Summary

Établissement d’un modèle de rat d’occlusion sagittale-sinus supérieure par l’intermédiaire d’une méthode d’embolie filimatique

Published: July 04, 2021
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Summary

Ici, nous établissons un modèle original de rat de Sprague-Dawley (écart-type) de la thrombose supérieure du sinus sagittal (SSS) par l’intermédiaire d’une méthode de fil-embolization, et la stabilité et la fiabilité du modèle ont été vérifiées.

Abstract

Les mécanismes contribuant au début naturel de la thrombose cérébrale de sinus veineux (CVST) sont la plupart du temps inconnus, et une série de facteurs incontrôlables sont impliqués dans le cours de la maladie, ayant pour résultat de grandes limitations dans la recherche clinique. Par conséquent, l’établissement de modèles animaux CVST stables qui peuvent normaliser une variété de facteurs de confusion incontrôlables a aidé à contourner les lacunes de la recherche clinique. Au cours des dernières décennies, divers modèles animaux CVST ont été construits, mais les résultats basés sur ces modèles ont été incohérents et incomplets. Par conséquent, afin d’explorer plus loin les mécanismes pathophysiologiques de CVST, il est nécessaire d’établir un modèle animal nouveau et fortement compatible, qui a la valeur pratique importante et la signification scientifique pour le diagnostic et le traitement de CVST. Dans la présente étude, un modèle original de rat de Sprague-Dawley (écart-type) de la thrombose supérieure du sinus sagittal (SSS) a été établi par l’intermédiaire d’une méthode de fil-embolization, et la stabilité et la fiabilité du modèle ont été vérifiées. En plus, nous avons évalué des changements du flux sanguin veineux cérébral chez les rats après la formation de CVST. Collectivement, le modèle de SD-rat SSS-thrombose représente un modèle animal original de CVST qui est facilement établi, réduit au minimum le trauma, donne la bonne stabilité, et tient compte de contrôler avec précision la synchronisation et l’emplacement ischémiques.

Introduction

La thrombose cérébrale des sinus veineux (CVST) est une maladie rare du système veineux cérébral qui ne représente que 0,5 à 1,0% de toutes les causes d’AVC, mais a un taux d’occurrence relativement élevé chez les enfants et les jeunes adultes1. Au cours de l’autopsie, le CVST s’est avéré être la cause de 10% des décès par maladie cérébrovasculaire2. La thrombose peut se produire dans n’importe quelle partie du système veineux intracrânien. Le sinus sagittal supérieur (SSS) est l’un des secteurs les plus généralement affectés dans CVST et peut impliquer de multiples vaisseaux sanguins. En raison de la sténose ou de l’occlusion des sinus veineux, le retour veineux intracrânien est bloqué, ce qui s’accompagne souvent d’une augmentation de la pression intracrânienne3. Les manifestations cliniques du CVST sont complexes et varient au fil du temps; bien qu’il y ait un manque de spécificité des symptômes, les symptômes les plus communs incluent le mal de tête (77.2%), les saisies (42.7%), et les déficits neurologiques (39.9%). Dans les cas graves, le coma et même la mort peuvent survenir4,5. Au cours des dernières années, en raison de l’amélioration globale des normes médicales et sanitaires et de la sensibilisation à la santé publique, la proportion de facteurs de risque connexes a changé, la proportion de traumatismes et d’infections a diminué, et la proportion de CVST causée par la grossesse, la période puerpérale, les contraceptifs oraux et d’autres raisons a progressivement augmentéde 5.

Actuellement, la pathogénie de CVST n’est toujours pas bien comprise. Pour explorer le CVST en profondeur, d’autres recherches physiopathologiques sont nécessaires. Cependant, la plupart de ces méthodes de recherche sont invasives et donc difficiles à mettre en œuvre cliniquement. En raison de nombreuses limites de la recherche clinique, les modèles animaux présentent des avantages irremplaçables en termes de recherche fondamentale et translationnelle.

La cause de CVST est complexe, car son début initial est souvent non reconnu et l’endroit de la formation de thrombus est fortement variable. Heureusement, les modèles animaux peuvent obtenir un meilleur contrôle de ces facteurs. Au cours des dernières décennies, une variété de modèles animaux CVST ont été établis, et chaque modèle a ses propres inconvénients. Selon les différentes méthodes de production, ils peuvent être grossièrement divisés en catégories suivantes: le modèle simple de ligature SSS6,7; le modèle d’accélérateur d’injection interneSSS 8; le modèle9de thrombose SSS induite par le chlorure ferrique ; le modèle photochimique-induit de thrombose SSS10; et le modèle SSS d’embolie-occlusion auto-fabriquée11. Cependant, la plupart de ces modèles sont incapables de contourner les dommages invasifs au cortex cérébral de l’animal et ne sont pas en mesure de contrôler avec précision l’heure et l’emplacement ischémiques. Dans certains modèles, le thrombus va se recanaliser spontanément ; dans d’autres modèles, le SSS devient définitivement occlu. En outre, des opérations compliquées et/ou des dommages sérieux peuvent affecter des résultats pathophysiologiques suivants dans ces modèles.

Dans la présente étude, un bouchon de fil a été inséré dans le SSS des rats de Sprague-Dawley (écart-type) pour établir avec succès un modèle CVST qui a réduit au minimum des dommages, a permis le contrôle précis, et a donné la bonne stabilité. De plus, l’imagerie par résonance magnétique (IRM) pour les petits animaux et l’imagerie du flux sanguin par moucheture laser ont été combinées pour vérifier l’efficacité du modèle. Nous avons évalué des changements du flux sanguin cérébral avant et après l’établissement de notre modèle, aussi bien que nous avons évalué la stabilité de notre modèle, posant une base pour d’autres études explorant l’occurrence, le développement, et les mécanismes pathophysiologiques relatifs de CVST.

Protocol

Les procédures impliquant des sujets animaux ont été approuvées par le Comité des normes médicales et de l’éthique de l’Université médicale de Wenzhou et sont conformes à la législation chinoise sur l’utilisation et les soins des animaux de laboratoire. 1. Préparation du bouchon de fil, des rats SD et de l’équipement expérimental Utilisez un fil de nylon d’un diamètre de 0,28 mm comme corps principal du bouchon de filetage.REMARQUE: La douceur et la duret…

Representative Results

Pour établir le modèle SD-RAT SSS-thrombose au moyen de la méthode de suture, la suture doit être préparée à l’avance (figure 1A), et l’équipement requis pour l’expérience (Figure 1B) doit être préparé. En raison de la nature délicate de l’opération, la préparation du modèle doit être effectuée sous un microscope de dissection. Les principales étapes sont illustrées à la figure 2. Pour faciliter la descr…

Discussion

Dans cette étude, un nouveau type de modèle CVST a été établi avec succès en insérant un bouchon de fil auto-fabriqué dans le SSS des rats SD. En plus, la formation image de flux sanguin de laser-moucheture et le petit-animal MRI ont été combinés pour surveiller des changements du flux sanguin sur la surface de cerveau des rats d’écart-type avant et après l’embolization afin de normaliser la synchronisation et l’emplacement ischémiques.

En 1989, Longa et al. ont réalisé u…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cette étude a été soutenue par une subvention de la Fondation de recherche scientifique pour les talents de haut niveau de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Fujian (X2019002-talents).

Materials

2 mL syringe Becton,Dickinson and Company 301940
brain stereotaxic instrument Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd 68025
dissecting microscope Wuhan SIM Opto-technology Co. SIM BFI-HR PRO
high-speed skull drill Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd 78046
laser-speckle blood-flow imaging system Wuhan SIM Opto-technology Co. SIM BFI-HR PRO
needle holder Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F31022-12
needle thread Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F33303-08
scissors Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd S13029-14
silica gel Heraeus Kulzer 302785
small animal anesthesia machine Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd R540
small-animal MRI Bruker Medical GmbH Biospec 94/30 USR
tweezers Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F11029-11
vascular forceps Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F22003-09

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Jiang, W., Jin, C., Xu, W., Li, Y., Lin, Y., Liang, S., Wang, W. Establishment of a Rat Model of Superior Sagittal-Sinus Occlusion via a Thread-Embolism Method. J. Vis. Exp. (173), e62118, doi:10.3791/62118 (2021).

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