A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

Stefan Schmollinger; Daniela Strenkert; Vittoria Offeddu; Andr&#233; Nordhues; Frederik Sommer; Michael Schroda

doi:10.3791/4083

/

Протокол для идентификации белок-белковых взаимодействий на основе 15 N Метаболический маркировки, Иммунопреципитация, Количественный масс-спектрометрии и Affinity модуляции

JoVE Journal
Biology

This content is Free Access.

JoVE Journal Biology

A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on ¹⁵N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Протокол для идентификации белок-белковых взаимодействий на основе 15 N Метаболический маркировки, Иммунопреципитация, Количественный масс-спектрометрии и Affinity модуляции

DOI:

10.3791/4083-v

•

14:44 min

•

September 24, 2012

•

Stefan Schmollinger², Daniela Strenkert², Vittoria Offeddu², André Nordhues², Frederik Sommer², Michael Schroda²

¹Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, ²University of Kaiserslautern

Chapters

00:05Title
02:30Cell Lysis, Crosslinking and Sample Preparation
05:22Immunoprecipitation
07:06Sample Preparation for nano-LC-MS/MS
10:50Results: HSP70B with its Nucleotide Exchange Factor CGE1
14:07Conclusion

Summary

Automatic Translation

Мы представляем изменения БЫСТРО (количественные Иммунопреципитация в сочетании с Нокдаун) подход, который был введен ранее различать истинные и ложные белок-белковых взаимодействий. Наш подход основан на 15N Метаболических маркировки, модуляция сродства белок-белковых взаимодействий по наличию / отсутствию АТФ, иммунопреципитации и количественного масс-спектрометрии.

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

MALDI пробоподготовки: ультра тонкий слой Метод

Количественная оценка Дрожжи Lipidome использованием Электроспрей ионизации масс-спектрометрии

В естественных условиях обнаружения белок-белковых взаимодействий на микро-узорной поверхности

Определение белковых комплексов в Кишечной палочки С помощью последовательного аффинной очистки пептидов в сочетании с тандемной масс-спектрометрии

Новый подход к сравнительному анализу мультибелковых комплексов на основе 15 N Метаболический Маркировка и количественный Масс-спектрометрия

Исследование белок-белковых взаимодействий в живых клетках с помощью биолюминесценции резонансный перенос энергии

Хроматина иммунопреципитации для идентификации Arabidopsis взаимодействий белок-ДНК В Vivo</em

Идентификация MyoD интерактомные Использование Тандем Аффинная очистка В сочетании с масс-спектрометрии

Исследование взаимодействий протеин протеина в Autophagy исследований

Количественная оценка конкретных участков белка лизин ацетилирования и стехиометрии Succinylation с помощью приобретения данных независимые масс-спектрометрия

•

•

•