पुरुष चूहों के यौन व्यवहार का आकलन
Summary
यह लेख पुरुष चूहों में यौन व्यवहार परीक्षण करने का वर्णन करता है।
Abstract
यौन व्यवहार अत्यधिक प्रजातियों-विशिष्ट है। यद्यपि कृंतक में थोड़ा अलग यौन व्यवहार होता है, चूहों और चूहों में एक समान यौन व्यवहार पैटर्न होता है। इस लेख का उद्देश्य हार्मोन प्रेरित एस्ट्रस ovaryctomized महिला मॉडल और पुरुष चूहों के यौन व्यवहार के आकलन के लिए प्रयोगात्मक प्रक्रिया का वर्णन करने के लिए है। वीडियो और चित्रों में सबसे महत्वपूर्ण यौन व्यवहार तत्वों का प्रदर्शन किया जाता है। यौन व्यवहार परीक्षण के महत्वपूर्ण कदम, फायदे और सीमाओं को भी समझाया जाता है। अंत में, व्यवहार मापदंडों को प्रस्तुत किया जाता है, और बढ़ते, अंतर्मिशन, और संभोग में स्खलन प्रक्रियाओं को प्रतिष्ठित किया जाता है। परीक्षण अवधि के दौरान हुई अवधि और गिनती के संदर्भ में व्यवहार मापदंडों का मूल्यांकन किया जाता है।
Introduction
परिपक्व पुरुष चूहों में यौन व्यवहार विभिन्न मस्तिष्क सर्किट1में संबंधित और परस्पर निर्भर हार्मोनल सिस्टम और तंत्रिका प्रणालियों की एक श्रृंखला की बातचीत से परिणाम है । इसके लिए विकासात्मक अनुभवों, सीखने, संदर्भ और एक उपयुक्त साथी की भी आवश्यकता होती है। व्यवहार विश्लेषण तंत्रिका या न्यूरोक्राइन फ़ंक्शन पर एक महत्वपूर्ण प्रतिबिंब है। इसलिए, पशु मॉडल पर यौन व्यवहार अध्ययन व्यापक रूप से व्यवहार तंत्रिका विज्ञान और अन्य संबंधित अनुसंधान2में इस्तेमाल किया गया है। कृंतक ों में यौन व्यवहार के एथोग्राम को कई लेखों और पुस्तकों में समझाया गया है1,3,4. उदाहरण के लिए, चूहे5 में यौन व्यवहार के Scahs और बारफील्ड के विवरण ने चूहों5में एक समान व्यवहार पैटर्न को समझने में मदद की है। माउस व्यवहार अध्ययन के लिए सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले विषयों में से एक है। पतवार एट अल6 पुरुष माउस यौन व्यवहार का एक विस्तृत परिचय दिया: जब एक पुरुष माउस एक महिला मुठभेड़ों, यह महिला के anoजननांग क्षेत्र की जांच शुरू होता है । फिर, पुरुष पीछे से मादा माउंट करने के लिए मादा के पार्श्व के खिलाफ अपने सामने के पंजे दबाता है। मादा एक विशेषता यौन ग्रहणशील मुद्रा प्रदर्शित करती है, अपनी रीढ़ को धनुष में झुकाती है और अपनी पूंछ को शरीर के एक तरफ ले जाती है, जो पुरुष (यानी, लॉर्डोसिस) के यौन प्रवेश के लिए एक उद्घाटन अंतर्हित को उजागर करती है। बढ़ते के बाद, पुरुष तेजी से, उथले श्रोणि थ्रस्ट बनाता है, जिसके बाद धीमी और गहरी योनि थ्रस्ट होती है। कई अंतर्मिशन ों के बाद, वीर्य के स्खलन में लंबे समय तक चलने वाले जोर के परिणामस्वरूप, जिसके दौरान पुरुष माउस मादा6से दूर होने या गिरने से पहले लगभग 25 एस के लिए फ्रीज हो सकता है। स्खलन पर पुरुष माउस सहायक ग्रंथियों वीर्य युक्त मिश्रण का उत्पादन कर सकते हैं जो मैथुनी प्लग बनाने के लिए कठोर हो जाता है। अंत में, स्खलन के बाद, पुरुष जननांग संवारने शुरू होता है और महिला में रुचि की कमी प्रदर्शित करता है। संक्षेप में, पुरुष यौन व्यवहार के मूल अनुक्रम में सूंघना, निम्नलिखित, बढ़ते, अंतर्मिशन, स्खलन और स्खलन के बाद संवारना शामिल है। माउस यौन व्यवहार तनाव मतभेदों को दर्शाती है। उदाहरण के लिए, स्खलन विलंबता 594 से 6943 एस तक है, और अंतर्मिशन की संख्या 5 से 100 से अधिक है। स्खलन के बाद विलंबता 17 से 60 किमी तक होती है। हालांकि इस बार के अंतराल में उपन्यास मादा का परिचय कम हो सकता है। कुछ मामलों में, पुरुष नई महिला7के साथ पहले अंतर्मिशन पर स्खलन करते हैं।
यौन व्यवहार के मूल्यांकन के लिए प्रमुख घटनाएं बढ़ते हैं, अंतर्मिशन और स्खलन कर रहे हैं। व्यवहार वैज्ञानिकों ने न केवल प्रत्येक कार्रवाई की आवृत्ति की माप की सिफारिश की है, बल्कि इसकी विलंबता और समय अंतराल5,8भी है। पिछले अध्ययनों में कुछ प्रमुख माप संकेतकों में शामिल हैं: माउंट की संख्या, अंतर्मिशन की संख्या, माउंट विलंबता, अंतर्मिशन विलंबता, स्खलन विलंबता, बाद स्खलन माउंट विलंबता (या स्खलन के बाद अंतराल), स्खलन के बाद अंतर्मिशन विलंबता, मैथुन श्रृंखला की संख्या, और मैथुन श्रृंखला की अवधि। पार्क एट अल8 और सैक्स एट अल5 ने बताया कि बढ़ते, अंतर्मिशन और कृंतक के स्खलन की प्रत्येक क्रिया की पहचान कैसे की जाए। बढ़ते पुरुष के रूप में परिभाषित किया गया है जो पीछे से मादा को बढ़ाते हुए, उसके अग्रभाग के साथ उसके पार्श्व को टटोलता है, और उसके लिंग को तेजी से और बार-बार लिंग प्रविष्टि के बिना जोर देता है। अंतर्मिशन, जिसे लिंग प्रविष्टि के रूप में भी जाना जाता है, की पहचान निम्नलिखित कृत्यों में से एक या अधिक द्वारा की जाती है: तेजी से उथले थ्रस्ट के बाद एक लंबा, गहरा जोर, एक हिंडलेग के साथ एक तेजी से किक, और मादा से पुरुष की एक चिह्नित पार्श्व वापसी। स्खलन की पहचान एक टर्मिनल पेल्विक थ्रस्ट द्वारा की जाती है जो एक अंतर्मिशन की तुलना में धीमी और गहरी होती है और हिंदलेग की ऊंचाई में कमी होती है। प्रत्येक अनुक्रम द्वारा बढ़ते स्खलन तक एक copulatory श्रृंखला की पहचान की जाती है। वर्तमान अध्ययन में उपयोग किए जाने वाले व्यवहार मापदंडों की परिभाषाएं इस प्रकार सूचीबद्ध हैं: 1) बढ़ते विलंबता: महिला की शुरूआत से पुरुष के पहले बढ़ते तक का समय; 2) अंतर्मिशन विलंबता: महिला की शुरूआत से पहले अंतर्मिशन के लिए समय; 3) स्खलन विलंबता: पहले अंतर्मिशन से पहले स्खलन (आम तौर पर पिछले श्रोणि जोर के बाद) के लिए समय); 4) स्खलन के बाद माउंट विलंबता: स्खलन से अगले बढ़ते तक का समय; 5) स्खलन के बाद का समय और अगला अंतर्मिशन; 6) माउंट की संख्या: पहले स्खलन से पहले बढ़ते समय की संख्या; 7) अंतर्मिशन की संख्या: पहले स्खलन से पहले अंतर्मिशन की संख्या; 8) कोपुलेटरी श्रृंखला की संख्या: अवलोकन अवधि के दौरान मैथुन श्रृंखला की संख्या; 9) कोपुलेटरी श्रृंखला की अवधि: अवलोकन अवधि के दौरान सभी मैथुनश्रृंखला का समय।
