ショウジョウバエ心臓の準備:大人のハエにおける心臓生理学を研究する技術

- 脊椎動物とは異なり、ショウジョウバエの心臓は開いた循環系の一部である。成体のハエの心臓は、アラリー筋肉によって表皮に接続され、細胞外マトリックスに埋め込まれた心筋細胞から構築されたチューブ状の構造である。

昆虫では、血液と間質の両方の流体として機能し、栄養素、シグナル伝達分子、免疫細胞を運びます。心臓の追加のランドマークには、チューブに沿って開口部を開くオスティアと心臓内弁が含まれます。

実験的な心臓製剤では、人工ヘモリンフは組織機能を維持するための生理学的条件を模倣する。自然のヘモリンフはガス交換の責任はないが、人工ヘモリンフは機能的な気管系の欠如に代わる十分に酸素化されなければならない。

- 始める前に人工ヘモリンフ溶液を準備します。このソリューションには、細菌汚染を防ぐために使用直前に冷蔵ストック液から人工溶血に添加するスクロースとトレハロースが含まれています。

次に、ハエの脂肪体の除去に必要となる標準的なピペットプーラーを使用して、いくつかの細かい毛細血管を引っ張ります。

一度準備したら、成虫のハエは麻酔をしなければなりません。これは短い露出を使って2〜5分間昼寝をする必要がありますが、ハエを5分以上昼寝に残さないように注意してください。

次に、麻酔をかけたハエが配置され、背中側を下に、石油ゼリーの薄い層でコーティングされたペトリ皿に入れる。翼と体の疎水性キューティクルはゼリーに逆方向にくっつくべきだが、必要に応じてハエを再配置できる。

頭、腹側神経コード、脚は1回の切り口で取り除かれ、一度切ると、準備は酸素化された人工溶水溶液に沈み込む。春のはさみを使って、腹部の7と8で構成される腹部の後端を1回の切り傷で取り除く。

腹部の先端にある小さな開口部にハサミの刃を挿入し、キューティクルを横に切ります。これは腹側キューティクルの1つの端を解放します。

腸および他の腹部器官は、通常、宝石商の鉗子および穏やかな引っ張りを使用して単一の塊として除去することができる。内臓を取り除くと、小さな筋肉によってまだ後部キューティクルに取り付けられ、脂肪体に囲まれている心臓チューブが鼓動することを明らかにします。

一度設定すると、この吸引システムは心臓管の周りから余分な脂肪を吸い取るために使用されます。それはまた、キューティクルや破片の周りに蓄積する気泡を取り除くために使用することができます。

必要に応じて、キューティクルと付属の心臓は、石油ゼリーからキューティクルをそっと持ち上げ、慎重にタンパすることによって再配置することができます。 再び心臓組織との接触を避ける。この時点で、製剤を入浴させる溶液は新鮮な人工ヘモリンパに置き換えるべきである。この製剤は、操作の前に酸素化で20〜30分間平衡化する必要があります。 また、電気生理学的な記録や組織学的操作のために使用されます。