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使用BMP4のエフェクター-錯体のダウンストリームシグナリングの検出その場で PLA、近接ライゲーションアッセイ
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Detection of Signaling Effector-Complexes Downstream of BMP4 Using in situ PLA, a Proximity Ligation Assay
DOI:

12:52 min

March 03, 2011

,

Chapters

  • 00:00Title
  • 02:56Plating of Cells and Treatment with BMP
  • 04:12Fixation and Permeabilization
  • 05:26Blocking and Primary Antibodies Application
  • 06:49The Proximity Ligation Assay (PLA)
  • 09:54Preparation for Imaging
  • 10:56In Situ Proximity Ligation Assay Results from Neuro2a Cells Treated with BMP4
  • 12:18Conclusion

Summary

Automatic Translation

ここでは、骨形成タンパク質(BMP)固定された細胞のシグナル伝達を可視化する抗体の組み合わせで近接ライゲーションアッセイ(PLA)を、使用する方法を示します。このテクニックは、私たちは、内因性BMP活性化エフェクター複合体の核内蓄積を追跡し、BMP4刺激下で時間をかけて自分のレベルを定量することができました。

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