यौन व्यवहार और संबंधित व्यवहार या तो पुरुष के घर पिंजरे में या एक संलग्न क्षेत्र में आयोजित किया जा सकता है, जिसके बीच एक उपकरण है Rissman “कोई रहस्य” प्रतिबिंबित बॉक्स कहा जाता है संभोग व्यवहार3का पालन करने के लिए पेश किया है । एक वीडियो कैमरा बॉक्स के सामने रखा गया है एक साथ एक पार्श्व दृश्य से चूहों की कार्रवाई रिकॉर्ड करने के लिए और एक वेंट्रल दृश्य से एक इच्छुक दर्पण के माध्यम से । हालांकि, इस विधि में उज्ज्वल रोशनी की आवश्यकता होती है, जो अनिवार्य रूप से चूहों में पर्यावरणीय तनाव को खत्म करने के लिए लंबे समय तक आदत की ओर जाता है। मापने की विधि के लिए, वीडियो-आधारित व्यवहार विश्लेषण को रिकॉर्ड करने और व्यवहार4की मात्रा निर्धारित करने की सिफारिश की जाती है। एक वीडियो रिकॉर्डर जिसमें 1/1000 से अधिक अनुशंसित शटर गति के साथ फ्रेम-बाय-फ्रेम वीडियो अग्रिम विकल्प है, जिसका उपयोग रैपिड माउस आंदोलनों को रिकॉर्ड करने के लिए किया जा सकता है। अंधेरे वातावरण में रिकॉर्डिंग करते समय उच्च रिज़ॉल्यूशन इन्फ्रारेड कैमरा आवश्यक है। फिल्म का विश्लेषण करने के लिए, कंप्यूटर हेरफेर के लिए व्यवहार के व्यक्तिगत फ्रेम को कैप्चर करने की अनुमति देने के लिए एक फ्रेम हथियाने वाला कंप्यूटर की आवश्यकता है। चूहे बेहद बहुमुखी हैं और लगभग किसी भी उपचार के बाद प्रतिपूरक व्यवहार प्रदर्शित कर सकते हैं। शरीर के हर भाग के बारे में अस्पष्टता मौजूद हो सकती है4. इसलिए, कुछ व्यवहारों के विश्लेषण के लिए अभी भी अधिक से अधिक संकल्प और उच्च गति कैमरों की आवश्यकता हो सकती है।
चूहों में पुरुष यौन व्यवहार तनाव मतभेदों, हार्मोन परिवर्तन, और जीन म्यूटेंटियन1,3,9,10सहित कई कारकों से प्रभावित होते हैं। मैकगिल और तुषार11 माउस संभोग व्यवहार में तनाव मतभेदसचित्र । उदाहरण के लिए, C57BL/6 पुरुष आमतौर पर अंतर्मिशन को जल्दी से प्राप्त करते हैं और लगभग 20 मिन11में स्खलन करते हैं। डीबीए/2 पुरुषों को अंतर्मिशन हासिल करने में धीमी गति होती है लेकिन तेजी से स्खलन होता है । बालब/सी पुरुषों को स्खलन (1 घंटे की औसत विलंबता) प्राप्त करने के लिए धीमी गति से कर रहे है प्रेषक11की एक लंबी अवधि के कारण । टेस्टोस्टेरोन पुरुष यौन व्यवहार2की सुविधा और बनाए रखता है, और टेस्टोस्टेरोन के स्तर में परिवर्तन यौन व्यवहार प्रदर्शन12बदल सकते हैं । सर्जिकल बधिया और एंटीएंड्रोजन उपचार दोनों टेस्टोस्टेरोन के स्तर को कम कर सकते हैं और यौन व्यवहार और यहां तक कि यौन प्रेरणा और यौन उत्तेजना13में तेजी से गिरावट के परिणामस्वरूप। प्रशासित टेस्टोस्टेरोन बधिया चूहों में पूर्वाग्रह और मैथुनिक व्यवहार बहाल कर सकते हैं। अंत में, नॉकआउट और नॉकडाउन चूहों जंगली प्रकार चूहों की तुलना में यौन व्यवहार के पहलुओं में अंतर प्रदर्शित करते हैं । उदाहरण के लिए, Adcy3, Cnga2, और Gnao के लक्षित उत्परिवर्तन के साथ पुरुष चूहों फेरोमोन का पता लगाने के लिए एक कम क्षमता का प्रदर्शन, जबकि Trpc2 नॉकआउट चूहों बदल साथी वरीयता14,15,16दिखाते हैं । चूहों के यौन व्यवहार पर ट्रांसजेनिक्स और नॉकआउट के अन्य प्रभावक्रॉली3द्वारा समझाया जाता है।
यहां, एक पुरुष माउस की बांधना में यौन व्यवहार का आकलन करने के लिए सबसे आम प्रक्रियाओं में से एक एक ओडिकोमेड महिला के साथ, जिसे ग्रहणशील होने के लिए हार्मोनल रूप से प्रिमेड किया गया है। चूहों में यौन व्यवहार प्रयोगों के संचालन के लिए एक प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया जाता है। इसके अलावा, सीडी-1 चूहों में सामाजिक अलगाव के परिणामस्वरूप यौन व्यवहार पैटर्न बदलने का एक उदाहरण दिखाया गया है।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रस्तुत प्रोटोकॉल में कुछ महत्वपूर्ण कदम हैं। महिलाओं के ऑडियंटोमी के बारे में, पीठ से सर्जरी चीरा खोलना पेट से कम हानिकारक है। यह देखते हुए कि अंडाशय की स्थिति गहरी है, अन्य अंगों को खींच रही है जब ची?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम प्रयोगों के लिए अपने सुझावों के लिए लू कांग, झांग होंगक्सिया, झांग बेइयू और हू एमआई को धन्यवाद देते हैं ।
Materials
| Choral hydrate | Sinopharm Chenmical Reagent Co., Ltd. | 20160225 | |
| Coated VICRYL Plus Sutures | Ethicon, Inc. | missing | |
| Estradiol benzoate | J&K Scientific, Ltd. | L930Q170 | |
| Ethanol absolute | Beijing Chemical Works Co., Ltd. | 20160715 | |
| Ibuprofen (Children's Motrin) | Shanghai Johnson & Johnson Co., Ltd. | 160629478 | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co., Ltd. | 217180501 | |
| Lidocaine | HebeI Tiancheng Pharmacreutical Co., Ltd. | 1170506107 | |
| Male and female CD-1 mice | Vital River Beijing | SCXK( )2013-0023 |
|
| Olive oil | |||
| Penicillin sodium | North China Pharmaceutical Co., Ltd. | F5126420 | |
| Progesterone | J&K Scientific, Ltd. | LR50Q07 | |
| Sony digital camera | Sony Corporation | HDR-CX290E | |
| Test box | DIY | ||
| ThinkStation Computer | Lenovo | S/N PCOGLQKG | |
| Vaporizer for Isoflurane | RWD Life Science Co., Ltd. | E05904-009M |
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