Låg kostnad protokollet bestående av footprint-analys och hängande box test efter återhållsamhet stress är användbar för att utvärdera rörelsestörningar av musmodell.
Gångrubbning observeras ofta hos patienter med rörelsestörningar. I musmodeller används för rörelsestörningar, är gånganalys viktigt beteendemässiga test för att avgöra om mössen efterlikna symtomen på patienter. Motoriska brister induceras ofta av stress när inga spontana motoriska fenotyp observeras i musmodeller. Gånganalys följt av stress lastning skulle därför vara en känslig metod för att utvärdera den motoriska fenotypen i musmodeller. Dock möta forskare kravet på en dyr apparat att få kvantitativa resultat automatiskt från gånganalys. Stress är stress lastning av enkla metoder utan dyra apparaturar krävs för elektriska stötar och tvingade kör önskvärt. Därför introducerar vi en enkel och billig protokoll bestående av footprint-analys med papper och bläck, hängande box test för att utvärdera motorik och stress lastning definieras av återhållsamhet med ett koniskt rör. De motoriska bristerna av möss upptäcktes framgångsrikt av detta protokoll.
Rörelsestörningar definieras som störningar i nervsystemet visar ett överskott eller brist på frivillig eller automatiska rörelser1. Gångrubbning dokumenteras särskilt vanligt bland patienter med rörlighet störningar2,3,4. Gånganalys är därför ett lämpligt beteende test för validering av djurmodeller av rörelsestörningar. Hos möss, har automatiserade gait analyser utförts för promenader på naturliga hastighet5 och justerbar hastighet av löpband6,7. Dessa analyser ger kvantitativa resultat av gångart automatiskt. En alternativ metod att upptäcka gångrubbning kallas footprint-analys. Efter märkning bottnar i fötterna med bläck, möss gå på papper, och fotspår analyseras. Initialt, vaselin och kolpulver användes för att visualisera den fotavtryck8, och då ersattes av bläck på lögndetektor papper9 och fotografiska utvecklare på fotografiskt papper10. Ett billigare och mindre giftiga metod med bläck och papper än de andra metoderna återstår datum11. Footprint-analys är billigare jämfört med automatiserad analys5,6,7 och skulle vara lämpligt att utvärdera rörelsestörningar i musmodeller för forskare utan riklig forskningsmedel .
Hängande box test är en typ av fyra lem hängande tester använder tråd bur lock12 och wire mesh skärm13. Rutan är en apparat med vridbar mesh lock på toppen av rutan längs en center bar. Utöver gånganalys, kan testet billigt och enkelt utföras. Därför genomförde vi hängande box-test för att utvärdera greppstyrka och balans, i tillägg till den footprint-analysen i detta protokoll.
Stress framkallar symptomen av rörlighet störningar14,15. Motoriska brister induceras ofta av flera kroniska betonar även när inga spontana motoriska fenotyp observeras i musmodeller av en rörelse sjukdom16,17,18. Återhållsamhet är en av de vanligaste metoderna för stress som laddar hos möss, eftersom djuret är inte fysiskt skadade19 och kostnaden är mindre jämfört med andra metoder såsom elektriska stötar med särskild apparatur och tvingas köra med användning av ett löpband. Fasthållning av ett rör, som utförs av inskränker en mus i en hålad 50 mL koniska tub, är lättare än andra metoder såsom wire mesh SIL, tejpade lem och inslagning av djur med gasväv (över20). I detta papper, vi sammanfattar protokoll av fotavtryck analys och rutan hängande testa efter återhållsamhet genom ett rör. Detta protokoll skulle hjälpa oss att använda musmodeller av rörelsestörningar utan spontana motoriska fenotyp.
Den footprint-analysen och rutan hängande testa är enkel och billig beteendemässiga tester för motoriska funktionen hos möss. De neurologiskt betingade fenotyperna i flera musmodeller har upptäckts framgångsrikt av dessa tester. Till exempel förkortad steglängd i amyotrofisk lateralskleros24, ökad längd av asymmetriska steglängd i ataxi-telangiektasi25, ökad längd på överlappning i Huntingtons sjukdom26 och dystoni27…
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete stöds av JSPS (Japan Society för främjande av vetenskap) KAKENHI (bidrag för vetenskaplig forskning C), bevilja nummer 18K 07373 (Håkansson) och subventioner för privata universitet.
Hanging box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/ | |
Marking pen | ZEBRA | MO-120-MC-BK | |
Goal box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/ | Accessory for apparatus of balanced beam test |
Boxes | O’hara & Co. | – | Side wall of runway |
Black ink | Shin-asahi | – | |
Red ink | Maruyamakogyo | BC-6 | |
Disposable Petri Dish | Corning | 351008 | Petri dishe (35 mm in diameter) |
Askul Multipaper Super White J Monochrome A3 | Askul | 701-712 | White paper (29.7 cm x 42 cm x 0.09mm) |
50 mL Conical tube | Corning | 430829 | |
Square drill | KAKURI Corporation | DIY FACTORY (K32-0313) |