Mise en place d’un modèle de souris fistule oronasale

Summary

Cet article décrit une procédure étape par étape pour établir un modèle de souris avec une fistule oronasale. La fistule oronasale a été créée en utilisant un cautérisme ophtalmologique chauffé pour endommager la partie médiane du palais dur, entraînant la formation d’une ouverture entre les cavités buccale et nasale.

Abstract

Cette étude présente une méthode utilisant la cautérisation ophtalmologique chauffée pour développer un modèle viable pour l’étude des fistules oronasales. Des souris C57BL/6 ont été utilisées pour établir le modèle de la fistule oronasale (ONF). Pour créer l’ONF, les souris ont été anesthésiées, immobilisées et leur palais dur a été exposé. Au cours de l’intervention chirurgicale, une lésion de la muqueuse de 2,0 x 1,5 mm sur toute l’épaisseur a été induite sur la ligne médiane du palais dur à l’aide d’un cautéris ophtalmologique. Il était crucial de contrôler la taille de l’ONF et de minimiser les saignements afin d’assurer le succès de l’expérience. La vérification de l’efficacité du modèle ONF a été effectuée le 7e jour après l’opération, englobant à la fois des évaluations anatomiques et fonctionnelles. La présence de la cloison nasale dans la cavité buccale et l’écoulement d’eau stérile des narines lors de l’injection dans la cavité buccale ont confirmé la réussite de la mise en place du modèle ONF. Le modèle a démontré une fistule oronasale pratique et réussie, caractérisée par un faible taux de mortalité, des changements de poids importants et une variation minimale de la taille de l’ONF. Des études futures pourraient envisager d’adopter cette méthodologie pour élucider les mécanismes de cicatrisation des plaies palatines et explorer de nouveaux traitements pour les fistules oronasales.

Introduction

La fistule oronasale (ONF), une ouverture anormale entre les cavités buccale et nasale, se manifeste cliniquement par un défaut dans une zone structurelle allant de l’apophyse alvéolaire à la luette, qui survient généralement comme une complication après la réparation d’une fente palatine¹. Les patients atteints d’ONF présentent un reflux alimentaire, des troubles de l’articulation et une altération de la fonction vélopharyngée, ce qui a un impact significatif sur leur qualité de vie ^2,3,4. Le taux d’ONF postopératoire varie de 2,4 % à 55 % en raison de facteurs tels que la largeur de la fente, le type de Veau et la méthode chirurgicale 5,6,7,8. De plus, le taux de récidive après la réparation de l’ONF est élevé, allant de 0 % à 43 %⁹.

Plusieurs nouveaux traitements se sont récemment révélés prometteurs dans le domaine de l’ONF, y compris différents matériaux, médicaments et nouvelles techniques 10,11,12,13,14,15,16,17. Une évaluation précise des effets thérapeutiques est essentielle car elle constitue la base de la sélection et du développement ultérieur des traitements ONF. Cependant, il est difficile d’obtenir une évaluation valide à court terme pour les effets thérapeutiques autres que la chirurgie, car les caractéristiques des ONF varient d’un patient à l’autre. Par conséquent, l’établissement d’un modèle de maladie ONF est nécessaire pour vérifier l’efficacité de ces méthodes de traitement.

Pendant plusieurs décennies, les chercheurs ont généré le modèle de fistule oronasale (ONF) chez diverses espèces animales, notamment les rats^18,19, les porcelets^20,21, les miniporcs 22 et les chiens ^23, car ces espèces possèdent un palais dur substantiel adapté à la manipulation chirurgicale. Cependant, les souris ont une séquence génétique et un génome entier similaires à ceux des humains, ce qui en fait un modèle important pour la recherche et le développement de nouveaux médicaments^24,25,26. De plus, les souris offrent peu de variation d’un lot à l’autre, ce qui en fait un choix favorable pour établir le modèle ONF^12,13,27.

Cependant, les étapes détaillées de la création de l’ONF n’ont pas été décrites, et la stabilité de la taille de l’ONF n’a pas été prise en considération. De plus, la vérification de la formation de l’ONF reposait uniquement sur l’observation²⁸, sans assurer une communication directe entre les cavités buccales et nasales. Elle n’a pas été démontrée par d’autres moyens, tels que la perte de poids corporel de la souris en raison de difficultés à manger causées par l’ONF. De plus, la variation normale de la taille de la plaie n’a pas été prise en compte, ce qui est crucial pour les études sur les médicaments ou les matériaux qui favorisent ou inhibent la cicatrisation des plaies. Par conséquent, il y a un fort besoin d’établir un modèle ONF stable et validé.

L’objectif de cette étude était de développer un modèle pratique d’ONF qui répond aux problèmes susmentionnés, dans l’espoir que ce protocole servira de base à de futures recherches sur les mécanismes de cicatrisation des plaies palatines et à de nouveaux traitements pour l’ONF.

Protocol

Toutes les procédures animales de cette étude ont été examinées et approuvées par le comité d’éthique de l’École de stomatologie de la Chine occidentale de l’Université du Sichuan. Des souris C57BL/6 adultes (femelles) ont été utilisées pour la présente étude. 1. Préparation chirurgicale Rassemblez les instruments chirurgicaux nécessaires à l’intervention : germoir, cautérisation ophtalmologique, ciseaux microchirurgicaux, pinces à épiler…

Representative Results

Pour évaluer la faisabilité et la stabilité de cette méthode expérimentale, la même procédure a été effectuée sur dix souris, et des observations ont été faites concernant la mortalité, les changements dans la taille de la plaie, le poids corporel et l’analyse histologique. Les souris ont été euthanasiées le 7e jour. La procédure a montré un faible taux de mortalité. Le cautérier ophtalmologique et le germoir, représentés à la figure 1A-C<…

Discussion

Les chercheurs ont exploré divers matériaux, médicaments et nouvelles techniques pour traiter l’ONF 10,11,12,13,14,15,16,17. Grâce aux progrès des procédures chirurgicales, l’incidence et la récurrence de l’ONF ont été réduites. Cependant, e…

Materials

Germinator	Electron Microscopy Sciences	66118-20	Heating and disinfection equipment
Latex gloves	Allmed		or similar
Lights	Olympus	A1813
Meloxicam	MedChemExpress	HY-B0261	crushed; 5 mg/kg
Microsurgical instruments (scissors and tweezers)	Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.	M-Y-0087	Surgical instrument
Ophthalmologic cautery	Suqian Wenchong Medical Equipment Co.	1.00234E+13	Surgical instrument
Sterile cotton,	Yancheng Begu Technology Co.		or similar
Sterile metal foil	Biosharp		or similar
Sterile sheets	3M	XH003801129	or similar
Surgical drapes	Yancheng Begu Technology Co.		or similar
Syringes	Yancheng Begu Technology Co.	S-015301	or similar
Tape	Bkmamlab		or similar
Temperature maintenance device	Harvard Apparatus	LE-13-2104
Zoletil50	Virbac		80 mg/kg