Summary
يحدد هذا البروتوكول استخدام جهاز تسجيل وأقطاب كهربائية مصممة خصيصا لتسجيل إمكانات المجال المحلي والتحقيق في تدفق المعلومات في قرن آمون الفأر وقشرة الفص الجبهي.
Abstract
تقنية تسجيل إمكانات المجال المحلي (LFPs) هي طريقة فيزيولوجية كهربية تستخدم لقياس النشاط الكهربائي لمجموعات الخلايا العصبية الموضعية. إنه بمثابة أداة حاسمة في البحث المعرفي ، لا سيما في مناطق الدماغ مثل الحصين وقشرة الفص الجبهي. وتكتسي تسجيلات LFP المزدوجة بين هذه المناطق أهمية خاصة لأنها تسمح باستكشاف اتصالات الإشارات الأقاليمية. ومع ذلك ، نادرا ما يتم وصف طرق إجراء هذه التسجيلات ، ومعظم أجهزة التسجيل التجارية إما باهظة الثمن أو تفتقر إلى القدرة على التكيف لاستيعاب تصميمات تجريبية محددة. تقدم هذه الدراسة بروتوكولا شاملا لإجراء تسجيلات LFP ثنائية القطب في قرن آمون الفأر وقشرة الفص الجبهي للتحقيق في آثار الأدوية المضادة للذهان ومعدلات قناة البوتاسيوم على خصائص LFP في هذه المناطق. تتيح هذه التقنية قياس خصائص LFP ، بما في ذلك أطياف الطاقة داخل كل منطقة دماغية والتماسك بين الاثنين. بالإضافة إلى ذلك ، تم تطوير جهاز تسجيل منخفض التكلفة ومصمم خصيصا لهذه التجارب. باختصار ، يوفر هذا البروتوكول وسيلة لتسجيل الإشارات ذات نسب الإشارة إلى الضوضاء العالية في مناطق مختلفة من الدماغ ، مما يسهل التحقيق في اتصالات المعلومات بين الأقاليم داخل الدماغ.
Introduction
تشير إمكانات المجال المحلي (LFPs) إلى النشاط الكهربائي المسجل من الفضاء خارج الخلية ، مما يعكس النشاط الجماعي لمجموعة موضعية من الخلايا العصبية. وهي تظهر مجموعة متنوعة من الترددات ، تمتد من الموجات البطيئة عند 1 هرتز إلى التذبذبات السريعة عند 100 هرتز أو 200 هرتز. ارتبطت نطاقات تردد محددة بالوظائف المعرفية مثل التعلم والذاكرة واتخاذ القرار 1,2. تم استخدام التغييرات في خصائص LFP كمؤشرات حيوية لمختلف الاضطرابات العصبية ، بما في ذلك الخرف والفصام3،4. يمكن أن يقدم تحليل تسجيلات LFP رؤى قيمة حول الآليات المرضية الأساسية المرتبطة بهذه الحالات والاستراتيجيات العلاجية المحتملة.
تسجيل LFP المزدوج هو تقنية تستخدم لقياس النشاط الكهربائي الموضعي داخل وبين منطقتين محددتين من الدماغ. توفر هذه التقنية فرصة ثمينة للتحقيق في الديناميات العصبية المعقدة واتصالات الإشارات التي تحدث داخل وبين مناطق الدماغ المتميزة. كشفت الدراسات السابقة أن اكتشاف التغيرات في الخصائص العصبية لمناطق الدماغ الفردية يمكن أن يكون معقدا ، ولكن يمكن ملاحظة التغيرات في التواصل القشري بين الأقاليم 5,6. لذلك ، يوفر استخدام تسجيل LFP المزدوج وسيلة قوية لمعالجة هذه المشكلة.
يلعب اتصال الحصين والفص الجبهي دورا حاسما في تعديل الوظائف المعرفية ، وقد تم ربط الخلل الوظيفي باضطرابات عصبية مختلفة 7,8. يمكن أن توفر تسجيلات الأقطاب الكهربائية المزدوجة لهذه المناطق معلومات حول هذه التفاعلات. لسوء الحظ ، هناك معلومات محدودة متاحة حول طرق إجراء تسجيلات LFP ذات القطب المزدوج بين هذه المناطق. علاوة على ذلك ، فإن أجهزة التسجيل المتاحة تجاريا باهظة الثمن بشكل عام وتفتقر إلى القدرة على التكيف مع تصميمات تجريبية محددة. تتضمن الطريقة التقليدية لتسجيل LFPs استخدام كابل محمي لتوصيل جهاز التسجيل بأقطاب كهربائية مزروعة في دماغ. ومع ذلك ، فإن هذا النهج عرضة لآثار الحركة والضوضاء البيئية ، مما يؤثر على جودة وموثوقية الإشارات المسجلة.
