Summary

טיטרציה של נגיפי קורונה האדם שימוש Assay אימונו

Published: April 28, 2008
doi:

Summary

בסרטון הזה, אנחנו מראים שיטה חלופית לזיהוי titering של וירוסים באמצעות זיהוי אנטיגן האנזימטית טכניקה המכונה assay אימונו. כאן, אנו יראה לכם כיצד לאסוף דגימות ויראליות שלך, להכין את התאים לבדיקה, ולבסוף assay באמצעות אימונו דילולים סדרתי כדי לקבוע את titer ויראלי.

Abstract

חישוב titers ויראלית מדבקת מייצג גישה ניסויית בסיסי וחיוני וירולוגים. מבחני פלאק קלאסית אינו יכול לשמש לאיתור וירוסים שלא לגרום לתופעות cytopathic משמעותי, אשר במקרה של זנים 229E ו OC43 של קורונה האנושי (HCoV). Assay חלופה אימונו עקיף (IPA) מתואר במסמך לאיתור טיטרציה של וירוסים אלה. תאים רגישים הם מחוסן עם דילולים לוגריתמי הסידורי של דגימות צלחת 96-היטב. לאחר צמיחה ויראלי, זיהוי נגיפי ידי IPA התשואות titer וירוס מדבק, כפי שבאה לידי ביטוי "מנה רקמות תרבות זיהומיות" (TCID50). זה מייצג את הדילול של מדגם המכיל וירוסים בו חצי שורה של בארות מעבדה להכיל וירוס שכפול. טכניקה זו שיטה אמינה עבור טיטרציה של HCoV דגימות ביולוגיות (תאים, רקמות או נוזלי).

Protocol

פרוטוקול טקסט מלא לגישה זו ניסיוני זמין הפרוטוקולים שפרינגר .

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Play Video

Cite This Article
Lambert, F., Jacomy, H., Marceau, G., J. Talbot, P. Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. J. Vis. Exp. (14), e751, doi:10.3791/751 (2008).

View Video