Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
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La presión intersticial del líquido o IFP es la fuerza ejercida por el líquido en los espacios entre las células de un tejido. En primer lugar, anestesiar un ratón portador de tumores con un 2% de isofluorano mezclado con oxígeno e inmovilizarlo en la tomografía computarizada o en la plataforma robot CT-IFP. Ahora, inyecte en la vena trasera lateral de un ratón con liposomas encapsulados con un agente de contraste para visualizar el tumor. Devuelve al animal a su jaula y deja que se recupere.
Entre 48 y 72 horas después de la inyección, asegure el ratón anestesiado en la plataforma CT-IFP y seleccione algunas posiciones espaciadas uniformemente en el tumor para medir la IFP. A continuación, enjuague la aguja del sistema IFP con una solución salina de heparina antes de la inserción. Coloque la aguja en la posición seleccionada e insértela dentro del tejido tumoral.
Ahora adquiera imágenes en todas las posiciones y mida el IFP usando el software. La IFP en el tumor suele ser alta debido a su naturaleza densa, vasos sanguíneos anormales y sistema linfático defectuoso. Esto puede conducir a la acumulación de liposomas en la periferia tumoral. En el siguiente protocolo, demostraremos la técnica para medir la IFP en un tumor sólido.
Para medir la IFP, tape al animal en la plataforma del robot CT-IFP, de tal forma que el tumor sea inmovilizado y accesible al sistema robótico CT-IFP. Obtenga una micro tomografía computarizada anatómica como se acaba de demostrar, luego cargue los datos de inserción de preneedle en el software de alineación del robot CT-IFP y ajuste la ventana y el nivel para visualizar el tumor. Haga clic en el borde del tumor en cualquier imagen, seguido de la selección de una segunda ubicación del borde en el lado adyacente del tumor.
El software calculará una serie de posiciones a lo largo de una línea lineal entre los dos puntos. A continuación, seleccione las coordenadas x, y y z para una serie de cinco a ocho posiciones espaciadas uniformemente de la lista. A continuación, enjuague la aguja del sistema IFP con una solución de heparina salina e introduzca las primeras posiciones de aguja predeterminadas en las ventanas de coordenadas XYZ del software de control del robot CT-IFP.
Pulse el botón Ir para mover el robot a la ubicación deseada. A continuación, para cada posición de la aguja a su vez, haga clic en el botón Insertar aguja para insertar la aguja en el tejido. Pellizque y libere el tubo PE-20 para confirmar una buena comunicación fluida entre la aguja IFP y el tejido y observar que la medición IFP aumenta y vuelve al valor de pre-pellizcar en el software de adquisición IFP. Finalmente, adquiera una tomografía computarizada anatómica con la aguja insertada, haciendo clic en el botón Retract Needle al final de la exploración para extraer la aguja del tejido.
