Summary
यह प्रोटोकॉल माउस ऑर्थोटोपिक यकृत प्रत्यारोपण में कफ तकनीक का उपयोग करके पोत पुनर्निर्माण के लिए तकनीकी जानकारी प्रदान करता है।
Abstract
माउस ऑर्थोटोपिक यकृत प्रत्यारोपण यकृत इस्किमिया और रीपरफ्यूजन चोट के अंतर्निहित तंत्र की जांच के लिए एक प्रभावी पद्धति है। हालांकि, तकनीकी चुनौतियां इस मूल्यवान प्रयोगात्मक मॉडल का उपयोग करने और इन कौशलों को अगली पीढ़ी तक पहुंचाने में बाधा उत्पन्न करती हैं। इस प्रक्रिया का सबसे चुनौतीपूर्ण पहलू संवहनी पुनर्निर्माण है, जिसमें पोर्टल शिरा (पीवी), इन्फ्राहेपेटिक अवर वेना कावा (आईएचआईवीसी), और सुप्राहेपेटिक अवर वेना कावा शामिल हैं। टांके के बजाय प्लास्टिक कफ का उपयोग, चिकनी पीवी और आईएचआईवीसी पुनर्निर्माण की अनुमति देता है। वेसल्स को एक अंतःशिरा कैथेटर से बने कफ को ग्राफ्ट पोत की नोक पर संलग्न करके और प्राप्तकर्ता पोत में कफ को इंटरपोज करके पुनर्निर्माण किया जाता है। दो सबसे महत्वपूर्ण पहलू पोत के आंतरिक लुमेन को ठीक से देख रहे हैं और अत्यधिक बल के उपयोग से बच रहे हैं। हमारा उद्देश्य प्राप्तकर्ता सर्जरी में कफ तकनीक का उपयोग करके संवहनी पुनर्निर्माण का तकनीकी अवलोकन प्रदान करना है। कफ तकनीक के लिए इन तकनीकी युक्तियों से माइक्रोसर्जनों को संवहनी पुनर्निर्माण की सुविधा और उनके शोध को आगे बढ़ाने में मदद मिलने की उम्मीद है।
Introduction
माउस ऑर्थोटोपिक यकृत प्रत्यारोपण (एमओएलटी) एक प्रभावी प्रयोगात्मक विधि है जिसे पहली बार 1991 में रिपोर्ट किया गयाथा। यह प्रयोगात्मक मॉडल, जो आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों और विभिन्न अनुसंधान अभिकर्मकों का उपयोग करता है, ने गर्म और ठंडे इस्किमिया और रीपरफ्यूजन चोटों की जांच में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है। हालांकि, मॉडल की उच्च तकनीकी जटिलता ने यकृत प्रत्यारोपण2 के लिए बुनियादी दवा के विकास में बाधा उत्पन्न की है। एमओएलटी में तीन प्रमुख चरण शामिल हैं: (1) दाता माउस से यकृत की पुनर्प्राप्ति, (2) बैक टेबल सर्जरी, और (3) प्राप्तकर्ता में यकृत का प्रत्यारोपण। इन प्राप्तकर्ता प्रक्रियाओं में, संवहनी एनास्टोमोसिस सबसे बड़ी चुनौती है। जबकि सुप्राहेपेटिक अवर वेना कावा एनास्टोमोसिस आमतौर पर हाथ से सिलाई2 द्वारा पूरा किया जाता है, इन्फ्राहेपेटिक अवर वेना कावा (IHIVC) और पोर्टल शिरा (पीवी) को हाथ से सिलने वाले टांके के स्थान पर प्लास्टिक कफ का उपयोग करके अधिक कुशलता से पुनर्निर्माण किया जा सकता है।
एनहेपेटिक अवधि प्राप्तकर्ता के मूल यकृत को हटाने और ग्राफ्ट आरोपण के बीच अंतराल को दर्शाती है। लगातार परिणाम सुनिश्चित करने के लिए, 20 मिनट से कम समय तक एनीपेटिक समय को सीमित करना अनिवार्य है। नतीजतन, इस मॉडल को नियोजित अध्ययन विशिष्ट संस्थानों 3,4,5,6,7,8,9 तक ही सीमित कर दिया गया है। एमओएलटी के विभिन्न चरणों में, चिकनी पीवी और आईएचआईवीसी पुनर्निर्माण प्राप्त करना एनाहेपेटिक समय को कम करने और सफल प्रत्यारोपण सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है।
पीवी और आईवीसी पुनर्निर्माण आम तौर पर संवहनी कफ का उपयोग करके किया जाता है क्योंकि कफ तकनीक हाथ से सिलनाटांके 2,5,8की तुलना में संवहनी एनास्टोमोसिस को सरल करती है। संवहनी कफ की तैयारी और कफ के सुरक्षित लगाव में शामिल तकनीक प्राप्तकर्ता संवहनी पुनर्निर्माण की जटिलता को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करती है। हमारा उद्देश्य कफ विधि से संबंधित कई तकनीकी युक्तियों के लिए विस्तृत दृश्य मार्गदर्शन प्रदान करना है, जिससे सीखने की अवस्था कम हो जाती है। ये वीडियो क्लिप जहाजों को कफ संलग्न करने और प्राप्तकर्ता सर्जरी के दौरान पीवी और आईएचआईवीसी का पुनर्निर्माण करने की स्पष्ट समझ प्रदान करेंगे।
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Protocol
प्रायोगिक प्रोटोकॉल क्योटो विश्वविद्यालय में पशु प्रयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था. अध्ययन में C57BL/6 चूहों का उपयोग किया गया, जिनकी आयु 10 सप्ताह से अधिक थी और जिनका वजन 25 ग्राम और 30 ग्राम के बीच था, जो एक वाणिज्यिक स्रोत से प्राप्त किया गया था ( सामग्री की तालिकादेखें)। सभी जानवरों को 2.5% आइसोफ्लुरेन (संस्थागत रूप से अनुमोदित प्रोटोकॉल के बाद) के साथ संवेदनाहारी किया गया था, विशिष्ट रोगज़नक़ मुक्त परिस्थितियों में बनाए रखा गया था, और सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं को पशु प्रयोग पर क्योटो विश्वविद्यालय के विनियमों के अनुपालन में आयोजित किया गया था। अध्ययन के लिए उपयोग किए जाने वाले उपयुक्त उपकरण सामग्री की तालिका में सूचीबद्ध हैं और चित्र 1 और चित्र 2 में दर्शाए गए हैं।
1. पशु चयन
- 25-30 ग्राम के शरीर के वजन के साथ चूहों का प्रयोग करें।
नोट: जबकि माउस जिगर allografts2 आम तौर पर प्रमुख histocompatibility जटिल बाधा भर में स्वीकार किए जाते हैं, हम ठंड ischemia reperfusion चोट10 के विस्तृत तंत्र पर ध्यान केंद्रित करने के लिए इस अध्ययन में syngeneic MOLT मॉडल के लिए चुना. 25 ग्राम से कम वजन वाले चूहों की सिफारिश नहीं की जाती है क्योंकि पतली पित्त नली में आंतरिक स्टेंट डालना असंभव है। इसी तरह, जहाजों के चारों ओर बड़ी मात्रा में इंट्राएब्डोमिनल वसा की उपस्थिति के कारण 30 ग्राम से अधिक वजन वाले चूहों की सिफारिश नहीं की जाती है।
2. कफ बनाना
- पीवी और आईएचआईवीसी के लिए क्रमशः 20 जी और 16 जी अंतःशिरा कैथेटर तैयार करें।
- एक स्केलपेल का प्रयोग, कफ बनाने के लिए कैथेटर में कटौती. कफ के मुख्य शरीर को लंबाई में 2 मिमी मापना चाहिए, जिसमें 1 मिमी(चित्रा 3ए)का विस्तार हैंडल होना चाहिए।
नोट: यदि हैंडल बहुत बड़ा है, तो कफ डालना चुनौतीपूर्ण हो सकता है। - कफ की सतह पर, स्केलपेल ब्लेड के पीछे का उपयोग करके धागा निर्धारण के लिए एक उथले नाली बनाएं।
नोट: कफ के लिए स्केलपेल ब्लेड के पीछे लागू करते समय, सुनिश्चित करें कि ब्लेड की नोक लगभग 60 डिग्री के कोण पर है (जैसा कि चित्र 3 बी में दिखाया गया है)। पहली नाली बनाने के बाद, स्केलपेल ब्लेड को सुरक्षित करें और कफ को घुमाएं। आदर्श रूप से, दो खांचे की सिफारिश की जाती है, लेकिन एक एकल नाली बिना किसी समस्या के पर्याप्त हो सकती है।
3. कफ लगाव
- एक प्लास्टिक आयताकार आकार के कंटेनर में, छोटे बर्फ के टुकड़े रखें और शीर्ष पर एक छोटा धातु कप (व्यास में 6 सेमी) रखें। कप को अंग संरक्षण तरल पदार्थ से भरें ( सामग्री की तालिकादेखें) और भीतर सिन्जेनिक ग्राफ्ट रखें।
- धीरे से एक कपास झाड़ू का उपयोग करके सिंजेनिक लीवर ग्राफ्ट (किसी अन्य दाता माउस से निकाला गया) को रोल करें, यह सुनिश्चित करते हुए कि पोर्टा हेपेटिस ऊपर की ओर है। अंग संरक्षण तरल पदार्थ के साथ आईवीसी के लुमेन में संग्रहीत किसी भी रक्त को अच्छी तरह से हटा दें।
- संलग्न धागे का उपयोग करके कफ के माध्यम से पीवी को थ्रेड करें, उदाहरण के लिए, प्लीहा नस के लिए ( चित्रा 4 ए देखें)।
- 12 बजे की स्थिति में कफ हैंडल के साथ, बुलडॉग क्लैंप ( सामग्री की तालिकादेखें) के साथ हैंडल और कफ दोनों को सुरक्षित करें, इसे पीवी किनारे से 2 से 3 मिमी की स्थिति दें।
- बुलडॉग क्लैंप को आगे बड़े संवहनी संदंश और ऑपरेटिव क्षेत्र स्थापित करने के लिए एक निर्धारण मोल्ड का उपयोग करके सुरक्षित करें ( चित्र 4बी देखें)।
- लगभग 15 से 20x आवर्धन पर पीवी लुमेन का सावधानीपूर्वक निरीक्षण करें। यदि आवश्यक हो, तो टपकता पानी लुमेन की दृश्यता बढ़ा सकता है।
- धीरे पीवी लुमेन को समझें और इसे कफ के माध्यम से बाहरी करें।
- एक बार पूरी तरह से बाहरी हो जाने पर, इसे 8-0 का उपयोग करके डबल बंधाव के साथ सुरक्षित करें कफ के खांचे के साथ रेशम का धागा (चित्र 4सी, डी)।
नोट: सुनिश्चित करें कि संयुक्ताक्षर ढीला नहीं है। इसके अलावा, ध्यान रखें कि संयुक्ताक्षर बिंदु बहुत बड़ा नहीं है, क्योंकि यह कफ सम्मिलन में हस्तक्षेप कर सकता है। संयुक्ताक्षर बिंदु को किसी भी दिशा में रखा जा सकता है। - पीवी (चित्रा 4ई) के लिए इस्तेमाल की जाने वाली प्रक्रिया के समान प्रक्रिया का उपयोग करके आईएचआईवीसी को कफ संलग्न करें।
नोट: कफ के साथ IHIVC को जकड़ते समय, यकृत पैरेन्काइमा में काटने से बचें। चूंकि गर्दन पीवी से छोटी है, इसलिए क्लैंपिंग स्थिति को ध्यान से निर्धारित करें। - IHIVC के आधार के चारों ओर थ्रेड पास करके एक स्लिपनॉट बनाएं ताकि IHIVC (चित्र 5) को अस्थायी रूप से लायगेट किया जा सके। यह धागा reperfusion के बाद हटा दिया जाएगा.
4. पोर्टल नस पुनर्निर्माण
- 2.5% पर isoflurane के साथ संज्ञाहरण उत्प्रेरण द्वारा प्राप्तकर्ता माउस संवेदनाहारी औरप्रकाशित साहित्य 2 में वर्णित के रूप में देशी जिगर निकालने से पहले 0.6% करने के लिए इसे कम. लैपरोटॉमी से पहले आयोडोफोर और 70% इथेनॉल के वैकल्पिक दौर के साथ शल्य चिकित्सा क्षेत्र को कम से कम तीन बार कीटाणुरहित करें।
- सुनिश्चित करें कि यकृत लोब ठीक से स्थित है और कफ पीवी किंकिंग और मरोड़ से मुक्त है।
- धीरे प्राप्तकर्ता के पीवी किनारे पीन संदंश का उपयोग समझ और यह एक शिकंजा के साथ सुरक्षित.
नोट: इस आलेख में, एक वाइस एक यांत्रिक उपकरण मेज पर पीन संदंश सुरक्षित करने के लिए इस्तेमाल को संदर्भित करता है. विस के बारे में अधिक जानकारी के लिए, सामग्री की तालिकादेखें। - प्राप्तकर्ता के पीवी पर एक संवहनी क्लैंप लागू करें और 8-0 पास करें इसके चारों ओर रेशम का धागा।
- पीवी किनारे(चित्रा 6ए)से लगभग 0.5 मिमी एक 1/4 परिधि खंड बनाएं। एक विशेष उपकरण (टिप के साथ एक 27 जी सुई काट दिया और एक एल आकार में तुला के साथ एक 27 जी सुई) का उपयोग कर लुमेन के माध्यम से खारा समाधान गुजर जबकि छेद बढ़ाना.
- कफ संभाल पकड़ और लुमेन में डालने के लिए सीधे संदंश का प्रयोग करें.
- एक बार पूरी तरह से डालने के बाद, कफ को 8-0 से सुरक्षित करें रेशम का धागा। निर्धारण के लिए एक एकल बंधाव पर्याप्त है।
- संवहनी क्लैंप निकालें और यकृत को फिर से चालू करें।
- ध्यान से पीन संदंश जारी और पोर्टल नस पुनर्निर्माण को पूरा. पूरे पीवी पुनर्निर्माण प्रक्रिया में लगभग 5 मिनट लगने चाहिए।
5. इन्फ्राहेपेटिक अवर वेना कावा पुनर्निर्माण
- जिगर पालि उचित स्थिति और प्राप्तकर्ता IHIVC पृष्ठीय ग्राफ्ट के सही निचले पालि से जुड़े पीन संदंश कदम, यह एक शिकंजा के साथ सुरक्षित.
- प्राप्तकर्ता के IVIHC के आसपास किसी भी शेष जिगर ऊतक को धीरे से एक कपास झाड़ू के साथ रगड़कर हटा दें।
- 8-0 से पास करें प्राप्तकर्ता के आईवीआईएचसी के चारों ओर रेशम का धागा।
- प्राप्तकर्ता के आईवीआईएचसी किनारे(चित्रा 6बी)से लगभग 0.5 मिमी पर 1/4 परिधि खंड बनाएं।
- लुमेन में सामान्य खारा समाधान पेश करने के बाद, कफ को लुमेन में डालें।
नोट: छोटी गर्दन के कारण, कफ को अक्सर पीवी की तुलना में अधिक उथले रूप से डाला जाता है। - कफ को 8-0 से सावधानी से सुरक्षित करें रेशम धागा और फिर संवहनी दबाना और पीन संदंश को हटा दें।
6. पश्चात की देखभाल
- पश्चात की वसूली की सुविधा के लिए एक हीटिंग पैड और वार्मिंग लैंप का उपयोग करें।
- रक्तचाप, हृदय गति, श्वसन दर, शरीर के तापमान के साथ-साथ भोजन और पानी की खपत की लगातार निगरानी करें।
- पोस्टऑपरेटिव दर्द को कम करने के लिए कार्प्रोफेन का व्यवस्थापक चमड़े के नीचे इंजेक्शन (5 मिलीग्राम / स्थानीय संस्थागत दिशानिर्देशों का पालन करें।
नोट: यदि चूहों की हालत बिगड़ती है, प्रयोग तुरंत बंद कर दिया जाएगा और चूहों कार्बन डाइऑक्साइड की साँस लेना द्वारा इच्छामृत्यु थे. - ऊतक का नमूना एकत्र करने के लिए, चूहों को फिर से संवेदनाहारी करें और उन्हें IACUC अनुमोदित विधि द्वारा इच्छामृत्यु दें।
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Representative Results
पीवी पुनर्निर्माण सफल होता है, जब पोर्टल शिरा को खोलने पर, कोई यातना नहीं होती है, और यकृत समान रूप से सुगंधित होता है। एनीपेटिक समय 20 मिनट से कम होना चाहिए, क्योंकि 25 मिनट से अधिक एहेपेटिक बार माउस मृत्यु दर का खतरा बढ़ जाता है। IHIVC पुनर्निर्माण सफल माना जाता है अगर वहाँ भ्रष्टाचार से कोई रक्त regurgitation है.
अंग संरक्षण समाधान का उपयोग करके 1 घंटे के लिए ठंडे तापमान पर ग्राफ्ट को स्टोर करने से रीपरफ्यूजन(चित्रा 7ए)के बाद 6 घंटे में लगभग 2,000 यू/एल का सीरम एलानिन एमिनोट्रांसफरेज़ स्तर होता है। प्रत्यारोपण के बाद 7 दिनों में जीवित रहने की दर 100% है (चित्र 7बी)। हालांकि, यकृत धमनी एनास्टोमोसिस के बिना हमारे मॉडल में, प्राप्तकर्ता चूहों को प्रत्यारोपण के लगभग 30 दिनों के बाद इंट्राहेपेटिक बिलोमा से संबंधित मुद्दों का शिकार हो सकता है
चित्रा 1: संवहनी पुनर्निर्माण के लिए उपकरण। सीधे या घुमावदार संदंश स्थिति और ऑपरेटिव क्षेत्र के लिए आवश्यक के रूप में उपयोग किया जाता है. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 2: माइक्रोस्कोप। माइक्रोस्कोप 10x आवर्धन के साथ एक उद्देश्य लेंस और कम से कम 0.8x आवर्धन के साथ एक ऐपिस लेंस से लैस है। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 3: कफ की तैयारी। (ए) पीवी और आईएचआईवीसी के लिए कफ। (बी) कफ पर एक नाली बनाने की प्रक्रिया का एक योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 4: कफ लगाव। (ए) पीवी से जुड़ा धागा कफ में पारित किया जाता है। (बी) कफ लगाव के लिए उपकरण सेटअप। (सी) 8-0 के साथ कफ को सुरक्षित करना रेशम बंधाव। (डी) कफ के लिए संवहनी बाह्यकरण और निर्धारण का योजनाबद्ध चित्रण। (ई) पूरा कफ लगाव। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 5: IHIVC रूट का अस्थायी बंधाव। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 6: संवहनी पुनर्निर्माण। यह उदाहरण (ए) पीवी और (बी) आईएचआईवीसी के लिए छेद बनाने के लिए स्थानों को दिखाता है। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 7: पश्चात परिणाम। (ए) reperfusion के बाद 6 घंटे पर alanine aminotransferase (ALT) के सीरम स्तर. सीआईटी, ठंडा इस्केमिक समय; Tx, प्रत्यारोपण। पी < 0.0001। (बी) एमओएलटी के बाद प्राप्तकर्ता का अस्तित्व। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
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Discussion
संवहनी पुनर्निर्माण सीखना सफल एमओएलटी प्राप्त करने का सबसे चुनौतीपूर्ण पहलू है। कफ की गुणवत्ता काफी पुनर्निर्माण की कठिनाई को प्रभावित करती है, चूहों 5 के छोटे आकार को देखतेहुए. यह आलेख कफ तैयारी, लगाव और पुनर्निर्माण के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करता है।
जबकि कफ तैयारी और कनेक्शन 2,5 के बारे में पिछली रिपोर्टों से कोई बड़ा अंतर नहीं है, कुछ मामूली बिंदुओं पर विचार किया जाना चाहिए। सबसे पहले, कफ हैंडल की मोटाई कुल परिधि के लगभग 1/6 तक सीमित होनी चाहिए। यदि यह बहुत पतला है, तो हैंडल आसानी से झुक सकता है और पकड़ना मुश्किल हो सकता है। यदि यह बहुत मोटा है, तो प्राप्तकर्ता के पेट में संभालना चुनौतीपूर्ण हो सकता है। अपनी व्यक्तिगत पसंद को जल्दी पहचानना आवश्यक है।
दूसरा, पीछे की मेज पर लुमेन की दृश्यता महत्वपूर्ण है। एक 10-0 नायलॉन धागे का उपयोग किया जाता है, जो पीवी लुमेन की पुष्टि करने के लिए एक मील का पत्थर के रूप में दाता की प्लीहा नस से जुड़ा होता है। अत्यधिक घुमा को रोकने के लिए नायलॉन के धागे को 8 बजे रखा जाता है। पोत की दीवार को 3 बजे और 9 बजे दो संदंश के साथ पकड़कर और 6 बजे कफ की दीवार के खिलाफ दबाकर बाहरी किया जाता है। 8-0 के साथ फिक्सेशन रेशम के धागे को सावधानीपूर्वक आंदोलनों की आवश्यकता होती है। खांचे में इसे सुरक्षित करके पर्याप्त निर्धारण प्राप्त किया जाता है। अटैचमेंट के बाद, यह पुष्टि करने के लिए कफ उठाएं कि यह बंद नहीं हुआ है।
तीसरा, पुनर्निर्माण के दौरान, प्राप्तकर्ता पोत में बहुत बड़ा छेद नहीं बनाना महत्वपूर्ण है क्योंकि कफ डालने पर छेद स्वाभाविक रूप से बढ़ जाता है। एक बड़ा छेद बनाने से पोत विभाजन हो सकता है, विफलता का सबसे आम कारण। विशेष रूप से IHIVC पुनर्निर्माण में, छोटे छेद बनाए जाने चाहिए क्योंकि IHIVC की छोटी लंबाई पीवी की तुलना में बाहर निकालना आसान बनाती है। लुमेन के माध्यम से खारा समाधान पारित करते समय, नीचे की बजाय ऊपर की ओर बल लागू करके कफ सम्मिलन का समर्थन करें।
विफलता और सावधानियों के सामान्य कारणों पर विस्तार से चर्चा की गई है। सबसे महत्वपूर्ण बिंदुओं में आंतरिक पोत लुमेन के स्पष्ट दृश्य को सुनिश्चित करना और पोत विभाजन को रोकने के लिए कफ सम्मिलन के दौरान अनावश्यक बल से बचना शामिल है। कफ विधि के लिए इन तकनीकी युक्तियों को कौशल और अग्रिम अनुसंधान को बढ़ाने के लिए माना जाता है।
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Disclosures
किसी भी लेखक के पास खुलासा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।
Acknowledgments
इस काम को 2022 JST बेसिक रिसर्च (द जापानी सोसाइटी फॉर ट्रांसप्लांटेशन) द्वारा समर्थित किया गया था।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 16 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF2032 | IHIVC cuff |
| 20 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF1651 | PV cuff |
| 8-0 braid silk | Natsume Seisakusho | CR9-80B2 | 8-0 silk |
| Belzer UW Cold Storage Solution | Astellas | Organ preservation fluid | |
| Bulldog clamp | B BRAUN | FB329R | Bulldog clamp |
| C57BL/6 mice | Oriental Bio Service | ||
| Isoflurane inhalation solution | Viatris | Anesthesic | |
| Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm | F.S.T | 11253-20 | Straight microforceps |
| Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock | F.S.T | 18056-14 | Vessel clip applicator |
| Micro Serrefines | F.S.T | 18055-4 | Vessel clip |
| No.11 Spare Blades | FEATHER Safety Razor | 11 | Blades |
| Ophthalmic scissor, round handle | B BRAUN | FD103R | Microscissor |
| Plastic rectangular-shaped container | Daiso | 10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high | |
| SuperGrip Tips | F.S.T | 00649-11 | Curved microforceps |
| SZX7 | Olympus | SZX7 | Microscope |
| Vise | Niigataseiki | 00505351 | A mechanical tool to secure Pean forceps on the table |
References
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