JoVE Science Education
General Laboratory Techniques
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education General Laboratory Techniques
Introduction to Fluorescence Microscopy
  • 00:00Introduction to Fluorescence Microscopy
  • 01:19Principles and Components of the Fluorescent Microscope
  • 02:21Basic Principles of Fluorescence Microscopy
  • 05:25Fluorescence Microscopy Imaging
  • 06:59Applications
  • 08:45Summary

מבוא למיקרוסקופיה פלואורסצנטית

English

Share

Overview

מיקרוסקופיית פלואורסצנטיות היא כלי אנליטי רב עוצמה המשלב את המאפיינים המגדלים של מיקרוסקופיה קלה עם הדמיה של פלואורסצנטיות. פלואורסצנטיות היא תופעה הכרוכה בספיגה ופליטה של מגוון קטן של אורכי גל אור על ידי מולקולה פלואורסצנטית המכונה פלואורופור. מיקרוסקופיית פלואורסצנטיות מושגת בשילוב עם מיקרוסקופ האור הבסיסי על ידי הוספת מקור אור רב עוצמה, מסננים מיוחדים ואמצעי לתיוג פלואורסצנטי של מדגם. סרטון זה מתאר את העקרונות הבסיסיים העומדים מאחורי מיקרוסקופיית פלואורסצנטיות, כולל מנגנון הפלואורסצנטיות, השינוי של הסטוק והלבנת תמונות. זה גם נותן דוגמאות של דרכים רבות לתייג פלואורסצנטי מדגם כולל שימוש בנוגדנים וחלבונים מתויגים פלואורסצנטית, צבעי פלואורסצנטי חומצת גרעין עם, ותוספת של חלבונים פלואורסצנטיים טבעיים לדגימה. המרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ הפלואורסצנטיות כולל מקור אור קסנון או כספית, מסנני אור, המראה הדיכרואית והשימוש בתריס כדי להאיר את המדגם מתוארים כולם. לבסוף, דוגמאות של כמה יישומים רבים עבור מיקרוסקופיה פלואורסצנטית מוצגים.

Procedure

פלואורסצנטיות היא תופעה המתרחשת כאשר חומר סופג אור אורך גל נתון ולפוט אור אורך גל אחר. פלואורסצנטיות מתרחשת כאלקטרון, שהתרגש ממצב אנרגיה גבוה ולא יציב יותר, נרגע למצב הקרקע שלו ומפרוט פוטון של אור. האור האחראי על עירור, או הזזת האלקטרון למצב אנרגיה גבוה יותר, הוא בעל אורך גל קצר יותר ואנרגיה…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Introduction to Fluorescence Microscopy. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos