自家血液の二重注射による巨大なポンチン出血
Summary
我々は、自己の血液の二重注入を介してラットに大規模なポンチン出血モデルを確立するためのプロトコルを提示する。
Abstract
ラットに大規模なポンチン出血モデルを確立するためのプロトコルを提供します。体重約250グラムのラットをこの研究で使用した。100マイクロリットルの自家血液が尾静脈から採取され、立体的にポンに注入された。注射プロセスは2つのステップに分けられた:最初に、10μLの血液を特定の場所に注入し、後部(AP)-9.0 mm;横 (Lat) 0 mm;垂直(Vert)-9.2mm、AP -9.0 mmに位置する残留血液の2回目の注射が続きます。ラット0ミリメートル;20分間隔で-9.0 mmをvert。バランスビーム試験、四肢配置試験、および修飾Voestch神経スコアを使用して神経機能を評価した。磁気共鳴画像法(MRI)を用いて、生体内出血量を評価した。このモデルの症状は、大量のポンチン出血患者と一致していた。
Introduction
脳内出血は脳卒中患者の5分の1を占める。脳内出血の予後は、出血の速度、体積、および位置に依存する1,2.脳出血と比較すると、脳幹出血は死亡率と罹患率が高い3.脳幹出血の約40%がポン4に生じる。ポンチン出血の病因と病態生理は、前脳出血5とは全く異なり、研究が少ない。
ポンチン出血動物モデルには2種類あります。一つは、ポン6、7、8における細菌コラゲナーゼの注入によって誘発される自発性出血モデルである。このモデルの最大の利点は、出血が自発的であるということです.しかし、コラゲナーゼは少量のポンチン出血を誘発することしかできない。また、コラゲザーゼは脳に他の傷害を引き起こす可能性があります。他のモデルは、ポン9に自家血の定位的注入によって誘発される。このモデルの利点は、高い成功率で習得しやすいということです。理論的には、研究者はポンの任意の場所に血液の任意のボリュームを注入することができます。しかし、針路を通る逆漏れのため、注入された容積は限られている。近年、逆漏れ9を低減する二重注入法が推進されている。この方法は、注射の間に20分間隔で自家血液を2回注入する。二重注入法は、軽度(30μL)および中程度の(60μL)ポンチン出血を誘発するために適用されるが、大規模なポンチン出血ではない。クリニックでは、予後不良の大部分のポンチン出血患者は大量出血(10mL以上)を有する。
前の研究では、ラット10にポンチン虚血性脳卒中モデルを確立するためのプロトコルを提供した。本研究では、既存の二重注入法を改変し、ポンの2つの異なる場所で100μLの自家血を二重に注入することによりラットに大量のポンチン出血を誘導する詳細なプロトコルを提供する。
Protocol
Representative Results
Discussion
本研究では、大規模なポンチン出血ラットモデルを生成するプロトコルを提供した。このモデルは、巨大なポンチン出血の病態生理学的メカニズムおよび予後の研究に使用することができる。
実験を通じて25匹のラットが使用され、そのうち1匹しか死ななかった。MRIの検証、総解剖学、およびHE染色は、この方法が非常に低い死亡率と高い成功率を持っていることを示し…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、中国国立科学財団(81471181と81870933)と広州医科大学(0506308)の開会ラボプログラム(0506308)からY Jiang、中国国立科学財団(81701471)と広州市保健委員会(20191A011083)のZ Qiu、中国国立科学財団(81501009)からL Wuまで財政的に支援されました。
Materials
| 100ml Saline solution | Guangdong yixiang | 191222201 C1 | Preparing heparin diluent |
| 100μl Microinjector | Shanghai Gaoge | Injection of autologous blood | |
| 1ml Syringe | Jiangsu Zhiyu | 20191014 | Withdraw autologous blood from the tail vein |
| 75% Alcohol | Shandong Lierkang | Disinfection of rat tail | |
| Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgicl instruments | |
| Animal anesthesia system | RWD | R510-31S-6 | Inducing and maintaining anesthesia |
| Balance beam | Jiangsu Saiangsi | For neurological deficit scores | |
| Blades | Shanghai Feiying | 74-C | For gross anatomy |
| Bone cement | Shanghai Xinshiji | 20180306 | Surgicl instruments |
| Brain tank | Shenzhen LEIYEA | For gross anatomy | |
| Butorphanol tartrate | Jiangsu Hengrui | For pain management | |
| Electric cranial drill | Nanjing Darwin biotechnology | 20180090018 | Making a burr hole on the skull |
| EP tube | Nantong Surui | Transfer autologous blood | |
| Erythromycin eye cream | Yunnan pharmacy | Eyes protection | |
| HE dye liquor | Solarbio | G1120 | For HE staining |
| Heating pad | Dangerous Jungle | JR01 | Keeping warm |
| Heparin sodium injection | Chengdu Haitong Pharmacal Company | 190701 | Preparing heparin diluent |
| IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
| Isoflurane | RWD | 20080701 | Inducing and maintaining anesthesia |
| Light dark box | Jiangsu Saiangsi | For neurological deficit scores | |
| Micro-injection pump | Baoding Leifu | TFD03-01-C | Injection of autologous blood |
| MRI system | Philips | Confirmation of infarction in vivo | |
| Needle holder | Shanghai Jinzhong | J32020 | Surgicl instruments |
| Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
| Q-tips | Jiangxi Songhe | Surgicl instruments | |
| Scalp heedle | Jiangxi Hongda | 20200313 | Withdraw autologous blood from the tail vein |
| Scalpel | Shanghai Kaiyuan | 170902 | Surgicl instruments |
| Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Y00040 | Surgicl instruments |
| Stereotaxic apparatus | RWD | 900-00001-00 | for surgical positioning |
| Surgical towel | Xinxiang Huakangweicai | 20070601 | Surgicl instruments |
| Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgicl instruments | |
| Suture scissors | Shanghai Jinzhong | J25041 | Surgicl instruments |
| Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | J31080 | Surgicl instruments |
References
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