoxylin II | Ventana | #790-2208 | |
| Bluing Reagent | Ventana | #760-2037 | |
| Cell Conditioning 1 (CC1) | Ventana | #950-124 | |
| Tissue-Tek Film Coverslipper | Sakura | 4742 |
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