Visualización de las proteínas y complejos macromoleculares de Negative EM Mancha: desde la preparación de la cuadrícula para adquisición de imágenes

Visualización de las muestras de proteínas por microscopía de electrones negativos mancha (EM) se ha convertido en un popular método de análisis estructural. Es útil para el análisis estructural cuantitativo, como el cálculo de una reconstrucción en 3D de las moléculas en estudio, y también para el examen cualitativo de la calidad de los preparados de proteínas. En este artículo se presentan los protocolos de detalle para la preparación de las redes de EM, la tinción de la muestra y la visualización de la muestra en un microscopio electrónico. Los usuarios novatos pueden seguir estos protocolos fácil de utilizar y negativas EM mancha como un ensayo de rutina, además de otros ensayos bioquímicos, para evaluar las muestras de proteínas.