يصف هذا البروتوكول إجراء شاملا لإجراء تسجيلات LFP ثنائية القطب في قرن آمون الفأر وقشرة الفص الجبهي ، باستخدام مقدمة منخفضة التكلفة مصممة خصيصا يمكن وضعها على رأس. تمكن هذه الطرق الباحثين من التحقيق في أنماط التذبذب الخاصة بالمنطقة داخل منطقتين دماغيتين منفصلتين واستكشاف تبادل المعلومات بين الأقاليم والاتصال بين هذه المناطق.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة فلوري لأخلاقيات (جامعة ملبورن ، رقم 22-025UM) وفقا للقانون الأسترالي لرعاية واستخدام للأغراض العلمية. تم استخدام C57BL / 6 ذكور الفئران (8 أسابيع) ، التي تم الحصول عليها من مركز الموارد الحيوانية (أستراليا) ، في هذه الدراسة.
1. تصميم وتصنيع الكواليس
ملاحظة: لوحة PCB الأمامية عبارة عن لوحة مدمجة رباعية الطبقات مقاس 14 مم × 12 مم مصممة لتوضع مباشرة على رأس. يستخدم شريحة مكبر صوت تجارية (انظر جدول المواد) ، وجميع ملفات التصميم و Gerber متاحة عبر الإنترنت (رابط GitHub: https://github.com/dechuansun/Intan-headstage/tree/main/pcbway).
- تقديم المواصفات التالية للشركة المصنعة: سمك اللوح: 0.6 مم ؛ الحد الأدنى للتتبع / التباعد: 4 مل ؛ الحد الأدنى لحجم الثقب: 0.2 مم.
- أثناء عملية تجميع ثنائي الفينيل متعدد الكلور ، اتبع هذا الترتيب:
- قم بلحام شريحة مكبر الصوت على اللوحة باستخدام مسدس الهواء الساخن المحدد على 350 درجة مئوية.
- لحام المكونات السلبية.
- قم بلحام موصل SPI وموصل القطب (انظر جدول المواد).
- افحص اللحام تحت المجهر لضمان الجودة. ثبت موصل SPI في مكانه باستخدام الإيبوكسي لمزيد من الثبات.
- استخدم برنامج تسجيل تابع لجهة خارجية ولوحة تحكم (انظر جدول المواد) للحصول على الإشارة. راجع دليل مستخدم البرنامج للحصول على إرشادات مفصلة.
- تدعم مرحلة الرأس المصممة 8 قنوات. في البرنامج ، قم بتمكين القنوات 8 و 9 و 12 و 13 و 20 و 21 و 22 و 23 للتسجيل.
2. تصنيع القطب
- قطع أسلاك التنغستن المطلية ب PFA (انظر جدول المواد) إلى أطوال محددة لأنواع الأقطاب المختلفة: قطب قشرة الفص الجبهي (12 مم) ، قطب الحصين (10 مم) ، والقطب الأرضي (6 مم).
- قطع الأنبوب النحاسي (انظر جدول المواد) إلى شرائح 3 مم.
- قم بإزالة 2 مم من الطلاء في نهاية كل سلك باستخدام أخف وزنا ، ثم قم بلحام سلك القطب بإحكام بالأنبوب النحاسي. يبلغ قطر الأنبوب النحاسي 0.45 مم وقطره الخارجي 0.60 مم.
- بالنسبة للقطب الأرضي ، قم بلحام برغي من الفولاذ المقاوم للصدأ M1.2 (انظر جدول المواد) بالقطب. ضع التدفق القائم على حمض الفوسفوريك على المسمار لتعزيز اللحام. بعد اللحام ، قم بتنظيف المسمار باستخدام الكحول.
ملاحظة: ارتد قفازات للحماية أثناء عملية اللحام.
3. الإجراء الجراحي
- تخدير الفأر في غرفة التخدير مع 3٪ إيزوفلوران و 1 لتر / دقيقة تدفق الأكسجين.
- ضع الماوس المخدر على وسادة تدفئة وقم بتثبيته في إطار مجسم (انظر جدول المواد).
- ضبط معدل صيانة الأيزوفلوران إلى 2.5-3٪ وتقليل تدفق الأكسجين إلى 500 مل / دقيقة. باستخدام قرصة إصبع القدم ، تحقق مما إذا كان لا يزال تحت التخدير العميق.
- حقن كاربروفين تحت الجلد بمعدل 0.5 ملغ/كغ وتطبيق مرهم العين لحماية العين.
- حلق وتعقيم رأس الفأر باستخدام البوفيدون اليود و 80 ٪ من الإيثانول.
- قم بعمل شق 8 مم على طول خط الوسط لفروة الرأس ، وإزالة النسيج الضام في منطقة الشق.
- ضع بيروكسيد الهيدروجين لتنظيف سطح الجمجمة ، مع الحرص على عدم لمس الجلد المحيط.
- قم بمحاذاة معالم bregma و lambda إلى نفس المستوى لوضع القطب بدقة (bregma و lambda هما المكان الذي يتقاطع فيه الخيط السهمي مع الغرز الإكليلية و lambdoid ).
- ثقوب للقطب الكهربي المرجعي/الأرضي، ومسامير التثبيت (نتوء الحفر 0.9 مم)، والأقطاب الكهربائية النشطة (نتوءات الحفر 0.3 مم) عند الإحداثيات المحددة.
- قم بتوصيل القطب الكهربائي المصنوع خصيصا (الخطوة 2) بذراع الإطار التجسيمي وتأكد من أنه عمودي على الدماغ.
- زرع القطب في منطقة الحصين CA1 (AP - 1.8 مم ، ML - 1.3 مم ، DV - 1.4 مم).
ملاحظة: AP ، الأمامي الخلفي ؛ ML ، متوسط الجانب. DV ، الظهرية البطنية. - كرر زرع القطب في قشرة الفص الجبهي (AP - 2.0 مم ، ML - 0.3 مم ، DV - 1.7 مم).
- قم بتأمين الأقطاب الكهربائية باستخدام مادة لاصقة قوية وأسمنت أسنان قوي متوفر تجاريا (انظر جدول المواد).
- قم بزرع اثنين من مسامير التثبيت مقاس 1.2 مم (AP - 1.8 مم ، ML -1.6 مم) لمنع الحركة.
- ضع القطب المرجعي / الأرضي على اتصال مباشر مع الأم الجافية ، 2 مم خلفي و 2 مم أحادي الجانب لمعلم لامدا.
- قم بتوصيل جانب الأنبوب النحاسي للأقطاب الكهربائية بموصل مقبس متعدد القنوات (انظر جدول المواد) مع وجود القطب الأرضي في المنتصف.
- استخدم أنابيب الانكماش الحراري 0.8 مم على السطح الخارجي للدبوس الأوسط للعزل.
- قم بتأمين الأقطاب الكهربائية ومسامير التثبيت والموصل بمادة لاصقة وأسمنت أسنان.
4. رعاية ما بعد الجراحة
- لتخفيف آلام ما بعد الجراحة ، يتم حقن كاربروفين بجرعة 5-10 مجم / كجم تحت الجلد كل 12-24 ساعة بناء على تقييم الألم لمدة ثلاثة أيام.
- تزويد بفترة نقاهة لمدة أسبوع قبل البدء في أي تسجيل أو إجراءات تجريبية.
5. إجراء التسجيل
- تعامل مع لمدة 15 دقيقة ، مرتين يوميا ، لمدة ثلاثة أيام متتالية.
- التقط الفئران عن طريق إغلاق اليد حولها برفق دون الضغط المفرط.
- ضع لوح الكواليس على رأس لمدة 30 دقيقة مرة واحدة يوميا لمدة ثلاثة أيام متتالية.
- في يوم التسجيل ، تأقلم مع غرفة التسجيل لمدة 30 دقيقة.
- ضع في غرفة تسجيل صغيرة داخل قفص فاراداي لتقليل التداخل الكهربائي الخارجي. قم بتوصيل المسرح المخصص للتسجيل.
