Cisterna Magna Fare Beyin Omurilik Sıvısı Seri Toplama Tekniği
Summary
(Tg) AD transgenik fare modelleri, nasıl ve neden Aβ veya tau düzeyleri BOS değişikliği insan hastalarda hastalık ilerledikçe araştırmak için mükemmel bir fırsat sağlar. Burada, fare seri BOS örnekleme için rafine bir sisterna magna ponksiyonu tekniği göstermektedir.
Abstract
Alzheimer hastalığı (AH) patolojik, beta-amiloid peptid (Aβ) ve hyperphosphorylated tau proteininin intraneuronal birikimi ekstrasellüler birikimi ile karakterize ilerleyici bir nörodejeneratif hastalıktır. Beyin omurilik sıvısı (BOS) beynin ekstraselüler boşluk ile doğrudan temas halinde olduğundan, patolojik süreçler yanıt olarak beyindeki biyokimyasal değişikliklerin bir yansıması sağlar. AD hastalardan alınan BOS, bu değişiklikler için sorumlu olan mekanizmalar hala tam olarak anlaşılmış değildir ama 42 amino asit formu Aβ (Aβ42) ve total tau ve hyperphosphorylated tau artışlar bir azalma gösterir. (Tg) AD transgenik fare modelleri Aβ veya tau düzeyleri BOS değişiklik neden ve nasıl hastalık ilerledikçe araştırmak için mükemmel bir fırsat sağlar. Burada, fare BOS örnekleme için rafine bir sisterna magna ponksiyonu tekniği göstermektedir. Bu son derece nazik bir örnekleme tekniği seri BOS örnekleri zamanla ince değişiklikleri tespit etmek mümkün kılan büyük ölçüde, fare Aβ veya tau düzeyleri arasında değişkenlik karıştırıcı etkisini en aza indirir 2-3 aylık aralıklarla aynı fare elde edilecek sağlar. Aβ ve tau ELISA ile birlikte, bu tekniğin AD fare modelleri, beyin, BOS Aβ42 ve tau düzeyleri arasındaki ilişki ve onların metabolizmasını araştırmak için tasarlanmış çalışmalar için yararlı olacaktır. Tg fareler üzerinde yapılan çalışmalar, hastalığın ilerlemesi izlenmesi için biyolojik belirteç olarak kullanılmak üzere BOS Aβ veya tau düzeyleri potansiyel olarak önemli bir doğrulama sağlayabilir ve tedavi edici girişimlerin etkisi izlemek için. , Farelerin feda edilebilir ve beyinlerinde biyokimyasal ve histolojik değişiklikler için incelenecektir gibi, BOS değişikliklerin altında yatan mekanizmaları daha iyi değerlendirilebilir. Bu veriler insan AD BOS değişiklikleri yorumlanması için bilgilendirici olması muhtemeldir.
Protocol
Discussion
Biz saptanabilir plazma kirlenme olmadan farelerden alınan BOS seri örnekleme için son derece güvenilir bir protokol nitelendirdi.
1. Tüm prosedür genellikle fare başına 10 dakika (anestezi dahil) alır. BOS elde hacmi fare suşları bağlıdır. P301L (JNPL3) farelerde 3 ul ul-10 15 verim verirken biz used2 PS / APP çift Tg fareler, ortalama hacmi, yaklaşık 5 ul (3 7 ul). Seri numune almak için, en fazla 7-8 ul bir güvenle 2-3 ay aralıklarla her zaman olabilir.
2. Ameliyat sırasında, sisterna magna duramater…
Acknowledgements
Çalışmalarımız NIH hibe NS048447 ve AG017216to KD tarafından desteklenmektedir. Li Liu orijinal protokol gelişimi sırasında Dr. Heikki Tanila (Kuopio Üniversitesi, Kuopio, Finlandiya) onun gözetimi ve desteği için teşekkür etmek istiyorum.
References
- Liu, L., et al. Longitudinal observation on CSF Abeta42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice. Neurobiol Dis. 17, 516 (2004).
- Holcomb, L., et al. Accelerated Alzheimer-type phenotype in transgenic mice carrying both mutant amyloid precursor protein and presenilin 1 transgenes. Nat Med. 4, 97 (1998).
- Lewis, J., et al. Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein. Nat Genet. 25, 402 (2000).
- DeMattos, R. B., et al. Plaque-associated disruption of CSF and plasma amyloid-beta (Abeta) equilibrium in a mouse model of Alzheimer’s disease. J Neurochem. 81, 229 (2002).
- Planel, E., et al. Anesthesia leads to tau hyperphosphorylation through inhibition of phosphatase activity by hypothermia. J Neurosci. 27, 3090 (2007).
- Refolo, L. M., et al. A cholesterol-lowering drug reduces beta-amyloid pathology in a transgenic mouse model of Alzheimer’s disease. Neurobiol Dis. 8, 890 (2001).
