L’amélioration de la dénervation rénale a atténué l’hypertension induite par la perfusion d’angiotensine II
Summary
Nous présentons ici un protocole de dénervation sympathique rénale (RDN) chez les souris souffrant d’hypertension induite par la perfusion d’angiotensine II. La procédure est reproductible, pratique et permet d’étudier les mécanismes de régulation des RDN sur l’hypertension et l’hypertrophie cardiaque.
Abstract
Les bénéfices de la dénervation sympathique rénale (RDN) sur la pression artérielle ont été prouvés dans un grand nombre d’essais cliniques au cours des dernières années. Cependant, le mécanisme de régulation de la RDN sur l’hypertension reste insaisissable. Il est donc essentiel d’établir un modèle RDN plus simple chez la souris. Dans cette étude, des mini-pompes osmotiques remplies d’angiotensine II ont été implantées chez des souris C57BL/6 âgées de 14 semaines. Une semaine après l’implantation de la mini-pompe osmotique, une procédure RDN modifiée a été réalisée sur les artères rénales bilatérales des souris à l’aide de phénol. Les souris appariées selon l’âge et le sexe ont reçu une solution saline et ont servi de groupe fictif. La pression artérielle a été mesurée au départ et chaque semaine par la suite pendant 21 jours. Ensuite, l’artère rénale, l’aorte abdominale et le cœur ont été prélevés pour un examen histologique à l’aide de la coloration H & E et Masson. Dans cette étude, nous présentons un modèle RDN simple, pratique, reproductible et standardisé, qui peut contrôler l’hypertension et soulager l’hypertrophie cardiaque. La technique peut dénerver les nerfs sympathiques rénaux périphériques sans endommager les artères rénales. Par rapport aux modèles précédents, le RDN modifié facilite l’étude de la pathobiologie et de la physiopathologie de l’hypertension.
Introduction
L’hypertension est une maladie cardiovasculaire chronique majeure dans le monde. L’hypertension non contrôlée pourrait endommager les organes cibles et contribuer à l’insuffisance cardiaque, aux accidents vasculaires cérébraux et aux maladies rénales chroniques 1,2,3. La prévalence de l’hypertension est passée de 20 % à 31 % entre 1991 et 2007 en Chine. Le nombre d’adultes souffrant d’hypertension en Chine pourrait doubler à la suite d’une récente révision des critères diagnostiques de l’hypertension (130/80 mmHg)4. L’hypertension peut être contrôlée par la médecine, cependant, environ 20% des patients sont incapables de contrôler leur hypertension, même lorsqu’ils reçoivent au moins trois médicaments antihypertenseurs (dont un diurétique) à la dose maximale tolérée, ce qui peut conduire au développement d’une hypertension pharmacorésistante5.
La dénervation sympathique rénale (RDN) s’est avérée être un traitement potentiel de l’hypertension. En 2009, Krum et ses collègues ont signalé pour la première fois un traitement de l’hypertension résistante utilisant le RDN. Il a été constaté que l’ablation percutanée de l’artère rénale peut effectivement provoquer une réduction persistante de la pression artérielle chez les patients6. Cependant, l’échec de l’essai Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) a entravé l’application du RDN7, transformant le RDN en une thérapie controversée. Néanmoins, la perspective de RDN n’a pas encore été exclue. Des essais cliniques récents, dont RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED/ON MED et SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal, ont confirmé l’efficacité du RDN sur l’hypertension 8,9,10,11,12. Ainsi, des recherches mécanistiques plus détaillées doivent être effectuées pour explorer les effets du RDN.
Le but global de cette étude est de démontrer comment le RDN chez la souris peut être modifié pour produire une chirurgie plus simple et plus stable. Un grand nombre d’expériences ont étudié diverses approches de RDN, telles que la cryoablation intravasculaire, l’échographie extracorporelle et l’application locale d’un produit chimique ou d’une neurotoxine dans différents modèles animaux 13,14,15,16,17. Le modèle RDN généré par ablation chimique au phénol est un modèle expérimental bien établi pour étudier la pathogenèse de l’activation sympathique sur l’hypertension. Ce modèle est généré par corrosion chimique des nerfs sympathiques rénaux avec une solution de phénol/éthanol à 10% à l’aide d’un coton-tige18. D’une part, le RDN conventionnel inhibe potentiellement l’activité sympathique rénale, ce qui diminue alors la sécrétion de rénine et la réabsorption de sodium, et augmente le flux sanguin rénal. D’autre part, il supprime le système rénine-angiotensine-aldostérone19. Ainsi, RDN a un effet bénéfique sur l’hypertension. Cependant, le modèle RDN généré par ablation chimique manque de critères d’ablation et de temps d’ablation et les détails de la procédure expérimentale ne sont pas encore clairs. De plus, aucun rapport technique n’est disponible. Dans ce rapport, nous décrivons un protocole chirurgical pour la génération d’un modèle RDN avec du phénol en utilisant du papier de pesée dans l’hypertension induite par l’angiotensine II (Ang II) chez des souris C57BL / 6. Nous enveloppons l’artère rénale avec du papier de pesée contenant du phénol et unifions le temps d’ablation, ce qui aide à établir un modèle RDN plus reproductible et fiable. Ce modèle expérimental vise à évaluer l’effet des RDN sur l’hypertension.
Protocol
Representative Results
Discussion
La question de savoir si le RDN pourrait abaisser la tension artérielle est devenue controversée depuis la publication du résultat négatif de l’essai de symplicité HTN-3 7,25. Cependant, plusieurs essais cliniques et expériences sur des animaux ont démontré des résultats positifs et efficaces de RDN sur les humains et les animaux hypertendus 9,10,11,12,13,14,15,16,17.<sup class="xref…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (81770420), la Commission des sciences et de la technologie de la municipalité de Shanghai (20140900600), le Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), la spécialité clinique clé de Shanghai (shslczdzk02801) et le Centre de la maladie coronarienne gériatrique, l’hôpital Huadong affilié à l’Université Fudan.
Materials
| Angiotensin II | Sangon Biotech | CAS:4474-91-3 | To make a hypertensive animol model |
| Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody | Abcam | ab137869 | To evaluate the expression of TH of renal nerves |
| Blood Pressure Analysis | Visitech Systems | BP-2000 | Measure the blood pressure of mice |
| Mini-osmotic pump | DURECT Corporation | CA 95014 | To fill with Angiotensin II |
| Norepinephrine ELISA Kit | Abcam | ab287789 | to measure renal norepinephrine levels |
| Phenol | Sangon Biotech | CAS:108-95-2 | Damage the renal sympathetic nerve |
| Weighing paper | Sangon Biotech | F512112 | To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
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