- افتح برنامج التسجيل وحدد معدل أخذ عينات 2.00 كيلو هرتز. قم بتعطيل جميع القنوات باستثناء 13 و 20 عن طريق تحديد كل قناة والضغط على شريط المسافة.
- في نافذة النطاق الترددي للأجهزة ، اضبط النطاق الترددي السفلي على 2 هرتز وعرض النطاق الترددي العلوي على 100 هرتز.
- في نافذة تصفية البرامج ، اضبط مرشح الترددات المنخفضة على 100 هرتز ومرشح الترددات العالية على 2 هرتز.
- اختر مسار التخزين بالنقر فوق تحديد اسم الملف ، ثم انقر فوق تسجيل.
- ابدأ كل جلسة تسجيل بفترة تعود مدتها 10 دقائق متبوعة بتسجيل تخطيط كهربية الدماغ الأساسي لمدة 15 دقيقة.
- بعد التسجيل الأساسي، يتم تطبيق الدواء عن طريق الحقن داخل الصفاق والاستمرار في التسجيل لمدة 30 دقيقة إضافية دون تأخير.
ملاحظة: راجع قسم النتائج للحصول على تفاصيل حول الأدوية المستخدمة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
توضح النتائج الموضحة هنا تأثيرات العديد من الأدوية على خصائص إمكانات المجال المحلي (LFPs) التي تم اختبارها في أربع مجموعات من الفئران الذكور C57BL / 6 (ن = 8 لكل مجموعة ؛ العمر: 8 أسابيع ؛ الوزن: 24.0 ± 0.42 جم). تضمنت الأدوية التي تم اختبارها عقار كلوزابين المضاد للذهان ، ومعدلات قناة البوتاسيوم 4-أمينوبيريدين (4-AP) ، والريتيجابين ، بالإضافة إلى محلول ملحي لمركبة التحكم.
كما هو موضح في الشكل 1 ، تم وضع الماوس في غرفة تسجيل صغيرة وتم جمع LFPs من الحصين (HIP) وقشرة الفص الجبهي (PFC) باستخدام مسرح رأس مصمم خصيصا. وبما أن هذه الدراسة ركزت في المقام الأول على فحص نطاقي تردد ثيتا وغاما، فقد خضعت الإشارة المسجلة أولا لترشيح أولي لتمرير النطاق ضمن نطاق تردد يتراوح بين 2 و100 هرتز، تلاه أخذ العينات عند 2000 هرتز. ثم تم تقسيم الإشارة إلى عدة عصور 2 ثانية. تم تحديد أي عصور تعرض عناصر حركة واضحة واستبعدت لاحقا من عمليات التحليل اللاحقة. تم قياس أطياف القدرة ل LFPs في كل من HIP و PFC بالإضافة إلى تماسك HIP-PFC باستخدام طريقة تحليل متعددة الاستدقاق9. استخدم التحليل خمسة تناقص سليبيان ، وتم ضبط عرض النطاق الزمني على ثلاثة لتحقيق التركيز الطيفي الأمثل. واستخدمت نافذة منزلقة من 1 ثانية وحجم خطوة يبلغ 100 مللي ثانية لتوليد مخططات طيفية التردد الزمني والمسار الزمني لترابط HIP-PFC.
كما هو موضح في الشكل 2 والشكل 3 ، لم ينتج عن إعطاء المحلول الملحي أي تأثيرات ملحوظة على أطياف القدرة ل LFPs في HIP و PFC ، ولا تماسك HIP-PFC. أظهر كل من الريتيجابين والكلوزابين انخفاضا واضحا في طاقة نطاق جاما (30-100 هرتز) في HIP و PFC ، بالإضافة إلى تماسك نطاق جاما HIP-PFC. في المقابل ، أظهر 4-AP التأثيرات المعاكسة ، التي تتميز بقوة نطاق جاما المحسنة في HIP و PFC ، إلى جانب زيادة التماسك داخل نطاق جاما بين HIP و PFC.
الشكل 1: رسم تخطيطي للإعداد التجريبي. تم زرع أقطاب كهربائية في الحصين (HIP) وقشرة الفص الجبهي (PFC) لتسجيل إمكانات المجال المحلي. تم وضع في غرفة تسجيل صغيرة ، وتم إرفاق مقدمة مصممة خصيصا بموصل القطب. بدأت كل جلسة تسجيل بجلسة أساسية مدتها 10 دقائق ، تلتها جلسة مخدرات مدتها 30 دقيقة. تم اختبار آثار المياه المالحة ، كلوزابين ، 4-AP ، و retigabine. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: تأثير الأدوية المضادة للذهان ومعدلات قناة البوتاسيوم على النشاط الفيزيولوجي الكهربي المستمر في الحصين (HIP) وقشرة الفص الجبهي (PFC). أظهر المخطط الطيفي الطبيعي لإمكانات المجال المحلي في HIP و PFC ، جنبا إلى جنب مع تماسك HIP-PFC ، تأثيرات تعتمد على الوقت لجميع الأدوية المدروسة. تم إعطاء الأدوية عن طريق الحقن داخل الصفاق في الوقت t = 15 دقيقة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: تأثير الأدوية المضادة للذهان ومعدلات قناة البوتاسيوم على كثافة أطياف الطاقة في HIP و PFC. عزز 4-AP بشكل كبير قوة نطاق جاما في كلتا منطقتي الدماغ ، بينما قمع كلوزابين وريتيغابين قوة نطاق جاما في كلتا المنطقتين. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
يحدد البروتوكول المقدم هنا إجراءات بناء مرحلة رئيسية مخصصة مصممة خصيصا للتسجيل المتزامن لإمكانات المجال المحلي المزدوج (LFPs) في الحصين (HIP) وقشرة الفص الجبهي (PFC). توفر الخطوات التفصيلية الواردة في هذا البروتوكول معلومات كافية للباحثين لفحص اتصالات الإشارة بدقة داخل كل منطقة وبين HIP و PFC.
تستخدم المنصة الرئيسية المصممة خصيصا شريحة مكبر صوت تجارية. بينما يدعم التكوين الحالي تسجيل 8 قنوات ، يمكن تكييف المسرح الرئيسي بسهولة لاستيعاب السعة الكاملة المكونة من 32 قناة ، وبالتالي توفير إمكانية توسيع سعة القناة المناسبة لتسجيل صفيف الأقطاب الكهربائية. بالنظر إلى التكلفة المنخفضة للمسرح ، فإن أحد الخيارات هو تثبيت اللوحة بشكل دائم على رأس. يوفر هذا النهج ميزة تقليل آثار الحركة وتقليل المستوى العام للاضطراب الناجم عن الحركة.
يوضح القطب المصنوع حسب الطلب تسجيلا مستقرا طويل الأجل ل LFPs ، مما يحافظ على جودة إشارة جيدة على مدى 3-5 أشهر. نهج آخر قابل للتطبيق ينطوي على استخدام لوحات الدوائر المرنة القائمة على البوليميد كمصفوفات الأقطاب الكهربائية10,11. يمكن دمج لوحات الدوائر المرنة هذه مع مرحلة التسجيل الأمامية لتمكين التسجيل متعدد القنوات. توفر هذه الطريقة ميزة تبسيط إعداد القطب الكهربائي والإجراءات الجراحية. وزن الغرسة مع وبدون مرحلة الرأس خفيف جدا ، عند 0.198 جم و 0.812 جم على التوالي ، مما يجعلها مناسبة للفئران الصغيرة جدا.
أحد قيود تقنية التسجيل الحالية هو التداخل المحتمل الناجم عن الكابل المعلق ، والذي قد يتداخل مع السلوك الطبيعي للحيوان أثناء التجارب. لمعالجة هذه المشكلة ، يمكن النظر في حلول بديلة مثل استخدام بطاقة SD لتخزين البيانات أو تنفيذ وحدة إرسال إشارة لاسلكية.
تتضمن الخطوة الأساسية والحاسمة للبروتوكول تحديد المواقع بدقة للقطب الكهربائي. من الأهمية بمكان ضمان وضع القطب الكهربائي بدقة واتساق لتمكين المقارنة عبر التجارب. للتحقق من موقع القطب ، يجب إجراء الأنسجة12. من التقنيات المفيدة لتحسين وضع القطب الصحيح في HPC التسجيل أثناء إدخال القطب عموديا ، حيث تشير إيقاعات ثيتا القوية وإطلاق الخلايا العصبية إلى الموضع الصحيح. ينصح باستخدام الفئران البالغة التي يزيد عمرها عن 8 أسابيع ، حيث قد تنخفض جودة الإشارة بمرور الوقت أو تؤدي إلى وضع غير صحيح مع تقدم عمر الفئران. سيساعد أخذ هذه الاعتبارات في الاعتبار في الحفاظ على موثوقية وصحة النتائج التجريبية.
في الختام ، يوفر البروتوكول المقدم في هذه المقالة إطارا لدراسة اتصال الإشارة بين مناطق الدماغ المتميزة. إنه يمكن الباحثين من استكشاف الديناميات العصبية والتفاعلات داخل هذه المناطق وفيما بينها.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
Acknowledgments
تم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة علم الأعصاب في مستشفى ملبورن الملكي (A2087).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Brass tube | Albion Alloys, USA | Inside diameter of 0.45 mm | |
| Carprofen | Rimadyl, Pfizer Animal Health | ||
| Commercial amplifier chip | Intantech | RHD 2132 | |
| Control board | Intantech | RHD recording system | |
| Dental cement | Paladur | ||
| Heat shrinks | Panduit | 0.8 mm diameter | |
| M1.2 stainless steel screw | Watch tools | Clock and watch screw | |
| Multichannel socket connector | Harwin, AU | 1.27 mm pitch, PCB socket | |
| PFA-coated tungsten wires | A-M SYSTEMS, USA | Inside diameter of 150 µm | |
| Phosphoric acid-based flux | Chip Quik | CQ4LF-0.5 | |
| Recording software | Intantech | RHX recording software | |
| Stereotactic Frame | World Precision Instruments | Mouse stereotactic instrument | |
| Super glue | UHU | Ultra fast |
References
- Einevoll, G. T., Kayser, C., Logothetis, N. K., Panzeri, S. Modelling and analysis of local field potentials for studying the function of cortical circuits. Nat Rev Neurosci. 14 (11), 770-785 (2013).
- Buzsaki, G., Anastassiou, C. A., Koch, C. The origin of extracellular fields and currents-EEG, ECOG, LFP and spikes. Nat Rev Neurosci. 13 (6), 407-420 (2012).
- Sigurdsson, T., Stark, K. L., Karayiorgou, M., Gogos, J. A., Gordon, J. A. Impaired hippocampal-prefrontal synchrony in a genetic mouse model of schizophrenia. Nature. 464 (7289), 763-767 (2010).
- Witton, J., et al. Disrupted hippocampal sharp-wave ripple-associated spike dynamics in a transgenic mouse model of dementia. J Physiol. 594 (16), 4615-4630 (2016).
- Englot, D. J., Konrad, P. E., Morgan, V. L. Regional and global connectivity disturbances in focal epilepsy, related neurocognitive sequelae, and potential mechanistic underpinnings. Epilepsia. 57 (10), 1546-1557 (2016).
- Pievani, M., De Haan, W., Wu, T., Seeley, W. W., Frisoni, G. B. Functional network disruption in the degenerative dementias. Lancet Neurol. 10 (9), 829-843 (2011).
- Sigurdsson, T., Duvarci, S. Hippocampal-prefrontal interactions in cognition, behavior and psychiatric disease. Front Syst Neurosci. 9, 190 (2015).
- Sun, D., et al. Effects of antipsychotic drugs and potassium channel modulators on spectral properties of local field potentials in mouse hippocampus and pre-frontal cortex. Neuropharmacology. 191, 108572 (2021).
- Bokil, H., Andrews, P., Kulkarni, J. E., Mehta, S., Mitra, P. P. Chronux: A platform for analyzing neural signals. J Neurosci Methods. 192 (1), 146-151 (2010).
- Bozkurt, A., Lal, A. Low-cost flexible printed circuit technology based microelectrode array for extracellular stimulation of the invertebrate locomotory system. Sens Actuator A Phys. 169 (1), 89-97 (2011).
- Du, P., et al. High-resolution mapping of in vivo gastrointestinal slow wave activity using flexible printed circuit board electrodes: Methodology and validation. Ann Biomed Eng. 37, 839-846 (2009).
- JoVE Science Education Database. Neuroscience. Histological Staining of Neural Tissue. JoVE. , (2023).
