A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:24Splenic B-Lymphocyte Isolation and Stimulation
- 05:42Transfection of Producer Cells
- 07:26Infection of Stimulated Splenic B cells
- 08:12Flow Cytometry Analysis
- 08:40Rescue of AID-Deficiency by Transduction of AID-Deficient B Cells with a Recombinant Retrovirus
- 08:57Conclusion
Een efficiënt systeem van de structuur en functie analyse van een gen in een<em> Ex vivo</em> Cultuur van milt B-lymfocyten wordt beschreven. Deze methode maakt gebruik van recombinante retrovirale de productie in een helper gratis, ecotrophic verpakking cellijn. Stabiele, erfelijke expressie van een gen van belang in primaire lymfocyten wordt bereikt leidt tot productie van antilichamen op het oppervlak B-cellen die een klasse switch recombinatie.
Tags
Recombinant Retroviral ProductionB CellsTransgenic ExpressionReverse Genetic ApproachHeterologous Expression SystemPhenotype AnalysisGene Over-expressionHematopoetic SystemMouse GeneticsHuman Genes And DiseasesSynteny ConservationGene DisruptionsAllelic ReplacementTransgenic Mouse CreationCell Culture Model
