Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

Rat Model van adhesieve Capsulitis van de schouder

Published: September 28, 2018 doi: 10.3791/58335
* These authors contributed equally

Summary

Dit protocol presenteert een in vivo rat model van adhesieve capsulitis. Het model bevat een interne fixatie van de gezamenlijke glenohumeraal met bevestiging van de extra-articulaire Sutuur (geologie) voor een langere tijd, wat resulteert in een verminderde roterende scala van motion (ROM) en verhoogde gezamenlijke stijfheid.

Abstract

Dit voorstel beoogt te creëren van een in vivo rat model van adhesieve capsulitis voor het onderzoeken van de behandelingsmogelijkheden voor deze aandoening en andere etiologie van vergelijkbare arthrofibrosis. Het model bevat extra-articulaire fixatie van de schouder in ratten via schapulier aan humerus wordt, wat resulteert in een secundaire contractuur zonder invasie van de intra-articulaire ruimte en resulteert in verminderde roterende ROM en verhoogde gezamenlijke stijfheid.

We gebruikten 10 Sprague-Dawley ratten met het oog op deze studie. ROM basislijnmetingen werden genomen voordat glenohumeraal immobilisatie. De ratten werden onderworpen aan 8 weken voor immobilisatie voordat de fixatie hechtingen waren verwijderd en veranderingen in ROM en gezamenlijke stijfheid werden geëvalueerd. Om te beoordelen of immobilisatie in een significante afname van de ROM resulteerde, werden veranderingen in de kinematica berekend. ROM werd gemeten op elk punt van de tijd in de follow-up periode en werd vergeleken met de basislijnmetingen van de ROM van interne en externe. Teneinde de stijfheid, gezamenlijke kinetiek werden berekend door het bepalen van de verschillen in koppel (text enint van de t) die nodig zijn voor het bereiken van de eerste externe omwenteling van 60 ° en de eerste interne rotatie van 80 °.

Na de verwijdering van de extra-articulaire hechtdraad fixatie op terugkomdag 0 vonden we een afname van 63% van de totale ROM t.o.v. baseline. We waargenomen continue verbetering tot week 5 van follow-up, met de vooruitgang vertraagt rond een 19% beperking. Week 8 van follow-up, was er nog sprake van een beperking van de 18% van de ROM. bovendien op terugkomdag 0, vonden we het koppel steeg met 13,3 Nmm in vergelijking met de basislijn. Op week 8, werd het totale koppel gemeten te 1.4 ± 0,2 Nmm hoger dan eerste metingen. Dit werk introduceert een rat-model van de adhesieve capsulitis schouder met blijvend verlaagde ROM en verhoogde stijfheid.

Introduction

Adhesieve capsulitis van de schouder is vaak bevroren schouder of schouder contractuur genoemd. Het wordt gekenmerkt door beperkte glenohumeraal beweging en pijn, vermoedelijk als gevolg van geavanceerde fibrose en gezamenlijke contractuur1,2,3. De voorwaarde houdt fibroblast en myofibroblast cel werving met een matrix van de resulterende dichte collageen (type I en III) in de gezamenlijke capsule2,3. Er zijn vele mogelijke risicofactoren voor het ontwikkelen van een gezamenlijke contractuur, met inbegrip van geslacht, diabetes mellitus, hyperthyreoïdie, traumatisch letsel en langdurige immobilisatie4,5,6.

Effectieve behandelingsopties ontbreken en meestal omvatten fysiotherapie, met interventie in de vorm van chirurgische release in extreme gevallen die niet met conservatieve zorg hebben verbeterd. De beste behandelingsmethode blijft onbepaald en al jarenlang een onderwerp van groot belang in de medische sector7,8. Ontwikkeling van nieuwe therapeutische opties vergt een reproduceerbare diermodel voor de voorwaarde dat niet afhankelijk is van de intra-articulaire geïnduceerde trauma. De optimale adhesieve capsulitis model moeten de twee belangrijkste kenmerken van de ziekte: Contractuur van de capsule van de schouder en een langdurige vermindering van bereik van de beweging (ROM). Schollmeier et al. 9 beschreven een van de eerste gezamenlijke contractuur modellen met behulp van een cast om schouder contractuur in hoektanden. Zij rapporteerde ook dat wijzigingen in ROM en intra-articulaire druk keerde terug naar normale niveaus na beëindiging van de immobilisatie9. Een belangrijke beperking vermeld in de studie is echter de variatie in ledematen positie tussen dieren vanwege het gebruik van een gegoten-techniek. Met het oog op een meer reproduceerbare model, Kanno et al. 10 presenteerde later een adhesieve capsulitis rat model met behulp van stijve interne fixatie van de schouder. Echter, hoewel ze een significante afname van de ROM met hun model bereikt, deed ze niet staat of deze wijzigingen tijdelijk of langdurig zijn. Het doel van onze studie was een geschikt in-vivo schouder contractuur rat om model te maken door het onderzoeken van het effect van langdurige extra-articulaire glenohumeraal gezamenlijke immobilisatie op ROM en gezamenlijke stijfheid.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

De studie werd goedgekeurd door het institutionele Animal Care en gebruik Comité bij Beth Israël diaken Medical Center. Zorg werd genomen om te voorkomen dat niet onnodig langdurige narcose en ook om te voorkomen hypothermie. Dieren werden gewogen bij elke sessie ROM meting en gecontroleerd voor gewichtsverlies.

1. studie onderwerpen

  1. Gebruik 10 Sprague-Dawley ratten die 13 oud zijn ten tijde van de operatie en dat bereik tussen 250-300 g lichaamsgewicht weken.

2. de chirurgische Procedure

  1. Onder verdoving en vóór de chirurgische immobilisatie, meten de basislijn koppel als functie van de rotatiehoek tussen externe rotatie van 60° en 80° van interne rotatie (zie stap 5).
  2. Induceren van anesthesie met 5% Isofluraan inademing in de zaal van een inductie, en vervolgens met 2% Isofluraan via een neus kegel gedurende de operatie ondersteunen.
    1. Gebruik een watergedragen verwarmingselement onder het dier te handhaven lichaamstemperatuur tijdens anesthesie.
    2. Beheren met het oog op pijnbestrijding, aanhoudende-release buprenorfine subcutaan bij een dosis van 1,2 mg/kg afhankelijk van het lichaamsgewicht van de rat.
  3. Immobilize de linker glenohumeraal gewrichten onder een hoek van 60 ° van ontvoering (de hoek tussen de humerus schacht en de scapular stekel)10 , 11.
    1. Begin de chirurgische ingreep met een longitudinale posterior incisie, parallel aan de humerus schacht. De huid incisie net onder de glenohumeraal gezamenlijke maken en uit te breiden voor ongeveer 3 cm.
    2. 2 hechtingen (gevlochten polyester) gebruiken om te immobiliseren het glenohumeraal gewricht, door de piercing door de laterale rand van het schouderblad en rond de distale tweederde van de humerus schacht en vervolgens draai zoals geïllustreerd in figuur 1A. Neem extra inspanning om te voorkomen dat kritieke structuren zoals de brachialis slagader vernauwen.
      Opmerking: De chirurgische techniek heeft een voordeel kunnen beperken het glenohumeraal gewricht op 60° van ontvoering (Z) zonder andere plannen (X & Y). Door het plaatsen van hechtingen rond het opperarmbeen en door de laterale rand van het schouderblad, is een onderlinge aanpassing van de twee structuren bereikt en gehandhaafd op het Scapulier blade-vliegtuig. Na de aanscherping van de hechtingen, wordt de arm vastgesteld op de rustende plaats bij het overwegen van X & Y vliegtuigen en op 60° van ontvoering wanneer Z vliegtuig wordt beschouwd als. Dit wordt beschouwd als het beperken van de variabiliteit tussen de dieren die mogelijk worden gegenereerd uit gebrek aan fijn afstemmen van het gemeenschappelijk standpunt in de drie plannen.

3. het sluiten van de incisie

  1. Na goede hemostase, sluit de huid incisie huid clips gebruiken.
  2. Staken van de narcose en laat het dier terug te vorderen onder toezicht in een warme omgeving. Nadat het dier voldoende bewustzijn herwint te handhaven sternale lighouding, keren terug naar haar kooi.
  3. Onmiddellijk na de ingreep, toestaan dat de dieren terug te keren naar normale activiteit. Toestaan dat de dieren te verplaatsen zonder beperking, voornamelijk afhankelijk van interne hechtingen te repareren het glenohumeraal gewricht.
  4. Als u wilt controleren voor mogelijke besmetting, Inspecteer de insnijding sites dagelijks tijdens de eerste post-operatieve week.
  5. Wond clips op de 10e dag na de operatie te verwijderen.
    Opmerking: Er was geen manipulatie van spieren tijdens de procedure, en de techniek geen eventuele intra-articulaire trauma, dus behoud van kapselvorming en articulaire continuïteit en anatomische integriteit. Geen externe beperking noch activiteit beperking werd gevolgd in ons protocol.
  6. Bieden met behulp van aanhoudende-release buprenorfine, analgesie subcutaan geïnjecteerd in een dosis van 1,2 mg/kg basisgewicht van inductie van de anesthesie en elke 72 h herhaald indien nodig.

4. hechtdraad verwijdering 8 weken na immobilisatie

  1. Induceren van anesthesie met 5% Isofluraan inademing in een inductie-zaal, dan opgelopen met 2% Isofluraan via een neus kegel gedurende de operatie. Beheren met het oog op pijnbestrijding, aanhoudende-release buprenorfine subcutaan bij een dosis van 1,2 mg/kg afhankelijk van het lichaamsgewicht van de rat.
  2. Het maken van een sneetje op de top van het litteken uit de voorgaande procedure.
  3. Snijd de hechtingen en van de bovenarm en het schouderblad verwijderen.
  4. Sluit de incisie met wond clips.
  5. Onderzoeken de insnijding site dagelijks tijdens de eerste week naar eventuele tekenen van infectie. Monitor ongerief en pijn zo goed.
  6. Wond clips op de 10e dag na de operatie te verwijderen.

5. bereik van beweging en gezamenlijke stijfheid metingen

  1. De mechanica van de ROM en passieve schouder meten vóór en na immobilisatie met behulp van een aangepaste apparaat bestaande uit een arm klem, een vergadering van de sensor en een draaiende as11. Dit pre-operatively wordt uitgevoerd (basislijn) en voortdurend na verwijdering van de hechtdraad.
    1. Maatregel ROM onmiddellijk na verwijdering van de hechtdraad (terugkomdag 0), en vervolgens twee keer per week.
    2. Metingen eenmaal per week, op minder dan 10% opname wijzigen vanaf het vorige punt van de tijd verminderen.
      Opmerking: Na het testen ROM voor weken, de ROM van elk dier veranderde niet drastisch tussen tijdstippen testen (minder dan 10% wijzigen). De ROM leek te plateau op dit punt, dus vonden we dat het verminderen van de frequentie van de testen van twee keer per week tot eenmaal per week was voldoende.
  2. Metingen onder verdoving met behulp van Isofluraan via precisie vaporisator op 5% voor de inductie en 2% voor onderhoud voor de volledige lengte van de procedure (ongeveer 5 minuten), ter vergemakkelijking van de metingen efficiënt verrichten. Gebruik een watergedragen verwarmingselement onder het dier te handhaven lichaamstemperatuur tijdens anesthesie.
  3. Plaats het dier goed voor ROM meting met behulp van een laser-gids. Positie de voorpoot op de arm klem in voorwaartse flexie van 90°, met de sensing as uitgelijnd met de lengteas van de bovenarm. Beveilig de voorpoot door de pols en de elleboog zoals geïllustreerd in figuur 1B.
  4. Passieve voorpoot rotatie controle door een stappenmotor ROM en koppel op een consistente wijze beoordelen. Controle de stappenmotoren met een microcontroller. De ingangen van het gebruik van de inclinometer, in combinatie met die van een koppel sensor om aan te geven het begin en einde van de metingen.
  5. De microcontroller verbinden met een computer en controle met behulp van een in-house ontwikkelde MATLAB-code.
  6. Voor de basislijnmetingen cyclus de sensor vergadering alleen, 3 keer tussen externe rotatie van 60° en 80° van interne rotatie te verkrijgen van de eerste koppel metingen (externe: text en interne: tint) voor later vergelijking.
  7. Voor ROM metingen, gebruik de koppelwaarden van elk dier op hun eigen basislijnmetingen (text en tint) als vooraf ingestelde invoervariabelen in het programma om wijzigingen te herkennen in rotatie ROM. gebruiken de basislijnmetingen als een vergelijkende stoppen punt voor latere ROM metingen. Veranderingen werden waargenomen met een resolutie van 0,2 °.
  8. Voor stijfheid metingen, gebruik de originele rotatiehoeken van externe omwenteling van 60° en 80° interne rotatie als vooraf ingestelde input in het programma om de opsporing van wijzigingen in koppel. Veranderingen werden waargenomen met een resolutie van 0,01 Nmm.
  9. Weeg dieren op dezelfde dag als elke ROM beoordeling. Plaats van de dieren op schalen en opnemen van hun massa's. Deze gegevens werden gebruikt als een van de instrumenten om te beoordelen van de diergezondheidsstatus tijdens de studie.
  10. Na herstel, ratten terug te keren naar hun kooien en controleren op tekenen van pijn of leed. Tijdens deze testen, niet geen enkel dier zonder toezicht totdat het voldoende bewustzijn te handhaven sternale lighouding heeft herwonnen.
    Opmerking: ROM en koppel metingen werden bereikt met een aangepaste apparaat, eerder gerapporteerd door onze fractie {Villa-Camacho 2015}. Het apparaat is een op maat gemaakte mal die bestaat uit een schacht gedraaid door Stappenmotor en gecontroleerd door een aangepaste MATLAB-script. Een koppel sensor en inertial maateenheid worden vastleggen van koppel en de positie van gegevens tijdens de articulatie van het specimen gebruikt.

6. post-mortem Immunohistologic analyse

  1. Aan het einde van de periode van 8 weken durende ROM meting, euthanaseren ratten met CO2 blootstelling.
  2. Ontleden van beide links (geïmmobiliseerd) en (gezonde control) schouders recht door disarticulating de bovenarm van de ellepijp, en door het segmenteren van het schouderblad van het sleutelbeen en de borstholte.
  3. Corrigeer de verwijderde schouders in een oplossing van 10% neutraal gebufferde formaline voor 3 dagen, gevolgd door botontkalking in een oplossing van 10% van de azijnzuuroplossing (NA2EDTA) van de ethyleendiamminetetra met een pH van 7,4 voor nog 2 maanden.
  4. Tijdens dit proces, Leg monsters op een shaker in de cyclus van een zachte agitatie en bewaren bij 4 ° C. Ontkalking van de gezamenlijke met wekelijks microcomputed tomografie (uCT) scans glenohumeraal controleren.
    Opmerking: EDTA is een chelaatvormer die bindt calciumionen van het apatiet kristallen buitenoppervlak, geleidelijk verminderen van de kristal grootte12,13,14. Dit proces is zeer traag en zacht en wordt gebruikt voor het detecteren van specifieke weefsel elementen dat moeten worden behouden voor technieken zoals immunohistochemie (IHC). Het tarief waartegen de EDTA decalcifies het model is afhankelijk van de pH en de concentratie van de oplossing. In termen van pH, kan het variëren van 7 tot 7.4, met meer basische oplossingen versnellen de ontkalking snelheid. Oplossingen met hogere pH niveaus kunnen echter belangrijke weefsel elementen beschadigen. Bovendien, de gebruikelijke EDTA concentratie voor dergelijke experimenten ligt tussen de 10% tot 14%, maar het is zeer belangrijk om te onthouden dat het actieve agens wordt uitgeput zodra het overheidsobligaties voor calcium, dus dit moet worden vervangen van de ontkalking vloeistof ten minste 3 tot 4 keer per week15.
  5. Zodra het proces van botontkalking was gesloten, mount de glenohumeraal gewrichten in paraffine stapels voor histologisch segmenteren. Oriënteren de monsters te voorzien van coronale segmenten. Segmenten verkregen op 50% diepte van de humeruskop (in het centrum, Midden-coronally) zijn afgebeeld in Figuur 1. Uitvoeren van immunohistochemische kleuring met behulp van de methode peroxidase-anti-peroxidase ter aanduiding van de aanwezigheid van fibrotische weefsel in het gewricht. 4 , 9 , 10 , 16
  6. Uitvoeren van antigeen ophalen door magnetron bestraling door het inlaten van dia's in een plastic pot Coplin in een bufferoplossing Natriumcitraat (10 mM Natriumcitraat 0,05% Tween 20, pH 6.0, voorverwarmd gedurende 5 minuten bij 95-100 ° C) en het plaatsen in een regelmatige magnetron voor 10 minuten op de kracht van het medium. Laat dia's afkoelen gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur.
  7. Voer blokkeren met geit serum voor 30 min en Incubeer de specimens met een primaire muisknop mono-klonen antilichaam (1:400 verdunning) aan fibronectine 's nachts bij 4 ° C.
  8. Na incubatie met het primaire antilichaam, wassen specimens tweemaal met PBS (0,5 mg/mL) gedurende 10 minuten; en incubeer met een secundair antilichaam, geit antimouse IgG-peroxidase geconjugeerde (1:400 verdunning) gedurende 30 minuten.
  9. Wassen van de specimens tweemaal met PBS (2,5 µg/mL) op een shaker voor 10 minuten en bloot aan 3,30-diaminobenzidine tetrahydro-chloride en 30% waterstofperoxide in het donker voor 10 min. Counterstain met Carazzi Haematoxyline.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Bereik van de beweging

Op de terugkomdag 0, vonden we een afname van 63% van de totale ROM t.o.v. baseline (P <.001 hoeveel We een geleidelijke verbetering van de ROM tot week 5 van follow-up, waargenomen wanneer progressie bij 19% beperking gestopt (P < 0,001). De overige beperking, 18% van de totale ROM, bleek nog op 8 weken follow-up (P < 0,001).

Stijfheid

Op de terugkomdag 0, vonden we een stijging van 13,3 Nmm toename van het totale koppel vergeleken met basislijn (P < 0.001); 8,9 Nmm extern (P =.002) en 4.4 Nmm intern (P < 0.001), resulterend in een stijging van 138.8 procent van de externe omwenteling koppel, 159,6% stijging van de interne rotatie koppel en een totaal van 149.2% toegenomen koppel over het geheel genomen. Op de week 8 van follow-up, vonden we het totale gemeten koppel op 1.4 ± 0,2 Nmm hoger is dan volgens de basislijn (P = 0.115), met een verhoging van het Nmm 0,6 ± 0,1 van externe koppel (P = 0.369) en 0.7 ± 0,2 Nmm toename van interne koppel (P = 0,036). Dit geeft aan koppel stijgt 10% extern en 25,7% intern, voor een totale verhoging van 17,9%. Aan het begin van post-operatieve week 3 plateaued de verbetering van de stijfheid.

Histologische resultaten

Zoals te zien in figuur 2A, weergegeven de intact groep goede scheiding tussen de capsule en het gewrichtsoppervlak van de femurkop en normale cellulaire organisatie. Normale cellulaire organisatie werd bovendien ook waargenomen in het synoviale weefsel en de articulaire kraakbeen. Echter het operatief geïmmobiliseerdet groep getuigt van kapselvorming verklevingen in het inferieur aspect van de glenohumeraal gezamenlijke. Bovendien lijkt het omringende weefsel dichtere in vergelijking met de intacte schouders, wat leidt tot een strakkere capsule met een verminderde gewrichtsruimte (figuur 2B). Een verhoogde kapselvorming dikte toont segmenten gekleurd voor fibronectine in de gecontracteerde chirurgische groep (figuur 2B). in vergelijking met gezonde controles (figuur 2A). Deze bevindingen zijn in overeenstemming met eerder gerapporteerde literatuur over dierlijke modellen van gezamenlijke immobilisatie10 en voorstander van een goede contractuur model.

Figure 1
Figuur 1: testapparatuur. (A) immobilisatie van de glenohumeraal gezamenlijke met 2 gevlochten polyester hechtingen, stevig doorgegeven tussen de laterale rand van schapulier en de bovenarm; (B) aangepast apparaat voor meting van de ROM en passieve schouder mechanica; a) een stepper monitor. Een sensor vergadering bestaande uit b) een reactie koppel sensor, en c) een oriëntatie-sensor. d) een arm klem. (C) interne of (D) externe omwenteling van de glenohumeraal gezamenlijke11. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 2
Figuur 2: coronale segmenten van de humeruskop. Afbeelding gekleurd voor fibronectine (IHC) verkregen bij 40 X vergroting. Schaal bar = 200 µm. (A) gezond beheer. (B) chirurgische controle. Rode pijlen schetsen gezamenlijke kapselvorming dikte. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 3
Figuur 3: bereik van de beweging ten opzichte van de genormaliseerde koppel voor beide gewrichten gezond en operatief beperkt rat glenohumeraal. Interne rotatie wordt aangeduid als positieve, externe rotatie negatief is. Het gearceerde gebied geeft het 95% betrouwbaarheidsinterval (CI). Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Deze studie geeft een rat model van adhesieve capsulitis van de schouder door inwendige fixatie van het glenohumeraal gewricht. Bovendien blijkt het een uitgebreide vermindering van de totale ROM gedurende ten minste 8 weken na verwijdering van de fixatie. Oog op de berekening van de wijzigingen in de ROM op verschillende tijdstippen, werden metingen vergeleken met dierlijke specifieke basislijnen. Omgekeerd, Kanno et al. 10 een gestandaardiseerde koppel voor alle dieren gebruikt om te bepalen van ex vivo ROM veranderingen.

In 2008, Sarver et al. 17 gemeld op gezamenlijke stijfheid van de schouder als gevolg van niet-chirurgische externe fixatie. Hun studie toonde een voorbijgaande verhoging in gezamenlijke stijfheid na immobilisatie van gewonden en behandeling van schouders, dat werd opgelost door de week 8 van follow-up. Echter in de huidige studie vinden we niet van een lineaire relatie tussen koppel en hoek, eerder een veelterm passen (Figuur 3). Bovendien, alleen vonden we een statistisch significant verschil in gezamenlijke stijfheid t.o.v. baseline tijdens de beoordeling van interne rotatie, waar een toename van de stijfheid met 25,7% bleef na 8 weken van immobilisatie.

We gebruikten basislijnmetingen ROM en stijfheid voor elk dier als hun eigen interne controle. Gezien de mogelijke variatie tussen de dieren18, met behulp van de contralaterale schouder van hetzelfde dier als interne controle verhoogt interne validiteit en vermindert het aantal dieren nodig.

Een van de beperkingen van onze studie is dat de apparatuur die wordt gebruikt voor het meten van de ROM niet van het schouderblad stabiliseren. Een rat schouderblad is echter meer schuin georiënteerd met nog meer naar boven gedraaid dan bij de mens. Met de ratten in liggende positie moet theoretisch beheren voor het Scapulier kantelen zoals het schouderblad tegen de stevige plaat van de testen mal ligt. Een verdere beperking van de studie is dat we alleen interne-rotatie en externe-rotatie van de gezamenlijke glenohumeraal beoordelen. Dit is deels te wijten aan het feit dat ontvoering, flexie en overhead activiteiten vereisen grondig externe fixatie of beperking van de scapulothoracic gezamenlijke tijdens de ROM test, waarvoor een ander systeem dan de onze.

De pathogenese en behandeling van adhesieve capsulitis blijft onvoldoende worden begrepen. Ongeacht de etiologie, heeft het aangetoond dat het de Contractuur van de capsule die veroorzaakt pijn en beperkt glenohumeraal verkeer1,3,11. Bovendien, er is gesuggereerd dat er inflammatoire triggers die leiden gezamenlijke fibrose zijn tot, waardoor contractuur10. Hoewel ons model rat kan niet de eerste inflammatoire belediging van een primaire contractuur imiteren, toch repliceert voldoende de karakteristieke kinetiek van adhesieve capsulitis en haar pathologische veranderingen10,19. Dit model roept een blijvende afname van de ROM en verhoogde gezamenlijke stijfheid, waardoor voor een uitgebreide beoordeling van huidige en potentiële therapeutische behandelingen voor schouder contractuur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Geen

Acknowledgments

De auteurs wil erkennen van Mr. en Mrs. Tom en Phyllis Froeschle voor het verstrekken van financiële steun voor dit project.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sprague-Dawley rats Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA 250-300 g
Surgical tool:
Injection needle BD 1' 30 guage
Needle holder
5% isoflurane
2% isoflurane
Nose cone
Skalpel and skalpel holder No. 11 scalpel
Curved hemostat forceps
Staright hemostat forceps
Tissue retractor
Toothed tissue forceps
Plain tissue forceps
Dissecting scissors
Suture scissors
Skin clip applicator Any standard staples for wound closure
Immobilization material Ethicon No. 2-0 braided polyester ethibond suture was used for immobilization
Other materials:
Costumized device for ROM: 1)Sensor assembly, 2)pivoting axle, 3)arm clamp Assembly that is described in relaxin paper and adhesive capsulitis paper
Orientation sensor (part of sensor assembly) MicroStrain Inc., Williston, VT, USA 3DM-GX3-15
Reaction torque sensor (part of sensor assembly) Futek Inc., Irvine, CA, USA TFF400
Stepper Motor SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 https://www.sparkfun.com/products/13656
Microcontroller Torino, Italy). Arduino UNO, R3
MATLAB code MATLAB 7.13.0.564, Natick, Ma, USA
Weight Scale Ohaus

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bunker, T. D. Time for a new name for 'frozen shoulder'. British medical journal. 290 (6477), 1233-1234 (1985).
  2. Bunker, T. D., Anthony, P. P. The pathology of frozen shoulder. A Dupuytren-like disease. The Journal of bone and joint surgery. British volume. 77 (5), 677-683 (1995).
  3. Kilian, O., et al. The frozen shoulder. Arthroscopy, histological findings and transmission electron microscopy imaging. Chirurg. 72 (11), 1303-1308 (2001).
  4. Wang, K., et al. Risk factors in idiopathic adhesive capsulitis: a case control study. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 22 (7), e24-e29 (2013).
  5. Milgrom, C., et al. Risk factors for idiopathic frozen shoulder. The Israel Medical Association Journal. 10 (5), 361-364 (2008).
  6. Huang, S. W., et al. Hyperthyroidism is a risk factor for developing adhesive capsulitis of the shoulder: a nationwide longitudinal population-based study. Scientific Reports. 4, 4183 (2014).
  7. Struyf, F., Meeus, M. Current evidence on physical therapy in patients with adhesive capsulitis: what are we missing. Clinical Rheumatology. 33 (5), 593-600 (2014).
  8. Song, A., Higgins, L. D., Newman, J., Jain, N. B. Glenohumeral corticosteroid injections in adhesive capsulitis: a systematic search and review. Journal Of Physical Medicine And Rehabilitation. 6 (12), 1143-1156 (2014).
  9. Schollmeier, G., Sarkar, K., Fukuhara, K., Uhthoff, H. K. Structural and functional changes in the canine shoulder after cessation of immobilization. Clinical Orthopaedics and Related Research. 323 (323), 310-315 (1996).
  10. Kanno, A., Sano, H., Itoi, E. Development of a shoulder contracture model in rats. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 19 (5), 700-708 (2010).
  11. Villa-Camacho, J. C., et al. In vivo kinetic evaluation of an adhesive capsulitis model in rats. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 24 (11), 1809-1816 (2015).
  12. Liu, H., et al. Evaluation of Decalcification Techniques for Rat Femurs Using HE and Immunohistochemical Staining. BioMed Research International. 2017, 9050754 (2017).
  13. Gonzalez-Chavez, S. A., Pacheco-Tena, C., Macias-Vazquez, C. E., Luevano-Flores, E. Assessment of different decalcifying protocols on Osteopontin and Osteocalcin immunostaining in whole bone specimens of arthritis rat model by confocal immunofluorescence. International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 6 (10), 1972-1983 (2013).
  14. Sanjai, K., et al. Evaluation and comparison of decalcification agents on the human teeth. Journal of Oral and Maxillofacial Pathology. 16 (2), 222-227 (2012).
  15. Rolls, G. An Introduction to Decalcification. , (2013).
  16. Burry, R. W. Controls for immunocytochemistry: an update. Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 59 (1), 6-12 (2011).
  17. Sarver, J. J., et al. After rotator cuff repair, stiffness--but not the loss in range of motion--increased transiently for immobilized shoulders in a rat model. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 17 (1 Suppl), 108S-113S (2008).
  18. Macbride, M. Variations within Outbred Strains: Know Your Strains and Stocks | Taconic Biosciences. , Available from: https://www.taconic.com/taconic-insights/quality/variations-within-outbred-strains-know-your-strains-and-stocks.html (2016).
  19. Liu, Y. L., Ao, Y. F., Cui, G. Q., Zhu, J. X. Changes of histology and capsular collagen in a rat shoulder immobilization model. Chinese Medical Journal. 124 (23), 3939-3944 (2011).

Tags

Bioengineering kwestie 139 adhesieve capsulitis bevroren schouder schouder contractuur Rat studie bereik van de beweging stijfheid
Rat Model van adhesieve Capsulitis van de schouder
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Okajima, S. M., Cubria, M. B.,More

Okajima, S. M., Cubria, M. B., Mortensen, S. J., Villa-Camacho, J. C., Hanna, P., Lechtig, A., Perez-Viloria, M., Williamson, P., Grinstaff, M. W., Rodriguez, E. K., Nazarian, A. Rat Model of Adhesive Capsulitis of the Shoulder. J. Vis. Exp. (139), e58335, doi:10.3791/58335 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter