Koronar stamceller og løselige biomarkører i kardiovaskulær prognose etter koronar Angioplastikk

Summary

Utvikling av store uønskede kardiovaskulære hendelser, som påvirker kardiovaskulær prognose etter koronar angioplastikk, påvirkes av omfanget av koronarskade og vaskulær reparasjon. Bruken av nye koronar cellulære og løselige biomarkører, reaktive for vaskulær skade og reparasjon, er nyttige for å forutsi utviklingen av MACEer og prognose.

Abstract

Store uønskede kardiovaskulære hendelser (MACEer) påvirker den kardiovaskulære prognosen til pasienter som gjennomgår koronar angioplastikk på grunn av koronar iskemisk skade. Omfanget av koronarskade og mekanismene for vaskulær reparasjon er faktorer som påvirker den fremtidige utviklingen av MACEer. Iboende vaskulære egenskaper som plakkegenskaper og koronarkompleksitet har vist prognostisk informasjon for MACEer. Imidlertid har bruken av intrakoronar sirkulerende biomarkører blitt postulert som en praktisk metode for tidlig identifisering og prognose av MACEer, da de tettere reflekterer dynamiske mekanismer som involverer koronarskade og reparasjon. Bestemmelse av koronar sirkulerende biomarkører under angioplastikk, for eksempel antall underpopulasjoner av mononukleære stamceller (MPCer) samt konsentrasjonen av løselige molekyler som reflekterer betennelse, cellevedheft og reparasjon, gir mulighet for vurdering av fremtidigutvikling og prognosen for MACEs 6 måneder etter koronar angioplastikk. Denne metoden fremheves av sin translasjonelle natur og bedre ytelse enn perifert blod sirkulerende biomarkører om prediksjon av MACEer og dens effekt på kardiovaskulær prognose, som kan brukes for risikostratifisering av pasienter med koronarsykdom gjennomgår angioplastikk.

Introduction

Koronar angioplastikk og stenting representerer en redningsprosedyre for pasienter med koronarsykdom (CAD). Imidlertid kan store uønskede kardiovaskulære hendelser (MACEer), inkludert kardiovaskulær død, hjerteinfarkt, koronar restenose og episoder av angina eller dekompensere hjertesvikt, oppstå måneder etter koronarintervensjon, noe som fører til uplanlagte besøk på sykehuset. MACEer er vanlige over hele verden, og deres morbi-dødelighet er høy¹.

Koronar iskemisk skade induserer tidlig vaskulær respons og nedsettende mekanismer som involverer mobilisering av MPCer på grunn av deres differensieringsevne og /eller angio-reparative potensial, samt produksjon av løselige molekyler som intercellulære adhesjonmolekyler (ICAMs), matrise metalloproteinases (MMPs), og reaktive oksygenarter, reflekterer celleadhesjon, vev remodeling, og oksidativt stress. Selv om iboende vaskulære funksjoner som plakk egenskaper og koronarkompleksitet har blitt brukt til å forutsi MACEer, noen studier har antydet at biomarkører knyttet til mekanismer for skade og reparasjon som forekommer i koronar endotelet kan være svært nyttig for tidlig identifisering og prognose av kardiovaskulære hendelser hos pasienter med CAD sendt til koronar angioplastikk^2,3,4,5.

Kontinuerlig interesse for å forstå mekanismene underliggende CAD skade og reparasjon har motivert etterforskere til å studere intrakoronar sirkulerende biomarkører, fordi koronar prøvetaking nærmere gjenspeiler vaskulær skade og reparasjon⁶. Karakterisering av koronar biomarkører i menneskelige studier har vært knappe^7,8,9. Derfor var formålet med den nåværende studien å beskrive en metode for å bestemme mengden koronar sirkulerende MPCer og løselige molekyler, noe som reflekterer både vaskulær skade og reparasjon, og for å vise om disse biomarkører er forbundet med MACEer og klinisk prognose av CAD-pasienter som gjennomgikk koronar angioplastikk. Denne metoden er basert på bruk av vaskulær-relaterte, sirkulerende MPCer og løselige molekyler oppnådd ved prøvetaking steder nærmest fartøyet skade. Det kan også være nyttig for kliniske studier for nedre lem iskemi, hjerneslag, vaskulitt, venøs trombose, og andre skader som involverer vaskulær skade og reparasjon.

Protocol

Denne protokollen oppfyller de institusjonelle retningslinjene fra den menneskelige forskningsetikkkomiteen. 1. Koronar angiografi, ultralyd og blodprøvetaking Be om klinisk og demografisk informasjon ved baseline før koronarintervensjon. Samle individets data: alder, kjønn, nåværende røykestatus, kroppsmasseindeks (BMI), høyt blodtrykk, dyslipidemi, diabetes mellitus, medisiner og indikasjonen for gjeldende koronar angiografi. Utfør koronar angiografi gjennom hjert…

Representative Results

Koronar, venøs sinus og perifert blod ble samlet inn fra 52 pasienter som gjennomgikk koronarangiografi (figur 1) og viste en høy forekomst av hypertensjon og dyslipidemi. Ved klinisk oppfølging var 11 (21,1 %) MACE-er skjedde 6 måneder etter koronarangiografi: død (n = 1), angina som krever sykehusoppmøte (n = 6), hjerteinfarkt (n = 2), og/eller bevis på hjertesvikt (n = 4). Den baseline kor…

Discussion

Blodinnsamling fra den berørte koronararterien kan være vanskelig. Noen ganger er koronararterien knapt tilgjengelig. I dette tilfellet kan prøvetaking fra venøs sinus være et alternativ. Vi utførte valideringstester som sammenlignet sirkulerende biomarkører i koronararterie vs venøs sinus, uten signifikante forskjeller. Imidlertid ble ytelsen til sirkulerende biomarkører validert bare for koronarprøvetaking. Derfor gjenstår ytelsen til biomarkører hentet fra venøs sinus å bli utforsket.

<p class="jove_…

Materials

BSA	Roche	10735086001	Bovine Serum Albumin (BSA) as a buffering agent, stabilizer, standard and for blending.
Calibration Beads	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-607	MACQuant calibration beads are supplied in aqueous solution containing 0.05% sodium azide. 3.5 ml for up to 100 tests
CD133/1 (AC133)-PE	Milteny Biotec / MACS	#130-080-801	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD184 (CXCR4)-PE-VIO770	Miltenyi Biotec / MACS	#130-103-798	Monoclonal, Isotype recombinant human IgG1, conjugated
CD309 (VEGFR-2/KDR)-APC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-601	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD34-FITC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-081-001	The monoclonal antibody clone AC136 detecs a class III epitope of the CD34
CD45- VioBlue	Miltenyi Biotec / MACS	#130-092-880	Monoclonal CD45 Antibody, human conjugated
Conical Tubes	Thermo SCIENTIFIC	#339651	15ml conical centrifuge tubes
Cytometry Tubes	FALCON Corning Brand	#352052	5 mL Polystyrene Round-Bottom Tube. 12×75 style. Sterile.
EDTA	BIO-RAD	#161-0729	Heavy metals, (as Pb) <10ppm, Fe <0.01%, As <1ppm, Insolubles <0.005%
Improved Neubauer	Without brand	Without catalog number	Hemocytometer for cell counting. (range 0.1000mm, 0.0025mm2)
K2 EDTA Blood Collection Tubes	BD Vacutainer	#367863	Lilac plastic vacutainer tube (K2E) 10.8mg, 6 mL.
Lymphoprep	Stemcell Technologies	01-63-12-002-A	Sterile and checked on the presence of endotoxins. Density: 1.077±0.001g/mL
Paraformaldehyde	SIGMA-ALDRICH	#SZBF0920V	Fixation of biological samples, (powder, 95%)
Pipette Transfer 1,3mL	CRM Globe	PF1016, PF1015	The transfer pipette is a tool that facilitates liquid transfer with greater accuracy.
Test Tubes	KIMBLE CHASE	45060 13100	Heat-resistant test tubes. SIZE/CAP 13 x 100 mm