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Thermostabilization, अभिव्यक्ति, शोधन, और मानव सेरोटोनिन ट्रांसपोर्टर के क्रिस्टलीकरण के लिए बाध्य<em> S</em> -citalopram
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram
DOI:

12:21 min

November 27, 2016

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Chapters

  • 00:05Title
  • 00:47Transfection of Adherent HEK293S GnTI-cells for Thermostability Screen
  • 02:24Scintillation Proximity-based Thermostability Screen with Citalopram
  • 04:18Expression of the Human Serotonin Transporter in HEK293S GnTI-cells
  • 05:24Affinity-purification of the Serotonin Transporter for Immunization and Crystallization
  • 07:12Formation of Transporter-antibody Complexes and Separation by Size-exclusion Chromatography
  • 08:21Crystallization of Transporter-antibody Complexes by Hanging Drop
  • 10:01Results: Thermostabilization and Crystallization of the Serotonin Transporter in an Antidepressant-bound State
  • 11:25Conclusion

Summary

Automatic Translation

इस पांडुलिपि का वर्णन करता है, म्यूटेशन thermostabilizing के लिए स्क्रीन कैसे करने के लिए मानव सेरोटोनिन ट्रांसपोर्टर को शुद्ध उच्च संबंध एंटीबॉडी पैदा करते हैं, और सेरोटोनिन ट्रांसपोर्टर एंटीबॉडी जटिल एंटी दवा एस -citalopram के लिए बाध्य मणिभ। इस प्रोटोकॉल अन्य चुनौतीपूर्ण झिल्ली ट्रांसपोर्टरों, रिसेप्टर्स, और चैनल के अध्ययन के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।

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