Low-Cost-Protokoll der Footprint Analysen und hängen-Box-Test für Mäuse angewendet die chronische Zurückhaltung Stress
Summary
Das kostengünstige Protokoll bestehend aus Footprint Analysen und hängen-Box-Test nach Zurückhaltung Stress nützlich ist für die Bewertung der Bewegungsstörungen des Mausmodells.
Abstract
Gangstörung ist häufig bei Patienten mit Bewegungsstörungen zu beobachten. In Mausmodellen für Bewegungsstörungen verwendet ist Ganganalyse wichtiger Verhaltens Test um festzustellen, ob die Mäuse die Symptome des Patienten zu imitieren. Motorische Defizite werden oft durch Stress induziert, wenn keine spontane motor Phänotyp in den Mausmodellen beobachtet wird. Ganganalyse, gefolgt von Stress laden wäre daher eine sensitive Methode zur Bewertung des motorischen Phänotyps in Mausmodellen. Allerdings haben Forscher das Erfordernis einer teuren Apparatur quantitative Ergebnisse automatisch Ganganalyse einzuholen. Für Stress ist Stress laden durch einfache Methoden ohne teure Apparate für elektrischen Schlag erforderte und zwang ausgeführt wünschenswert. Daher stellen wir eine einfache und kostengünstige Protokoll bestehend aus Footprint Analysen mit Papier und Tinte, hängend-Box-Test zur Beurteilung der motorischen Funktion, und Stress-Belastung durch Zurückhaltung mit einem konischen Rohr definiert. Die motorischen Defizite von Mäusen wurden erfolgreich durch dieses Protokoll erkannt.
Introduction
Bewegungsstörungen werden als Störungen des Nervensystems zeigen ein Überschuss oder Mangel an freiwilligen oder automatische Bewegungen1definiert. Gangstörung ist besonders häufig bei Patienten mit Bewegung Störungen2,3,4dokumentiert. Ganganalyse deshalb einen geeigneten Verhaltens Test für die Validierung von Tiermodellen von Bewegungsstörungen. Bei Mäusen wurden automatisierte Gangart Analysen durchgeführt zum Wandern bei natürlichen Geschwindigkeit5 und einstellbare Geschwindigkeiten Laufband6,7. Diese Analysen liefern quantitative Ergebnisse des Gehens automatisch. Eine alternative Methode zur Erkennung von Gangstörungen nennt Footprint Analysen. Nach Kennzeichnung der Unterseite der Füße mit Tinte, Mäuse Fuß auf dem Papier, und die Spuren ausgewertet. Zunächst, Vaseline und pulverisierter Kohle wurden verwendet, um den Fußabdruck8visualisieren, und wurden dann durch Tinte auf Polygraph Papier9 und fotografische Entwickler auf Fotopapier10ersetzt. Eine billigere und weniger toxische Methode mit Tinte und Papier als die anderen Methoden bleibt bislang11. Footprint Analysen ist weniger teuer im Vergleich mit automatisierten Analyse5,6,7 und wäre sinnvoll, die Bewegungsstörungen in Mausmodellen für die Forscher ohne reichlich Forschungsgelder bewerten .
Das hà ¤ ngen-Box-Test ist eine Art von vier Gliedmaßen hängen Tests mit Draht Käfig Deckel12 und Maschendraht Bildschirm13. Die Box ist eine Vorrichtung mit drehbaren Mesh Deckel auf der Oberseite Box entlang einen Mittelsteg. Neben Ganganalyse kann der Test kostengünstig und einfach durchgeführt werden. Daher führten wir das hà ¤ ngen-Box-Test, Griffstärke und Balance, zusätzlich zu den Footprint Analysen in diesem Protokoll zu bewerten.
Stress induziert die Symptome der Bewegung Störungen14,15. Motorische Defizite werden oft von mehreren chronischen Spannungen induziert, auch wenn keine spontane motor Phänotyp in Mausmodellen eine Bewegung Störung16,17,18beobachtet wird. Zurückhaltung ist eine der häufigsten verwendeten Methoden für Stress bei Mäusen, laden, weil das Tier nicht körperlich geschädigten19 und Kosten ist weniger im Vergleich mit anderen Methoden wie Stromschläge mit eigenen Apparat und gezwungen, mit Einsatz von einem Laufband laufen. Zurückhaltung mit einer Röhre, die durchgeführt wird, durch die Beschränkung einer Maus in eine gelochte 50 mL konische Rohr ist einfacher als andere Methoden wie z. B. Draht Sieb, getapten Bein und Verhüllung des Tieres mit Gaze (bewertete20 Mesh). In diesem Artikel fassen wir die Protokolle des Footprint Analysen und die hängenden Box testen nach Zurückhaltung durch ein Rohr. Dieses Protokoll würde helfen, Maus-Modellen von Bewegungsstörungen ohne spontane motor Phänotyp zu verwenden.
Protocol
Representative Results
Discussion
Der Footprint Analysen und die hängenden Box testen sind einfache und kostengünstige Verhaltens Tests für die Motorik von Mäusen. Die Neurobehavioral Phänotypen in verschiedenen Mausmodellen wurden erfolgreich durch diese Tests nachgewiesen. Z. B. verkürzte Schrittlänge Amyotrophe Lateralsklerose24, Zunahme der Länge asymmetrische Schrittlänge in Ataxie-Teleangiektasie25, Zunahme der Länge der Überlappung in Huntington-Krankheit26 und Dyst…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde unterstützt von JSPS (Japan Society for Promotion of Science) KAKENHI (Beihilfe für wissenschaftliche Forschung C), Nummer 18K 07373 (HS) und Subventionen für Private Universitäten zu gewähren.
Materials
| Hanging box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/ | |
| Marking pen | ZEBRA | MO-120-MC-BK | |
| Goal box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/ | Accessory for apparatus of balanced beam test |
| Boxes | O’hara & Co. | – | Side wall of runway |
| Black ink | Shin-asahi | – | |
| Red ink | Maruyamakogyo | BC-6 | |
| Disposable Petri Dish | Corning | 351008 | Petri dishe (35 mm in diameter) |
| Askul Multipaper Super White J Monochrome A3 | Askul | 701-712 | White paper (29.7 cm x 42 cm x 0.09mm) |
| 50 mL Conical tube | Corning | 430829 | |
| Square drill | KAKURI Corporation | DIY FACTORY (K32-0313) |
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