Un modello di trapianto renale ortotopico di ratto per il rigetto dell'allotrapianto renale
Summary
Il modello di trapianto renale ortotopico di ratto contribuisce a studiare il meccanismo di rigetto dell’allotrapianto renale. Il modello attuale aumenta la sopravvivenza dei riceventi senza interferenze con l’afflusso di sangue e il reflusso venoso della parte inferiore del corpo utilizzando un’anastomosi end-to-end dell’impianto renale e un metodo “tunnel” end-to-side di anastomosi uretere-vescica.
Abstract
Il rigetto dell’allotrapianto renale limita la sopravvivenza a lungo termine dei pazienti dopo trapianto renale. Il trapianto renale ortotopico di ratto è un modello essenziale per studiare il meccanismo di rigetto dell’allotrapianto renale negli studi pre-clinici e potrebbe aiutare nello sviluppo di nuovi approcci per migliorare la sopravvivenza a lungo termine degli alloinnesti renali. L’impianto di rene del donatore nel trapianto renale ortotopico di ratto viene comunemente eseguito mediante anastomosi end-to-side all’aorta dei riceventi e alla vena cava inferiore. In questo modello, il rene del donatore è stato impiantato utilizzando l’anastomosi end-to-end all’arteria renale e alla vena renale dei riceventi. L’uretere del donatore è stato anastomosizzato alla vescica del ricevente in un metodo “tunnel” end-to-side. Questo modello contribuisce a una migliore guarigione dell’anastomosi uretere-vescicale e aumenta la sopravvivenza dei riceventi evitando interferenze con l’afflusso di sangue e il reflusso venoso della parte inferiore del corpo. Questo modello può essere utilizzato per studiare i meccanismi di rigetto immunitario e patologico acuto e cronico degli alloinnesti renali. Qui, lo studio descrive i protocolli dettagliati di questo trapianto renale ortotopico tra ratti.
Introduction
Il trapianto renale è diventato l’approccio terapeutico più efficace per i pazienti con insufficienza renale allo stadio terminale. Tuttavia, il rigetto acuto mediato dalle cellule T e il rigetto immunitario umorale mediato da alloanticorpi provocano il danno patologico degli alloinnesti renali e limitano la sopravvivenza a breve e lungo termine dei pazienti dopo trapianto di rene 1,2,3. Sfortunatamente, mancano ancora i farmaci efficaci che impediscono il rigetto degli alloinnesti renali, perché non sono chiari gli esatti meccanismi di rigetto immunitario e patologico degli alloinnesti renali. Di conseguenza, gli studi preclinici che chiariscono i meccanismi di rigetto immunitario e patologico degli alloinnesti renali contribuiscono a trovare nuovi bersagli e a sviluppare farmaci efficaci rilevanti per prevenire il rigetto degli alloinnesti renali ed eventualmente prolungare la sopravvivenza dei pazienti.
Molti potenziali meccanismi immunologici e fisiopatologici del rigetto dell’allotrapianto renale sono stati recentemente proposti in studi su modelli di ratto di trapianto renale ortotopico 4,5,6,7,8. Questi risultati propongono diversi nuovi bersagli e approcci interferenti rilevanti come terapie promettenti per sopprimere il rigetto dell’allotrapianto renale, come i fattori regolatori del complemento e gli anticorpi anti-CD596, l’immunoproteasoma e gli inibitori dell’epossichetone 7,8. Pertanto, il trapianto renale ortotopico di ratto è un modello preclinico ideale per studiare i meccanismi di rigetto immunitario e danno patologico degli alloinnesti renali dopo trapianto di rene.
Il trapianto di rene di ratto è gradualmente passato dall’impianto eterotopico dei reni del donatore9 all’impianto renale ortotopico utilizzando l’anastomosi end-to-side dei vasi o utilizzando l’anastomosi end-to-end dell’uretere utilizzando un metodo dicuffia 10,11,12. Il presente studio descrive protocolli dettagliati del trapianto renale ortotopico tra ratti utilizzando l’anastomosi end-to-end all’arteria renale e alla vena renale dei riceventi e un metodo “tunnel” end-to-side di anastomosi uretere-vescicale, che evita l’ischemia della parte inferiore del corpo e la trombosi della vena cava inferiore e riduce la perdita di urina postoperatoria e la torsione dell’uretere.
Protocol
Representative Results
Discussion
Il trapianto renale nel ratto è un lavoro impegnativo che richiede un alto livello di tecniche di microchirurgia e le tecniche operative sono state ottimizzate più volte. Fin dall’inizio, Gonzalez et al. hanno impiantato il rene del donatore nel collo del ricevente e hanno anastomosizzato l’uretere del donatore sulla pelle9. Tuttavia, a causa dell’alta incidenza di infezioni urinarie e stenosi dell’uretere donatore, l’operazione è stata abbandonata in breve tempo. Successivamente, l’operazione …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (81870304) a Jun Li e dalla Else Kröner-Fresenius-Stiftung (Nr. 2017_A28) a Marcus Groettrup.
Materials
| 10-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | G0090781 | |
| 4-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | C1048451 | |
| 8-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | C2090880 | |
| Buprenorphine | US Biological life Sciences | 352004 | |
| Electrocoagulator | Electrocoagulator | ZJ1099 | |
| F344 and Lewis rats | Center of Experimental Animals (Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, China) | NA | |
| Gauze | Henan piaoan group Co., LTD | 10210402 | |
| Heating pad | Guangzhou Dewei Biological Technology Co., LTD | DK0032 | |
| Heparin | North China Pharmaceutical Co., LTD | 2101131-2 | |
| Injection syringe (1 ml and 10 ml) | Shandong weigao group medical polymer Co., LTD | 20211001 | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co., LTD | 21070201 | |
| Penicillin G Sodium | Wuhan HongDe Yuexin pharmatech co.,Ltd | 69-57-8 | |
| Scalp needle (24 G) | Hongyu Medical Group | 20183150210 | |
| Shaver | Beyotime | FS600 | |
| Small animal anesthesia machine | RWD Life Science | R500 | |
| Small Animal Surgery Kit | Beyotime | FS500 | |
| Sodium chloride injection | Southwest pharmaceutical Co., LTD | H50021610 | |
| Surgical operation microscope | Tiannuoxiang Scientific Instrument Co. , Ltd, Beijing, China | SZX-6745 | |
| Swab | Yubei Medical Materials Co., LTD | 21080274 | |
| Tape | Minnesota Mining Manufacturing Medical Equipment (Shanghai) Co., LTD | 1911N68 | |
| UW solution | Bristol-Myers Squibb Company | 17HB0002 |
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