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Behavior

・ フット プリント分析とマウスのテスト ボックスをぶら下げの低コスト プロトコル適用慢性拘束応力

Published: January 23, 2019
doi:
10.3791/59027
,
1Division of Biology, Center for Molecular Medicine,Jichi Medical University

Summary

・ フット プリント分析から成ると拘束ストレスがマウス モデルの運動障害の評価に有用テスト ボックスをぶら下げの低コストのプロトコル。

Abstract

歩行障害は運動障害の患者によく見られます。運動障害のため使用するマウス モデル、歩行分析はマウスが患者の症状を模倣するかどうかを判断する重要な行動テスト。運動障害は多くの場合ストレスによって誘導されるマウス モデルにおける自発運動表現型を認められなかったとき。したがって、ストレス負荷による歩行分析はマウスモデルのモーターの表現型を評価するため機密性の高いメソッドになります。しかし、研究者は歩行分析から自動的に量的な結果を取得する高価な装置の要件に直面します。ストレスは、高価な器具電気ショックを必要し、実行を強制することがなく簡単な方法で読み込みストレスが望ましいです。したがって、運動機能を評価するテストをボックスをぶら下げ、紙と墨、フット プリント解析から成るシンプルかつ低コストのプロトコルを紹介、応力が円錐管と拘束によって定義されます。マウスの運動障害は、このプロトコルが正常に検出されました。

Introduction

運動障害は、過剰または自発的または自動の動き1の少なさを示す中枢神経系の障害として定義されます。特に、歩行障害頻繁運動障害2,3,4と患者の間で記載されています。したがって、歩行解析は運動障害の動物モデルの検証のための適切な行動のテストです。マウスで、トレッドミル6,7自然なスピード5と調整可能な速度での歩行の自動歩行行った。これらの解析では、歩行の定量的な結果を自動的に提供します。歩行障害を検出するための代替メソッドは、フット プリント分析と呼ばれます。インクと足の底をラベリングした後マウスを紙の上歩くし、足跡を分析します。当初は、ワセリンと粉末炭8フット プリントを視覚化するために使用され、ポリグラフ紙9インクと現像印画紙10によって取り替えられました。日付11インクと他の方法よりも紙を使用して安く、毒性の少ない方法が残っています。・ フット プリント分析は自動解析5,6,7と比較して安価と豊富な研究資金もなく研究者のためのマウス モデルにおける運動障害の評価に有用であります。.

吊りワイヤ ケージ蓋12を使用して 4 つの手足吊りテストの一種であり、ワイヤー メッシュ スクリーン13ボックス テスト。ボックスは、センター バーに沿ってボックスの上部にある回転メッシュふた付け装置です。歩行分析に加え、テスト安価かつ容易に実行できます。したがって、絞首刑を行ったボックスこのプロトコルのウォーターフット プリント分析にさらに握力とバランスを評価するテスト。

ストレスは運動障害14,15の症状を誘発します。運動障害は、運動障害16,17,18のマウス ・ モデルにおける自発運動表現型が観測されない場合でも多くの場合いくつかの慢性的なストレスによって誘導されます。拘束は、ストレス動物が物理的に無傷19ではなく、コストは専用装置による電気ショックなど他の方法と比較して少ないために、マウスで負荷の一般的に使用される方法の 1 つし、を搭載したトレッドミルの使用を強制します。封孔 50 mL の円錐管にマウスで行いますが、管による拘束は、ワイヤーなど他の方法メッシュ ストレーナ、録音された手足とガーゼ (見直し20) を持つ動物の折り返しより簡単です。本稿で我々 はフット プリントのプロトコルを要約分析およびぶら下げボックス拘束後チューブでのテストします。このプロトコルでは、自発的な運動表現なし運動障害疾患のマウスモデルを使用してくれます。

Protocol

すべての動物実験は、人道的な方法で行われました。制度的動物実験委員会の自治医科大学は、研究を承認しました。研究を行った機関の規則に従って動物実験の基本的なガイドライン動物実験の適切な実施や学術研究機関で関連活動のため日本の文部科学省の管轄下にあります。マウスをこのプロトコルで使用されている前述の21。 1. ぶら下げボック?…

Representative Results

Atp1a3のヘテロ接合体の男性マウス (Atp1a3+/−) マウス モデルである急速な発症性ジストニアに対するパーキンソニズムと野生型同腹子をこのプロトコルで使用されました。Atp1a3+/− の 4 週齢 (図 5 aと図 5 b円と正方形を開く) の野生型よりも前肢と後肢の大幅に短いストライドの長さを示?…

Discussion

・ フット プリント分析とテストぶら下げボックス マウスの運動機能のシンプルで安価な行動テストです。いくつかのマウス モデルにおける神経行動学的表現型は、これらのテストによって正常に検出されています。たとえば、筋萎縮性側索硬化症24、毛細血管拡張性運動失調25ハンチントン病26とジストニア27重複の高?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、(学術振興会) 日本学術振興会科研費 (費補助金科学研究 C)、によって支えられた番号 18 K 07373 (継手) と私立大学への補助金を付与します。

Materials

Hanging box O’hara & Co. http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/
Marking pen ZEBRA MO-120-MC-BK
Goal box O’hara & Co. http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/ Accessory for apparatus of balanced beam test
Boxes O’hara & Co. – Side wall of runway
Black ink Shin-asahi –
Red ink Maruyamakogyo BC-6
Disposable Petri Dish Corning 351008 Petri dishe (35 mm in diameter)
Askul Multipaper Super White J Monochrome A3 Askul 701-712 White paper (29.7 cm x 42 cm x 0.09mm)
50 mL Conical tube Corning 430829
Square drill KAKURI Corporation DIY FACTORY (K32-0313)
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Keywords: Gait AnalysisFootprint AnalysisHanging Box TestChronic Restraint StressMouse Motor DisordersBehavioral TestStride LengthBase-widthInk Paw Printing
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Sugimoto, H., Kawakami, K. Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress. J. Vis. Exp. (143), e59027, doi:10.3791/59027 (2019).
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