Use of Stopped-Flow Fluorescence and Labeled Nucleotides to Analyze the ATP Turnover Cycle of Kinesins

Jennifer T. Patel; Hannah R. Belsham; Alexandra J. Rathbone; Claire T. Friel

doi:10.3791/52142

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L'utilisation de nucléotides stopped-flow fluorescence et marqués d'analyser les Chiffre d'affaires Cycle ATP de kinésines

JoVE Journal
Chemistry

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JoVE Journal Chemistry

Use of Stopped-Flow Fluorescence and Labeled Nucleotides to Analyze the ATP Turnover Cycle of Kinesins

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L'utilisation de nucléotides stopped-flow fluorescence et marqués d'analyser les Chiffre d'affaires Cycle ATP de kinésines

DOI:

10.3791/52142-v

•

07:25 min

•

October 17, 2014

•

Jennifer T. Patel, Hannah R. Belsham, Alexandra J. Rathbone, Claire T. Friel

¹School of Life Sciences,University of Nottingham

Chapters

00:05Title
01:13Measurement of Association and Dissociation Rate Constants for mantATP
04:18Measurement of the Dissociation Rate Constant for mantADP
05:19Results: Analysis of the ATP Turnover Cycle of Kinesins
06:45Conclusion

Summary

Automatic Translation

Les kinésines sont caractérisées par une interaction dépendant de nucléotides avec les microtubules: un cycle de renouvellement de l'ATP couplée à un cycle d'interaction des microtubules. Ici, nous décrivons les protocoles d'analyser la cinétique de la transition de nucleotides individuels dans le cycle de renouvellement de l'ATP à l'aide d'une kinésine nucleotides marqués par fluorescence et la fluorescence stopped-flow.

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