Med 22C 3 Anti-PD-L1 antistoff konsentrere seg om biopsi og cytologi eksempler fra ikke-småcellet lungekreft pasienter
Summary
For å utvide evnen til laboratorier over hele verden for å vurdere kvalifiseringskravene for pasienter med lungekreft behandling med pembrolizumab, på en pålitelig og reproduserbar måte, utviklet vi en analyse som bruker 22C 3 antistoff konsentrat på en allment tilgjengelig Immunohistochemical autostainer, for både biopsi og cytologi prøver.
Abstract
Pembrolizumab monoterapi er godkjent for første – og andre-linje behandling av pasienter med PD-L1-uttrykke avansert ikke-småcellet lungekreft (NSCLC). Testing av PD-L1 uttrykk med PD-L1 immunohistochemistry (IHC) 22C 3 følgesvenn diagnostiske analysen, som gir en svulst andel score (TPS), har blitt validert på tumor vev. Vi utviklet en optimalisert laboratorium utviklet test (LDT) som bruker 22C 3 antistoff (Ab) konsentrat på en allment tilgjengelig IHC autostainer for biopsi og cytologi prøver. PD-L1 TPS ble evaluert med 120 sammenkoblede hele-tumor vev deler og biopsi prøver og med 70 sammen biopsi og cytologi eksempler (bronkial vasker, n = 40; pleural effusions, n = 30). 22C 3 Ab konsentrat-baserte LDT viste et høyt for overensstemmelse mellom biopsi (~ 100%) og cytologi (~ 95%) prøver i forhold til PD-L1 IHC uttrykk bestemmes ved hjelp av PD-L1 IHC 22C 3 følgesvenn analysen på begge TPS kuttet poeng (≥1%, ≥50%). Optimalisert LDTEN presenteres her, bruker 22C 3 Ab konsentrat til å bestemme PD-L1 uttrykket i begge tumor vev og cytologi prøver, vil utvide evnen til laboratorier over hele verden for å vurdere kvalifiseringskravene for pasienter med NSCLC for behandling med pembrolizumab monoterapi på en pålitelig og reproduserbar måte.
Introduction
Siste kliniske studier har bevist effekten av pembrolizumab, et humanized monoklonalt IgG4 kappa isotype antistoff som blokkerer samspillet mellom programmert celledød 1 (PD-1) og dens ligander, PD-L1 og PD-L2, i behandling av pasienter med Avansert NSCLC1,2,3,4.
Foreløpig er pembrolizumab godkjent for behandling av PD-L1-uttrykke NSCLC i begge behandling-naive pasienter med en PD-L1 uttrykk TPS ≥50% og ingen epidermal vekstfaktor reseptor (EGFR) eller anaplastisk lymfom kinase (ALK) genomisk svulst avvik3 og for tidligere behandlet pasienter med en PD-L1 TPS ≥1%1.
PD-L1 protein uttrykk oppdaget av IHC har vært mye brukt som en prediktiv biomarkør analysen anti-PD-1/PD-L1 terapi. I pembrolizumab kliniske forsøk identifiserte PD-L1 TPS med formalin-fast parafin-embedded (FFPE) vevsprøver bruker PD-L1 IHC 22C 3 følgesvenn analysen5. Denne analysen har blitt godkjent av US Food and Drug Administration (FDA) og er CE-merket i Europa for fastsettelse av svulsten PD-L1 TPS5.
Globale tilleggsalternativer over institusjoner for pålitelig og høy kvalitet vurderinger av PD-L1 TPS med LDTs som bruker 22C 3 antistoff konsentrat er avgjørende for å støtte klinisk beslutninger om pasienten valgbarhet for pembrolizumab behandling. Et stort antall rutinelaboratorier har ikke tilgang til følgesvenn diagnostiske PD-L1 IHC 22C 3 analysen. Derfor er utviklingen av pålitelig og konsekvent LDTs kompatibel med ekstra, allment tilgjengelig IHC autostainer plattformer viktig.
Videre er det behov for å etablere LDTs cytologi utvalg som er den eneste prøven ofte tilgjengelig fra NSCLC pasienter. PD-L1 IHC 22C 3 følgesvenn analysen er godkjent for resections, kjernen nål biopsier og bronchoscopies hvis bronkoskopi gir 100 kreftceller. Selv om typene over eksempel hentes ofte, cytologi eksempler er lettere samlet og er den mest tilgjengelige utvalget i noen institusjoner6,7. Men er det ikke validert diagnostiske analysen tilgjengelig for vurdering av PD-L1 uttrykket i cytologi eksempler; pålitelig LDTs kompatibel med cytologi eksempler vil ytterligere lette høykvalitets PD-L1 testing.
Videre bør etablering klinisk valideringen av en LDT, IHC utføres når på en lignende måte til tilsvarende klinisk godkjent kommersielle test8. Flere kritiske trinn bør for eksempel kontrolleres for å få samme signal i seriell delene som antistoff titrering, forbehandling forsinkelser, inkubasjonstiden og forsterkning systemer9.
Vi har nylig utviklet en optimalisert LDT som bruker 22C 3 antistoff konsentrat evaluere PD-L1 uttrykket på svulst biopsier og cytologi eksempler10,11. Vi fant en høy overensstemmelse med den LDT versus “gullstandarden” PD-L1 IHC 22C 3 analysen10,11. Denne klinisk godkjent protokollen støtter pålitelig, høy kvalitet PD-L1 testing på tvers av områder globalt.
Protocol
Representative Results
Discussion
Vi har validert en optimalisert LDT bruker 22C 3 PD-L1 antistoff konsentrat, ved å sammenligne den med den tilsvarende klinisk godkjent kommersielle test10,11. 22C 3 konsentrert antistoff-baserte LDT viste et høyt for overensstemmelse mellom biopsi (~ 100%) og cytologi (~ 95%) prøver i forhold til PD-L1 IHC uttrykket bestemmes ved hjelp av PD-L1 IHC 22C 3 analysen på både ≥1% TPS og ≥50% TPS kuttet poeng. Nylig anbefalt av International Association for s…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Denne studien ble sponset av Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA. Fond spilte ingen rolle i studien design, innsamling og analyse, beslutningen om å publisere eller utarbeidelse av manuskriptet.
Materials
| NovaPrep HQ1 | Novacyt | NA | Preservative solution for cytology specimens |
| Novaprep® HQ+ B | Novacyt | NA | Mucolytic solution |
| Tissue-Tek VIP 6 | Sakura | 6042 VIP 6 | |
| Tissue-Tek TEC 5 Tissue Embedding Console System | Sakura | 5229 TEC 5 | |
| microscope glass slide SuperFrost Plus | Thermo Fisher Scientific | 4951PLUS4 | |
| DL-Dithiothreitol powder | Sigma-Aldrich | D3801 | |
| Heidolph Multi Reax Vortex Shaker | Thermo Fisher Scientific | 13-889-410 | |
| Shandon Cytoblock | Thermo Fisher Scientific | 7401150 | |
| 22C3 anti-PD-L1 concentrate antibody | Agilent Dako | #M365329 | |
| PD-L1 IHC 22C3 pharmDx | Agilent Dako | SK006 | |
| Autostainer Link 48 | Agilent Dako | AS480 | |
| BenchMark ULTRA autostainer | Ventana | #750-600 | |
| OptiView HQ Universal Linker | Ventana | #760-700 | |
| OptiView HRP Multimer | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Amplification H2O2 | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplifier | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplification Multimer | Ventana | #760-100 | |
| OptiView DAB | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Copper | Ventana | #760-700 | |
| Hematoxylin II | Ventana | #790-2208 | |
| Bluing Reagent | Ventana | #760-2037 | |
| Cell Conditioning 1 (CC1) | Ventana | #950-124 | |
| Tissue-Tek Film Coverslipper | Sakura | 4742 |
References
- Garon, E. B., et al. Pembrolizumab for the treatment of non-small-cell lung cancer. The New England Journal of Medicine. 372 (21), 2018-2028 (2015).
- Herbst, R. S., et al. Pembrolizumab versus docetaxel for previously treated, PD-L1-positive, advanced non-small-cell lung cancer (KEYNOTE-010): a randomised controlled trial. The Lancet. 387 (10027), 1540-1550 (2016).
- Reck, M., et al. Pembrolizumab versus Chemotherapy for PD-L1-Positive Non-Small-Cell Lung Cancer. The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1823-1833 (2016).
- Langer, C. J., et al. Carboplatin and pemetrexed with or without pembrolizumab for advanced, non-squamous non-small-cell lung cancer: a randomised, phase 2 cohort of the open-label KEYNOTE-021 study. The Lancet Oncology. 17 (11), 1497-1508 (2016).
- Buttner, R., et al. Programmed Death-Ligand 1 Immunohistochemistry Testing: A Review of Analytical Assays and Clinical Implementation in Non-Small-Cell Lung Cancer. Journal of Clinical Oncology. 35 (34), 3867-3876 (2017).
- Folch, E., Costa, D. B., Wright, J., VanderLaan, P. A. Lung cancer diagnosis and staging in the minimally invasive age with increasing demands for tissue analysis. Translational Lung Cancer Research. 4 (4), 392-403 (2015).
- Padmanabhan, V., et al. Improving Adequacy of Small Biopsy and Fine-Needle Aspiration Specimens for Molecular Testing by Next-Generation Sequencing in Patients With Lung Cancer: A Quality Improvement Study at Dartmouth-Hitchcock Medical Center. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 141 (3), 402-409 (2017).
- Tsao, M. S., et al. . IASLC ATLAS of PD-L1 Immunohistochemistry Testing in Lung Cancer. , (2017).
- Thunnissen, E., de Langen, A. J., Smit, E. F. PD-L1 IHC in NSCLC with a global and methodological perspective. Lung Cancer. , 102-105 (2017).
- Ilie, M., et al. Use of the 22C3 anti-PD-L1 antibody to determine PD-L1 expression in multiple automated immunohistochemistry platforms. PLoS One. 12 (8), e0183023 (2017).
- Ilie, M., et al. Use of the 22C3 anti-programmed death ligand 1 antibody to determine programmed death ligand 1 expression in cytology samples obtained from non-small cell lung cancer patients. Cancer Cytopathology. 126 (4), 264-274 (2018).
- Skov, B. G., Skov, T. Paired Comparison of PD-L1 Expression on Cytologic and Histologic Specimens From Malignancies in the Lung Assessed With PD-L1 IHC 28-8pharmDx and PD-L1 IHC 22C3pharmDx. Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology. 25 (7), 453-459 (2017).
- Russell-Goldman, E., Kravets, S., Dahlberg, S. E., Sholl, L. M., Vivero, M. Cytologic-histologic correlation of programmed death-ligand 1 immunohistochemistry in lung carcinomas. Cancer Cytopathology. 126 (4), 253-263 (2018).
- Heymann, J. J., et al. PD-L1 expression in non-small cell lung carcinoma: Comparison among cytology, small biopsy, and surgical resection specimens. Cancer Cytopathology. 125 (12), 896-907 (2017).
- Stoy, S. P., Rosen, L., Mueller, J., Murgu, S. Programmed death-ligand 1 testing of lung cancer cytology specimens obtained with bronchoscopy. Cancer Cytopathology. 126 (2), 122-128 (2018).
- Ilie, M., Hofman, P. Reproducibility of PD-L1 assessment in non-small cell lung cancer-know your limits but never stop trying to exceed them. Translational Lung Cancer Research. 6 (Suppl 1), S51-S54 (2017).
