쥐에서 급성 뇌졸중 후 뇌 회복을 평가하는 전임상 모델
Summary
이 연구의 목적은 1-90 후 중뇌 동맥 폐색 / 재관류 (MCAO / R) 후 뇌 경색 및 감각 운동 기능을 테스트하여 뇌 허혈의 회복 및 후유부단계에서 연구를위한 동물 모델을 확립하고 검증하는 것입니다. 쥐에서 일.
Abstract
이 연구의 목적은 회복 및 후유증 단계에서 동물 뇌 허혈 모델을 확립하고 검증하는 것이었습니다. 남성 스프라그-다울리 쥐의 중간 대뇌 동맥 폐색/재관류(MCAO/R) 모델이 선택되었습니다. 쥐의 무게 (260-330 g), 스레드 볼트 유형 (2636/2838/3040/3043) 및 뇌 경색 시간 (2-3 h), 높은 롱가의 점수, 더 큰 경색 볼륨 및 더 큰 모델 성공 비율을 Longa의 점수와 TTC 염색을 사용하여 스크리닝하였다. 최적의 모델 상태(300 g, 3040 스레드 볼트, 3시간 뇌 경색 시간)를 획득하여 감각 운동 기능 및 경색 부피의 평가를 통해 재관류 후 1-90일 관찰 기간에 사용하였다. 이러한 조건에서, 양측 비대칭 시험은 1 일에서 90 일까지 유의한 차이를 가졌고, 그리드 보행 시험은 1 에서 60 일까지 유의한 차이를 가졌다; 두 가지 차이점은 적절한 감각 운동 기능 테스트가 될 수 있습니다. 따라서, 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계에서 새로운 쥐 모델의 가장 적절한 조건이 발견되었다: 300 g 쥐는 3040 브레인 볼트와 MCAO를 겪은 다음 뇌 경색을 위해 다음 reperfused. 적절한 감각 운동 기능 테스트는 양측 비대칭 테스트와 그리드 보행 테스트였습니다.
Introduction
뇌 허혈은 급성 단계 (1 주 이내), 회복 단계 (1 주 ~ 6 개월), 후유증 단계 (6 개월 이상)와 다른 뇌졸중 후 지표가있는 세 단계로 나뉩니다. 현재, 대부분의 연구는 뇌 허혈의 급성 단계에 초점을 맞추고 있기 때문에 중요한 효과와 다중 상대 연구 모델1,2,3. 그러나, 뇌 허혈의 회복과 후유증 단계는 장애의 장기 합병증으로 인해 무시 될 수 없습니다. 따라서, 본 연구의 목적은 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계를 연구하기 위해 안정적이고 안정적이며 비교적 간단한 동물 모델을 탐구하는 것이다.
많은 실험적인 뇌 허혈 모델 중, 우리는 오른쪽 중간 대뇌 동맥에 스레드 볼트 삽입을 통해 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)를 사용합니다 (MCA). 이 모델은 더 큰 경색 볼륨을 생성할 수 있는 인간 뇌졸중과 유사하며, 뇌졸중과 관련된 많은 행동 장애를 초래하며, 스레드 볼트4,5,6을제거하여 혈액 재관류(R)를 허용할 수 있다. MCAO/R은 또한 뇌 허혈7의 금표준 동물 모델로 간주됩니다. 더욱이, 뇌 손상의 중증도는 나사 볼트의 직경 및 삽입 길이, 뇌 허혈의 지속 시간 및 동물 체중(큰 쥐는 더 큰 두뇌와 두꺼운 대뇌 혈관을 가지고 있음)에 따라 달라집니다8. 따라서, 나사 볼트 유형, 경색 시간 및 랫트 무게를 변경함으로써, MCAO/R 랫트에서 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계에 적합한 모델을 찾을 수 있다. 쥐 모델의 유효성을 검사하기 위해 TTC 염색 및 감각 운동 기능 실험(양측 비대칭 테스트, 그리드 보행 테스트, 회전 테스트 및 리프팅 로프 테스트)을 사용하여 MCAO/R 모델에 대한 1일, 35일, 60일 및 90일 간의 연구를 수행했습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
급성 뇌허혈에 잘 사용되는 방법 및 행동 지표를 확립하는 많은 모델은 뇌 허혈의 회복 및 후유증 단계에 큰 변화가 없을 수 있습니다16,17. 그러나 회복 및 후유증 단계에서 뇌 허혈환자의 수가 가장 많다. 허혈성 뇌졸중의 회복 및 후유증 단계에 적합한 동물 모델을 선택하는 것이 필수적입니다.
쥐의 적당한 무게(260-330 g), 스레드 ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 중국 국립 자연 과학 재단 (81603315, 81603316), 중국 장시성의 주요 R & D 계획 (20171ACH80001), 푸젠 성 대학의 산업 및 학술 협력 프로젝트에 의해 지원되었다 중국 (2018Y4101011).
Materials
| Anatomical Microscope | Leica (Germany) | S8 | Microscopic operating instrument |
| Blade | Gellette | / | Cutting brain sections |
| Constant Temperature Shaking Bed | Taicang Experimental Equipment Factory | THZ-C | To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature |
| Digital Camera | Canon | 700D | For taking pictures of TTC staining |
| Electric Shaver | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 3000# | Removal of hair from the neck of rats |
| Forceps Hamostatic | Shanghai Medical device Co., Ltd. | 14 cm | Using for brain removing |
| Image Pro Plus Software | Media Cybernetics Inc. | 6.0 | Analyze the infarct volume |
| Isoflurane | RWD Life Science | 217170702 | Anesthetic gas |
| Microforceps | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Vascular micromanipulation |
| Microshear | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Vascular micromanipulation |
| Ophthalmic Forceps | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Auxiliary skin and muscle anatomy |
| Pphthalmic Scissors | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Using for cutting the skin of neck |
| Rat Brain Slice Mold | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 400 g | For standard, uniform cutting of brain tissue |
| Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus | Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd. | ZH-300B | To test the sensorimotor function |
| Small Animal Anaesthesia Machine | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | ABM3000 | A gas anesthetic machine |
| Small Animal Thermostat | Beijing Damida Technology Co., Ltd. | DM.7-YLS-20A | To maintain animal body temperature constant during operation |
| Surgical Scissors | Shanghai Medical device Co., Ltd. | 16 cm | Using for decapitate and brain removing |
| Suture | Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd. | 4-0 / 5-0 | Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations |
| Thread Bolt | Beijing Cinontech Co. Ltd. | 2636/2838/3040/3043-A4 | Blockage of the middle cerebral artery in rats |
| 5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC) | Sigma | LOT#BCBP3272V | Brain section staining reagent |
References
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