Bu protokol, fare tiroid bezinin tamamını görselleştirmek ve anaplastik tiroid karsinomunun büyümesini izlemek için yüksek frekanslı ultrasonografiyi tanımlamaktadır.
Anaplastik tiroid karsinomu (ATK) kötü prognoz ve kısa medyan sağkalım süresi ile ilişkilidir, ancak etkili bir tedavi sonuçları önemli ölçüde iyileştirmez. ATC’nin ilerlemesini taklit eden genetik olarak tasarlanmış murin modelleri, araştırmacıların bu hastalık için tedavileri incelemelerine yardımcı olabilir. Üç farklı fare genotipini geçmek, bir TPO-cre / ERT2; BrafCA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 transgenik ATC modeli geliştirildi. ATC murin modeli, BrafV600E’nin aşırı ekspresyonu ve Trp53’ün silinmesi ile intraperitoneal tamoksifen enjeksiyonu ile indüklendi ve tümörler yaklaşık 1 ay içinde üretildi. Tümörün başlama ve progresyonunu araştırmak için yüksek çözünürlüklü ultrasonografi uygulandı ve tümör boyutları ölçülerek dinamik büyüme eğrisi elde edildi. Manyetik rezonans görüntüleme (MRG) ve bilgisayarlı tomografi taraması ile karşılaştırıldığında, ultrasonun ATC murin modelini gözlemlemede noninvaziv, taşınabilir, gerçek zamanlı ve radyasyona maruz kalmadan avantajlar vardır. Yüksek çözünürlüklü ultrason dinamik ve çoklu ölçümler için uygundur. Bununla birlikte, farelerde tiroidin ultrasonografik incelemesi, ilgili anatomik bilgi ve deneyimi gerektirir. Bu makalede, transgenik ATC modelinde tümörleri taramak için yüksek çözünürlüklü ultrason kullanımı için ayrıntılı bir prosedür sunulmaktadır. Bu arada, ultrasonik parametre ayarı, ultrason tarama becerileri, anestezi ve hayvanların iyileşmesi ve işlem sırasında dikkat edilmesi gereken diğer unsurlar listelenmiştir.
Anaplastik tiroid karsinomu (ATC) tiroid kanserlerinin %2’sinden azını oluştursa da, yılda tiroid kanserine bağlı ölümlerin %50’sinden fazlasına neden olmaktadır. ATC tanısından sonra medyan sağkalım süresi sadece yaklaşık 6 aydır ve sağkalımı önemli ölçüde artıran hiçbir tedavi mevcut değildir 1,2.
ATC’nin nadirliği, hastalığın nasıl başladığını ve agresif bir şekilde ilerlediğini inceleyen araştırmaları engellemiştir. Hastalığı taklit eden genetiği değiştirilmiş fare modelleri yakın zamanda kullanıma sunulmuştur, bu da hastalık ve olası tedavilere verdiği yanıtlar hakkında fikir vermektedir 3,4,5. Bu tür çalışmalar, tipik olarak manyetik rezonans görüntüleme, bilgisayarlı tomografi veya yüksek çözünürlüklü ultrasonografi 6,7 kullanılarak gerçekleştirilen ölçümler ve izleme için doğru tümör görüntülemesi gerektirir. Ultrasonografi fare organlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Gerçek zamanlı olarak yapılabilmesi ve konuyu radyasyona maruz bırakmaması nedeniyle manyetik rezonans görüntüleme ve bilgisayarlı tomografiye göre avantajları vardır ve gerekli ekipmanlar taşınabilir olacak kadar küçüktür 8,9. Bununla birlikte, ultrason kullanarak ATC büyümesini sürekli izlemeye yönelik çalışmalar nadirdir; Bu nedenle, bu çalışma bu bağlamda ultrasonun faydasını araştırmaktadır.
Burada, ATC’nin bir fare modelinde tümörleri doğru bir şekilde taramak, izlemek ve ölçmek için yüksek çözünürlüklü ultrasonografi kullanmak için bir protokol sunulmaktadır.
Bu protokol, genetiği değiştirilmiş bir fare modelinde ortotopik ATC tümörlerini analiz etmek için yüksek çözünürlüklü ultrasonografi kullanır. TPO-cre/ERT2 genotipine sahip transgenik model; BrafCA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10, laboratuvarımızda geliştirilmiştir. Hayvanlar BrafV600E’yi aşırı ifade eder ve Trp53’ten yoksundur; Hayvanlara intraperitoneal olarak tamoksifen enjekte edilmesi yaklaşık 1 ay sonra tümör büyümesine yol açar<sup class…
The authors have nothing to disclose.
Bu araştırma, kamu, ticari veya kar amacı gütmeyen finansman kurumlarından özel bir hibe almamıştır.
Adhesive tape | Winner | ||
Anesthesia system | RWDlifescience | ||
Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
Cotton swabs | Winner | ||
Depilatory cream | Veet | ||
Electric heating blanket | Petbee | ||
Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
Medical gloves | Winner | ||
Paper towels | Breeze | B914JY | |
TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |