Summary

Le modèle encéphalopathie hypoxique ischémique de l'ischémie périnatale

Published: November 19, 2008
doi:

Summary

Le modèle de rat postnatal pour une lésion cérébrale hypoxique-ischémique est un modèle bien établi de ressources humaines encéphalopathie néonatale hypoxique-ischémique (EHI). Dans cet article, nous décrivons le modèle de la HIE chez les bébés rats post-natale.

Abstract

Encéphalopathie hypoxique-ischémique (EHI) est la conséquence d'une asphyxie systémiques survenant à la naissance. Vingt cinq pour cent des nouveau-nés avec EHI développer des graves et permanents séquelles neuropsychologiques, notamment un retard mental, paralysie cérébrale, et l'épilepsie. Les résultats de l'EHI sont dévastatrices et permanentes, ce qui rend essentiel d'identifier et de développer des stratégies thérapeutiques visant à réduire les lésions cérébrales du nouveau-né avec HIE. À cette fin, le modèle du rat nouveau-né pour les lésions cérébrales hypoxiques-ischémiques a été développé pour modéliser cette condition humaine. Le modèle a d'abord été HIE validée par Vannucci et al 1 et a depuis été largement utilisée pour identifier les mécanismes de lésions cérébrales résultant d'hypoxie-ischémie périnatale 2 et de tester le potentiel des interventions thérapeutiques 3,4. Le modèle HIE est un processus en deux étapes et implique la ligature de l'artère carotide commune gauche suivie d'une exposition à un environnement hypoxique. Le débit sanguin cérébral (CBF) dans l'hémisphère ipsilatéral à l'artère carotide ligaturée ne diminue pas à cause de la circulation collatérale via le cercle de Willis, mais avec une tension en oxygène plus faible, la CBF dans l'hémisphère ipsilatéral diminue de manière significative et les résultats dans les lésions ischémiques unilatérale . L'utilisation de 2,3,5-chlorure de triphényltétrazolium (TTC) à la tache et d'identifier le tissu cérébral ischémique a été initialement développé pour les modèles adultes de l'ischémie cérébrale chez les rongeurs 5, et est utilisé pour évaluer l'étendue de infarctin cérébrale à des moments au début jusqu'à 72 heures après l'événement ischémique 6. Dans cette vidéo, nous démontrons le modèle de lésion hypoxique-ischémique dans le cerveau de rat postnatal et l'évaluation de la taille de l'infarctus utilisant une coloration TTC.

Protocol

Ce protocole a été approuvé par le soin des animaux et du Comité institutionnel Utiliser à l'Université Stanford et respecte les National Institutes of Health des lignes directrices pour l'utilisation des animaux de laboratoire. Néonatale modèle HIE Rat Message jours natale (DPN) 7 bébés rats Sprague-Dawley (Charles River Laboratories, Inc, Wilmington, MA) sont pleinement anesthésiés à l'isoflurane (Aerrane, Baxter, Deerfield, IL, 3-4% pour l'induction et 1-2% pour d'e…

Discussion

Le rongeur modèle postnatale HIE est un modèle établi que l'hypoxie cérébrale récapitule survenant dans la période péri-natale chez les nouveau-nés. De vastes études de caractérisation histologique et immunocytochimique ont démontré que les rongeurs 7 jours anciens a la maturité cérébrale analogue à un modèle 7 du troisième trimestre fœtus humain. Le modèle de rongeur HIE a été très instructive pour comprendre les mécanismes des lésions cérébrales de l'hypoxie périnatale 2, où les …

Acknowledgements

Financé par l'American Heart Association et Mars of Dimes.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Sprague-Dawley Rat Pups Animal Charles River Laboratories    
Isoflurane Surgery Aerrane,Baxter    
8% Oxygen/ 92% Nitrogen Gas Surgery Airgas    
2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride Reagent Sigma-Aldrich T8877  
Phosphate buffered saline (PBS) pH 7.4 Reagent Gibco/Invitrogen    
Paraformaldehyde Reagent Sigma-Aldrich P6148  

References

  1. Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Annals of neurology. 9 (2), 131-141 (1981).
  2. Vannucci, R. C., Vannucci, S. J. Perinatal Hypoxic-Ischemic Brain Damage: Evolution of an Animal Model. Dev Neurosci. 27 (2-4), 81-86 (2005).
  3. Bona, E., Hagberg, H., Loberg, E. M. Protective effects of moderate hypothermia after neonatal hypoxia-ischemia: short- and long-term outcome. Pediatric research. 43 (6), 738-738 (1998).
  4. Trescher, W. H., Ishiwa, S., Johnston, M. V. Effects of hypothermia and hyperthermia on attentional and spatial learning deficits following neonatal hypoxia-ischemic insult in rats. Behavioural brain research. 151 (1-2), 209-209 (2004).
  5. Mishima, K., Ikeda, T., Yoshikawa, T. Brief post-hypoxic-ischemic hypothermia markedly delays neonatal brain injury. Brain development. 19 (5), 326-326 (1997).
  6. Young, R. S., Olenginski, T. P., Yagel, S. K. The effect of graded hypothermia on hypoxic-ischemic brain damage: a neuropathologic study in the neonatal rat. Stroke; a journal of cerebral circulation. 14 (6), 929-929 (1983).
  7. Bederson, J. B., Pitts, L. H., Germano, S. M., et al. Evaluation of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride as a stain for detection and quantification of experimental cerebral infarction in rats. Stroke; a journal of cerebral circulation. 17 (6), 1304-1304 (1986).
  8. Cai, J., Kang, Z., Liu, W. W. Hydrogen therapy reduces apoptosis in neonatal hypoxia-ischemia rat model. Neuroscience letters. 441 (2), 167-167 (2008).
  9. Grow, J., Barks, J. D. Pathogenesis of hypoxic-ischemic cerebral injury in the term infant: current concepts. Clinics in perinatology. 29 (4), 585-585 (2002).
  10. Aden, U., Halldner, L., Lagercrantz , H., et al. Aggravated brain damage after hypoxic ischemia in immature adenosine A2A knockout mice. Stroke; a journal of cerebral circulation. 34 (3), 739-739 (2003).
check_url/955?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Taniguchi, H., Andreasson, K. The Hypoxic Ischemic Encephalopathy Model of Perinatal Ischemia. J. Vis. Exp. (21), e955, doi:10.3791/955 (2008).

View Video