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Surveillance de la libération de calcium ER / SR avec le Ca ciblé<sup> 2+</sup> Sensor CatchER<sup> +</sup
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Biology
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JoVE Journal Biology
Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+
DOI:

12:30 min

May 19, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:30Transfection of HEK293 Cells
  • 02:43Transfection of C2C12 Myoblast Cells
  • 04:10Preparation of Slide and Fluorescence Microscope
  • 06:54Imaging Drug-induced Ca2+ Transients and In Situ Kd Calibration
  • 10:14Results: In Situ Kd of CatchER+ in C2C12 Myoblast Cells
  • 11:32Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nous présentons des protocoles pour l'application de notre indicateur de calcium codé génétiquement (GECI) CatchER + pour la surveillance des transitoires rapides de calcium dans le réticulum endoplasmique / sarcoplasmique (ER / SR) des cellules HEK293 et ​​C2C12 du muscle squelettique en utilisant une microscopie à fluorescence en temps réel. Un protocole pour la mesure et l'étalonnage in situ K d est également discuté.

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