Det nuvarande protokollet beskriver högfrekvent ultraljud för att visualisera hela mussköldkörteln och övervaka tillväxten av anaplastiskt sköldkörtelcancer.
Anaplastiskt sköldkörtelcancer (ATC) är förknippat med en dålig prognos och kort medianöverlevnadstid, men ingen effektiv behandling förbättrar resultaten signifikant. Genmanipulerade murina modeller som efterliknar ATC: s progression kan hjälpa forskare att studera behandlingar för denna sjukdom. Korsning av tre olika genotyper av möss, en TPO-cre / ERT2; BrafCA/WT; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 transgen ATC-modell utvecklades. ATC-murina modellen inducerades av en intraperitoneal injektion av tamoxifen med överuttryck av BrafV600E och deletion av Trp53, och tumörerna genererades inom cirka 1 månad. Högupplöst ultraljud applicerades för att undersöka tumörens initiering och progression, och den dynamiska tillväxtkurvan erhölls genom att mäta tumörstorlekarna. Jämfört med magnetisk resonanstomografi (MRT) och datortomografiskanning har ultraljud fördelar med att observera ATC-murinmodellen, såsom att vara icke-invasiv, bärbar, i realtid och utan strålningsexponering. Högupplöst ultraljud är lämplig för dynamiska och multipla mätningar. Ultrasonografisk undersökning av sköldkörteln hos möss kräver dock relevant anatomisk kunskap och erfarenhet. Denna artikel ger en detaljerad procedur för att använda högupplöst ultraljud för att skanna tumörer i den transgena ATC-modellen. Under tiden listas ultraljudsparameterjustering, ultraljudsskanningsförmåga, anestesi och återhämtning av djuren och andra element som behöver uppmärksamhet under processen.
Även om anaplastiskt sköldkörtelcancer (ATC) står för färre än 2% av sköldkörtelcancer, orsakar det mer än 50% av sköldkörtelcancerrelaterade dödsfall årligen. Medianöverlevnadstiden efter diagnos med ATC är endast cirka 6 månader, och inga behandlingar finns tillgängliga som signifikant förbättrar överlevnaden 1,2.
Sällsyntheten hos ATC har hindrat forskningen som studerar hur sjukdomen börjar och aggressivt fortskrider. Genetiskt modifierade musmodeller som efterliknar sjukdomen har nyligen blivit tillgängliga, vilket ger insikter om sjukdomen och dess svar på möjliga behandlingar 3,4,5. Sådana studier kräver noggrann tumöravbildning för mätningar och övervakning, vilket vanligtvis utförs med magnetisk resonanstomografi, datortomografi eller högupplöst ultraljud 6,7. Ultraljud har använts i stor utsträckning i musorgan. Det har fördelar jämfört med magnetisk resonanstomografi och datortomografi eftersom det kan utföras i realtid och inte utsätter ämnet för strålning, och den nödvändiga utrustningen är tillräckligt liten för att vara bärbar 8,9. Studier om kontinuerlig övervakning av ATC-tillväxt med ultraljud är dock sällsynta; Därför undersöker detta arbete användbarheten av ultraljud i detta sammanhang.
Här presenteras ett protokoll för att använda högupplöst ultraljud för att noggrant skanna, övervaka och mäta tumörer i en musmodell av ATC.
Detta protokoll använder högupplöst ultraljud för att analysera ortotopiska ATC-tumörer i en genetiskt konstruerad musmodell. Den transgena modellen, med en genotyp av TPO-cre/ERT2; BrafCA/WT; Trp53 Δex2-10/Δex2-10, utvecklades i vårt laboratorium. Djuren överuttrycker BrafV600E och saknar Trp53; Injektion av djuren intraperitonealt med tamoxifen leder till tumörtillväxt efter cirka 1 månad10. Tumörerna växer snabbt och når en mätb…
The authors have nothing to disclose.
Denna forskning fick inget specifikt bidrag från offentliga, kommersiella eller ideella finansieringsorgan.
Adhesive tape | Winner | ||
Anesthesia system | RWDlifescience | ||
Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
Cotton swabs | Winner | ||
Depilatory cream | Veet | ||
Electric heating blanket | Petbee | ||
Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
Medical gloves | Winner | ||
Paper towels | Breeze | B914JY | |
TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |