Cellules de progéniture coronaire et biomarqueurs solubles dans le pronostic cardio-vasculaire après angioplastie coronaire

Summary

Le développement des événements cardio-vasculaires défavorables principaux, qui affectent le pronostic cardio-vasculaire après l’angioplastie coronaire, sont influencés par l’ampleur des dommages coronaires et de la réparation vasculaire. L’utilisation de nouveaux biomarqueurs cellulaires et solubles coronaires, réactifs aux dommages et à la réparation vasculaires, sont utiles pour prévoir le développement des MACE et du pronostic.

Abstract

Les événements cardio-vasculaires défavorables principaux (MACEs) ont un impact négatif le pronostic cardio-vasculaire des patients subissant l’angioplastie coronaire due aux dommages ischémiques coronaires. L’étendue des dommages coronaires et les mécanismes de réparation vasculaire sont des facteurs influençant le développement futur des MACE. Les dispositifs vasculaires intrinsèques comme les caractéristiques de plaque et la complexité d’artère coronaire ont démontré l’information pronostique pour DESMAC. Cependant, l’utilisation des biomarqueurs circulants intracoronary a été postulée comme méthode commode pour l’identification tôt et le pronostic des MACEs, car ils reflètent plus étroitement les mécanismes dynamiques impliquant des dommages et la réparation coronaires. La détermination des biomarqueurs circulants coronaires pendant l’angioplastie, comme le nombre de sous-populations de cellules progénitrices mononucléaires (MPC) ainsi que la concentration de molécules solubles reflétant l’inflammation, l’adhérence cellulaire et la réparation, permet évaluation des développements futurs et du pronostic des MACEs 6 mois après angioplastie coronaire. Cette méthode est mise en évidence par sa nature translationnelle et de meilleures performances que les biomarqueurs périphériques circulant dans le sang en ce qui concerne la prédiction des MACE et son effet sur le pronostic cardio-vasculaire, qui peut être appliqué pour la stratification du risque des patients avec la maladie coronarienne subissant l’angioplastie.

Introduction

L’angioplastie coronaire et l’endoprothèse représentent une procédure de sauvetage pour les patients atteints de maladie coronarienne (CAD). Cependant, les événements cardio-vasculaires défavorables principaux (MACEs), y compris la mort cardio-vasculaire, l’infarctus du myocarde, la reposnose coronaire, et les épisodes d’angine ou décompensent l’insuffisance cardiaque, peuvent se produire des mois après l’intervention coronaire, incitant des visites imprévues à l’hôpital. Les MACE sont courants dans le monde entier et leur morbi-mortalité est élevée¹.

Les dommages ischémiques coronaires induitlas la réponse vasculaire tôt et les mécanismes réparateurs impliquant la mobilisation des MPCs dus à leur capacité de différenciation et/ou potentiel angio-réparateur, aussi bien que la production des molécules solubles comme les molécules intercellulaires d’adhérence (ICAMs), les métalloproteinases de matrice (MMP), et les espèces réactives d’oxygène, reflétant l’adhérence de cellules, le remodelage de tissu, et le stress oxydatif. Bien que des dispositifs vasculaires intrinsèques comme des caractéristiques de plaque et la complexité d’artère coronaire aient été employés pour prévoir des MACEs, quelques études ont suggéré que les biomarqueurs liés aux mécanismes des dommages et de la réparation se produisant dans l’endothélium coronaire pourraient être très utiles pour l’identification tôt et le pronostic des événements cardio-vasculaires dans les patients présentant la CAO soumis à l’angioplastie coronaire^2,3,4,5.

L’intérêt continu pour comprendre les mécanismes sous-jacents aux lésions et aux réparations de LA CORONARale a incité les chercheurs à étudier les biomarqueurs circulants intracoraires, parce que l’échantillonnage coronaire reflète plus étroitement les lésions vasculaires et la réparation⁶. Cependant, la caractérisation des biomarqueurs coronaires dans les études humaines a été rare^7,8,9. Par conséquent, le but de la présente étude était de décrire une méthode pour déterminer la quantité de MPC sépariaux circulants et de molécules solubles, reflétant des dommages vasculaires et la réparation, et pour montrer si ces biomarqueurs sont associés aux MACEs et au pronostic clinique des patients de CAO qui ont subi l’angioplastie coronaire. Cette méthode est basée sur l’utilisation de MPC vasculaires et circulants et de molécules solubles obtenues en échantillonnant les endroits les plus proches des dommages du vaisseau. Il peut également être utile pour des études cliniques pour l’ischémie inférieure de membre, la course, la vasculite, la thrombose veineuse, et d’autres dommages vasculaires et la réparation.

