신생아 쥐 기간에 줄기 세포의 내 치 통 주입
Summary
설명된 것은 기간 신생아 쥐의 장내 주사를 통해 중간기질 기질 세포(MSC)의 장내 이식을 수행하기 위한 프로토콜이다. 이 기술은 그들의 효험을 평가하기 위하여 신생아 쥐 폐로 줄기 세포 및 약의 납품을 위한 임상적으로 실행 가능한 선택권입니다.
Abstract
산소의 고농도에 장기간 노출은 염증과 급성 폐 손상으로 이어질, 이는 인간의 기관지 폐 이형성증과 유사 (BPD). 미숙아에서 BPD는 계면 활성제 치료, 최적의 환기 전략 및 비침습적 양압 환기를 조기에 사용했음에도 불구하고 주요 합병증입니다. 폐 염증은 BPD의 발병기유발에 중요한 역할을 하기 때문에, 코르티코 스테로이드 사용은 이를 예방하기 위한 하나의 잠재적 치료법이다. 그럼에도 불구 하 고, 전신 코르 티 코 스테로이드 치료는 일반적으로 장기 부작용으로 인해 조영아에 대 한 권장 되지 않습니다. 전임상 연구와 인간 단계 I 임상 시험은 hyperoxia 유도폐 상해및 조산유아에 있는 중간엽 기질 세포 (MSC)의 사용이 안전하고 가능하다는 것을 보여주었습니다. 내과 호흡 및 정맥 MSC 이식은 신생아 과옥성 폐 손상으로부터 보호하는 것으로 나타났습니다. 따라서, 줄기 세포의 장내 투여및 결합계면활성제 및 글루코코르티코이드 치료는 호흡기 질환으로 신생아를 치료하는 새로운 전략으로 부상하고 있다. 출생시 쥐 폐의 발달 단계는 임신의 26-28 주에 인간 폐에 있는 것과 동일합니다. 따라서 신생아 쥐는 호흡 곤란을 가진 조산아에게 그 효능을 평가하기 위해 장내 투여를 연구하는 데 적합합니다. 이 장내 주입 기술은 줄기 세포와 약물을 폐로 전달하기위한 임상적으로 실행 가능한 옵션입니다.
Introduction
보충 산소는 종종 호흡 곤란으로 신생아를 치료하는 데 필요합니다1. 그러나, 유아에 있는 hyperoxia 치료는 불리한 장기 효력이 있습니다. 산소의 고농도에 장기간 노출은 염증과 급성 폐 손상으로 이어지며, 이는 인간 기관지 폐 이형성증(BPD)2와유사하다. BPD는 조기 계면활성제 치료, 최적의 환기 절차 및 미숙아의 비침습적 양압 환기 의 사용 증가에도 불구하고 발생할 수있는 hyperoxia 치료의 주요 합병증입니다. 많은 치료 전략이 BPD3에대해 보고되었지만 알려진 치료법은 이 합병증을 줄일 수 없습니다.
코르티코 스테로이드 사용은 BPD를 방지 하기 위해 하나의 잠재적인 치료, 폐 염증 그것의 병 인에 중요 한 역할을 하기 때문에. 그러나, 전신 코르티코 스테로이드 치료는 일반적으로 장기 부작용으로인해 조산 유아에 대 한 권장 하지 않습니다4,5.
중간엽 기질 세포(MSC)는 만능 특성을 가지며 뼈, 연골, 지방 조직, 근육 및 힘줄을 포함한 다양한 세포 유형으로 분화할 수 있다6. MSP는 면역 조절, 항염증 및 재생 효과7을가지며, 동물 연구는 설치류8,,9에서과옥시아 유발 폐 손상에 대한 암조 및 분비 성분의 치료 이점을 보여준다. 내과 호흡 및 정맥 MSC 이식은 신생아 과옥성 폐 손상으로부터 보호하는 것으로 나타났습니다. 따라서, 줄기 세포의 내과 실체 투여및 결합된 계면활성제 및 코르티코 스테로이드 치료는 호흡기 질환으로 신생아를 치료하는 잠재적인 치료 전략일 수 있다. 전임상 연구는 신생아 쥐10,,11, 12에서줄기 세포 및 아데노 관련 바이러스의 장내투여를사용하였다. 그러나, 이식된 줄기세포의 기술 및 생체 내 추적의 단계별 프리젠테이션은 유효하지 않다. 신생아 쥐는 출생 시 쥐 폐의 낭반 단계가 임신13의26-28 주에 인간 폐의 것과 동일하기 때문에 호흡 곤란을 가진 조산유아에 대한 내내 투여의 효과를 연구하는 데 적합합니다. 쥐 기관으로 투여하는 효과적인 방법은 성공적인 폐 분포에 매우 중요합니다. 여기에 제시된 기술은 인간을 위한 모형으로 쥐를 사용하여 신생아 폐 질병의 처리를 위한 세포 및/또는 약의 장내 투여의 연구를 허용합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
호흡 곤란을 가진 신생아는 일반적으로 내추럴 계면활성제 및/또는 코르티코스테로이드 치료가필요합니다 19. 인간 상 I 임상 시험은 조산유아에서 내막 MSC의안전성(8)을입증했다. 이러한 연구는 약물의 장내 투여가 호흡 곤란을 가진 신생아에게 중요한 선택이라는 것을 시사합니다. 모델 기능이 인간과 직접 관련이 있는 경우 동물 모델 연구?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 부분적으로 메리디겐 생명 공학 (주 타이페이, 대만)의 보조금에 의해 지원되었다 (A-109-008).
Materials
| 6-0 silk | Ethicon | 1916G | |
| Alcohol Prep Pad | CSD | 3032 | |
| BD Stemflow hMSC Analysis Kit | BD Biosciences | 562245 | CD markers |
| CMV-Luciferase-EF1α-copGFP BLIV 2.0 Lentivector for In Vivo Imaging | SBI | BLIV511PA-1 | |
| CryoStor10 | BioLife Solutions | 640222 | |
| Human MSCs | Meridigen Biotech Co., Ltd. Taipei, Taiwan | ||
| Infrared light | JING SHANG | JS300T | |
| Isoflurane | Halocarbon | 26675-46-7 | |
| IVIS-200 small animal imaging system | Caliper LifeSciences, Hopkinton, MA | ||
| Luciferin potassium salt | Promega, Madison, WI | ||
| Micro-scissors, straight | Vannas | H4240 | |
| Normal saline | TAIWAN BIOTECH CO., LTD. | 113531 | Isotonic Sodium Chloride Solution |
| Small Hub RN Needle, 30 gauge | Hamilton Company, Reno, NV | 7799-06 | |
| Syringe (100 µl) | Hamilton Company, Reno, NV | 81065 | |
| Xenogen Living Image 2.5 software | Caliper LifeSciences, Hopkinton, MA | N/A |
References
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