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Cell Biology
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JoVE Science Education Cell Biology
The TUNEL Assay
  • 00:00Overview
  • 00:59Principles of the TUNEL Assay
  • 03:06Generalized TUNEL Assay Protocol in Tissue Sections
  • 05:34Applications
  • 07:35Summary

El ensayo TUNEL

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Overview

Una de las características de la apoptosis es la fragmentación del ADN nuclear por nucleasas. Estas enzimas son activadas por caspasas, la familia de proteínas que ejecutan el programa de muerte celular. Ensayo de túnel es un método que aprovecha esta característica para detectar células apoptóticas. En este ensayo, una enzima llamada terminal deoxynucleotidyl transferasa cataliza la adición de dUTP nucleótidos a los extremos 3′ libre de ADN fragmentado. Mediante el uso de dUTPs que están etiquetados con las etiquetas químicas que pueden producir color o fluorescencia, pueden identificarse específicamente células apoptóticas.

Video de Zeus en el ensayo TUNEL comienza discutiendo cómo puede utilizarse esta técnica para detectar células apoptóticas. Luego pasamos por un protocolo general para realizar ensayos TUNEL en secciones de tejidos y visualizar los resultados utilizando microscopía de fluorescencia. Por último, se tratarán varias aplicaciones del análisis a la investigación actual.

Procedure

El ensayo TUNEL se utiliza comúnmente para detectar las células que experimentan apoptosis, que es una forma de muerte celular programada. La apoptosis es un proceso biológico importante durante el desarrollo y para mantener la homeostasis del tejido. Tinción TUNEL permite visualización y cuantificación de células apoptóticas. Esto ayuda a los científicos probar la eficacia de nuevos tratamientos para trastornos en que apoptosis inhibida, como en el cáncer, o mejorado, como en la neurodegeneración.Este vi…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. The TUNEL Assay. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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