Protocol

Ce protocole répond aux lignes directrices institutionnelles du Comité d’éthique de la recherche humaine. 1. Angiographie coronaire, échographie et prélèvement sanguin Demander des renseignements cliniques et démographiques de base avant l’intervention coronaire. Recueillir les données de l’individu : l’âge, le sexe, l’état actuel du tabagisme, l’indice de masse corporelle (IMC), l’hypertension artérielle, la dyslipidémie, le diabète sucré, les médicaments et l’indicat…

Representative Results

Le sinus coronaire, veineux, et le sang périphérique ont été rassemblés de 52 patients qui ont subi l’angiographie coronaire (figure 1) et ont montré une prédominance élevée de l’hypertension et de la dyslipidémie. Au suivi clinique, 11 (21,1 %) Les MACEs se sont produits 6 mois après l’angiographie coronaire : décès (n – 1), angine nécessitant la présence à l’hôpital (n – 6), infarctus du myocarde (n – 2), et/ou évidence de l’insuffisance c…

Discussion

La collecte de sang de l’artère coronaire affectée peut être difficile. Parfois, l’artère coronaire est à peine accessible. Dans ce cas, l’échantillonnage du sinus veineux peut être une alternative. Nous avons exécuté des essais de validation comparant des biomarqueurs circulants dans l’artère coronaire contre le sinus veineux, sans différences significatives. Cependant, la performance des biomarqueurs circulants a été validée seulement pour l’échantillonnage coronaire. Par conséquent, la performance des …

Materials

BSA	Roche	10735086001	Bovine Serum Albumin (BSA) as a buffering agent, stabilizer, standard and for blending.
Calibration Beads	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-607	MACQuant calibration beads are supplied in aqueous solution containing 0.05% sodium azide. 3.5 ml for up to 100 tests
CD133/1 (AC133)-PE	Milteny Biotec / MACS	#130-080-801	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD184 (CXCR4)-PE-VIO770	Miltenyi Biotec / MACS	#130-103-798	Monoclonal, Isotype recombinant human IgG1, conjugated
CD309 (VEGFR-2/KDR)-APC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-601	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD34-FITC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-081-001	The monoclonal antibody clone AC136 detecs a class III epitope of the CD34
CD45- VioBlue	Miltenyi Biotec / MACS	#130-092-880	Monoclonal CD45 Antibody, human conjugated
Conical Tubes	Thermo SCIENTIFIC	#339651	15ml conical centrifuge tubes
Cytometry Tubes	FALCON Corning Brand	#352052	5 mL Polystyrene Round-Bottom Tube. 12×75 style. Sterile.
EDTA	BIO-RAD	#161-0729	Heavy metals, (as Pb) <10ppm, Fe <0.01%, As <1ppm, Insolubles <0.005%
Improved Neubauer	Without brand	Without catalog number	Hemocytometer for cell counting. (range 0.1000mm, 0.0025mm2)
K2 EDTA Blood Collection Tubes	BD Vacutainer	#367863	Lilac plastic vacutainer tube (K2E) 10.8mg, 6 mL.
Lymphoprep	Stemcell Technologies	01-63-12-002-A	Sterile and checked on the presence of endotoxins. Density: 1.077±0.001g/mL
Paraformaldehyde	SIGMA-ALDRICH	#SZBF0920V	Fixation of biological samples, (powder, 95%)
Pipette Transfer 1,3mL	CRM Globe	PF1016, PF1015	The transfer pipette is a tool that facilitates liquid transfer with greater accuracy.
Test Tubes	KIMBLE CHASE	45060 13100	Heat-resistant test tubes. SIZE/CAP 13 x 100 mm