Summary

オヴォで 市販のブロイラー卵の給餌:筋肉の発達と成長に影響を与える正確で再現可能な方法

Published: September 20, 2021
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Summary

孵化されていない市販のブロイラー卵を利用して、筋肉の発達および成長に影響を与える天然および合成化合物(この場合はニコチンアミドリボシド)の能力をテストするために 、卵子 摂食研究試験を実施するための堅牢な方法論が開発されている。

Abstract

過去30年以内に、赤身の肉と家禽の科学者は、胚と胎児の発育中に筋肉の発達を操作するための戦略と技術の開発に焦点を当てました。この領域は、この間に筋線維数が確立され、将来のすべての成長の基礎を決定するため、引き続き焦点領域です。家禽では、成長因子、ビタミン、または他の栄養素の 卵子 摂食において、ひよこの胚性筋肉および腸の発達を改善することが実証された多数の研究が実証された。 卵子筋の 発達を改善することは、肉の収量、成長率、またはミオパチーの状態に影響を与える可能性があることによって、家禽産業に利益をもたらす可能性があります。過去5年間、ジョージア大学のゴンザレス研究所は、ブロイラー – ニワトリ胚の 卵子 摂食方法論におけるニコチンアミドリボシドを開発し、筋肉の発達を変化させた。発達中の胚の卵黄嚢に注入すると、ニコチンアミドリボシドは、孵化時に 胸郭主要 筋重量および筋線維密度を増加させた。このプロトコルは、市販の標準および高収量のブロイラー胚を利用した 卵子 給餌研究において正確かつ再現性よく実施するための方法論を実証する。これらのデータと方法は、他の研究グループが多くの成功と再現性で 卵子 餌研究を行うことを可能にします。

Introduction

1960年以来、家禽からの米国の一人当たりの肉の消費量は驚くべき速度で増加していますが、他の主要なタンパク質源は停滞、減少、または最小限に増加しています。家禽業界は、需要に追いつくために効率的な鳥を生産するために、栄養と遺伝学を最適化するためにかなりの時間と研究努力を投資しました。家禽産業の主な目的は肉に変換するための筋肉を生産することであるため、彼らの努力は収穫時の鳥の究極の筋肉量を劇的に変えました。

ほとんどの種と同様に、家禽は二相性の方法で筋肉を発達させます。初代筋形成は、間葉系幹細胞を利用して初代筋線維を産生し、筋線維発達の第2波の足場となる1。家禽では、一次筋形成は胚発生3〜8日目に起こり、二次筋形成は8〜21日目に起こる。一旦発達すると、一次および二次筋線維は、細胞肥大を介した将来のすべての筋肉成長の基礎として役立つ。したがって、科学者と産業界は、肉の収量を最大化するために、すべての肉生産種の一次および二次筋形成を操作しようとかなりの努力を費やしました。

オボ給餌と呼ばれる家禽で探求された1つの技術は、注射を通して化合物を給餌することを含む。オボ給餌では、家禽業界が約40年間採用してきた技術が、当初はワクチン投与のために開発されました3。文献は、卵子内の異なる発達期間および位置での様々な化合物および栄養素の卵子摂食において、卵子筋の発達および成長にプラスの影響を与えることを文書化している4,5,6。今日まで、ジョージア大学のゴンザレス研究所は、家禽の筋肉の発達を操作するために、卵子の摂食にニコチンアミドリボシドを利用するパイオニアです。

ビタミンB3のピリジン – ヌクレオシド類似体であるニコチンアミドリボシドは、サルベージ経路7を介してNAD+を生成する。この経路は、NAD+を生成するためにより少ない酵素ステップを使用するので、生産は最も効率的である8。GonzalezとJackson9 は、ニコチンアミドリボシドによる発達中のブロイラー胚卵黄嚢の補給が、孵化したひよこの 胸郭の主要な 筋肉重量および筋線維密度を増加させることを実証した。これは後にXu et al.10によって確認され、ニコチンアミドリボシドの投与量の増加は筋肉重量を増加させ、筋線維密度を増加させることを見出した。これらの最初の2つの研究は、商業収量ブロイラーで実施された。高収量ブロイラーは究極の筋肉量サイズに対してより有意な遺伝的可能性を有するため、この研究の目的は、高収量ブロイラー孵化したひよこ 胸部の主要な 筋肉の発達および孵化時の成長に対するニコチンアミドリボシド用量の影響を決定することであった。

Protocol

すべての方法論は、ジョージア大学機関動物ケアおよび使用委員会によって承認されました。 1. 卵の孵化と治療投与 卵の調達と治療の割り当て 孵化されていない受精した高収量ブロイラー卵を入手し、実験室に輸送する。 品質が悪いと判断された卵を検査して廃棄する。メモ:形が悪い卵(丸い、細長い、スラブ側)、ひび割れ、汚れた/汚れた、?…

Representative Results

18日目の胚および孵化したひよこの体重に対するDOS効果はなかった(P > 0.52;図2)。終日-18胚胸部主要筋測定に対するDOS効果はなかった(P > 0.24;図3)。孵化したひよこの胸郭の主要筋肉の長さおよび幅の測定にはDOS効果はなかった(P > 0.26)。しかし、DOSは筋肉の体重と深さに影響を与えた(P < 0.03;図4</…

Discussion

今日まで、ジョージア大学のゴンザレス研究所は、胸郭の主要な筋肉の発達と成長に対する卵子摂食中のニコチンアミドリボシドの肯定的な効果を実証する唯一のグループです。最初の研究では、250mMのニコチンアミドリボシドの卵子補給において、卵黄嚢9に注射すると筋肉の重量および寸法が増加することが判明した。追跡調査では、現在の研究で試?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者らは、卵の寄付と卵の孵化に関する技術支援を提供してくれたCobb Vantress, Inc.に感謝したい。著者らは、ニコチンアミドリボシドの技術支援に対してChromaDex, Inc.に感謝したいと思います。

Materials

Air-Tite™ Sterile Hypodermic Needles- 20 G; 1 inch Fisher Scientific 14-817-208 https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-hypodermic-needles-32/p-7182916#?keyword=
Analytical Balance VWR VWR-214B2 https://us.vwr.com/store/product/20970740/vwr-b2-series-analytical-and-precision-balances
Complete Dissection Set DOCAZON DK1001 https://www.amazon.com/DOCAZON-Complete-Dissection-Set-Dissecting/dp/B07VBHKSW3
Fisherbrand™ Isotemp™ General Purpose Deluxe Water Baths Fisher Scientific FSGPD02  https://www.fishersci.com/shop/products/isotemp-general-purpose-water-baths/p-6448020
Fisherbrand™ Sterile Syringes for Single Use Fisher Scientific 14-955-464 https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-syringes-single-use-12/p-7114739#?keyword=
HIGH INTENSITY EGG CANDLER Titan Incubators N/A https://www.titanincubators.com/collections/egg-candlers/products/egg-candler-high-intensity
Infrared Forehead Thermometer HALIDODO XZ-001
Microsoft Excel Microsoft N/A
Neiko Tools Digital Caliper Neiko Tools 01408A https://www.amazon.com/Neiko-01407A-Electronic-Digital-Stainless/dp/B000NEA0P8?th=1
Nexcare Absolute Waterproof Tape Nexcare Brand 732 https://www.nexcare.com/3M/en_US/nexcare/products/catalog/~/Nexcare-Absolute-Waterproof-Tape/?N=4326+3294529207+3294631805
&rt=rud
Pen Size Temperature and Humidity USB Data Logger with Display Omega OM-HL-SP-TH https://www.omega.com/en-us/temperature-measurement/temperature-and-humidity-data-loggers/p/OM-HL-SP-Series
SAS 9.4 for Windows SAS Institute N/A https://www.sas.com/en_us/home.html
Sportsman 1502 Incubator GQF Manufacturing 1502 https://www.gqfmfg.com/item/1502-digital-sportsman/
Tru Niagen (Nicotinamide riboside) ChromaDex, Inc. N/A https://www.truniagen.com/truniagen-300mg/ – note, contact company for pure product
Wood Craft Sticks Creatology M20001547 https://www.michaels.com/wood-craft-sticks-by-creatology/M20001547.html

References

  1. Biressi, S., Molinaro, M., Cossu, G. Cellular heterogeneity during vertebrate skeletal muscle development. Developmental Biology. 308 (2), 281-293 (2007).
  2. Chal, J., Pourquie, O. Making muscle: Skeletal myogenesis in vivo and in vitro. Development. 144 (12), 2104-2122 (2017).
  3. Sharma, J., Burmester, B. Resistance of Marek’s disease at hatching in chickens vaccinated as embryos with the Turkey herpesvirus. Avian Diseases. 26 (1), 134-149 (1982).
  4. Al-Murrani, W. K. Effect of injecting amino acids into the egg on embryonic and subsequent growth in the domestic fowl. British Poultry Science. 23 (2), 171-174 (1982).
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  9. Gonzalez, J. M., Jackson, A. R. In ovo feeding of nicotinamide riboside affects pectoralis major muscle development. Translational Animal Science. 4 (3), 1-7 (2020).
  10. Xu, X., Jackson, A. R., Gonzalez, J. M. The effects of in ovo nicotinamide riboside dose on broiler myogenesis. Poultry Science. 100 (3), 100926 (2021).

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Cite This Article
Alcocer, H. M., Xu, X., Gravely, M. E., Gonzalez, J. M. In Ovo Feeding of Commercial Broiler Eggs: An Accurate and Reproducible Method to Affect Muscle Development and Growth. J. Vis. Exp. (175), e63006, doi:10.3791/63006 (2021).

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