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Valutazione della posizione intracellulare di specie reattive dell'ossigeno in spermatozoi Solea Senegalensis
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Evaluation of Intracellular Location of Reactive Oxygen Species in Solea Senegalensis Spermatozoa
DOI:

10:24 min

March 11, 2018

,

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:32Preparatory work before the experiment
  • 02:58Sample preparation before fluorochromes incubation
  • 04:40Fluorochromes incubation
  • 05:33Sample preparation for confocal microscopy
  • 05:51Confocal setting up prior to the experiment
  • 06:49Acquisition of images
  • 07:49Results
  • 08:24Creating a 3D image video
  • 09:53Conclusions

Summary

Automatic Translation

Questo protocollo descrive una dettagliata metodologia per la rilevazione di localizzazione di H2O2 all'interno di spermatozoi, Solea senegalensis utilizzando un fluorocromo sensibile DCFH-DA ROS, una macchia di mitocondri dal vivo per i mitocondri, e DAPI per nuclei visualizzazione, rispettivamente. Il protocollo è progettato per essere eseguito all'interno di 2 h con gli spermatozoi o freschi o scongelati.

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