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Un ensayo de Blot punto cuantitativo para valoración de AAV y su uso para la evaluación funcional de la Asamblea del Virus Adeno-asociado-activar proteínas
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Biology
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JoVE Journal Biology
A Quantitative Dot Blot Assay for AAV Titration and Its Use for Functional Assessment of the Adeno-associated Virus Assembly-activating Proteins
DOI:

14:49 min

June 12, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:46Production of AAV in HEK 293 Cells by Plasmid DNA Transfection
  • 02:50Recovery of Viral Particles, and Treatment with Serratia marcescens Endonuclease and Proteinase K
  • 04:20Phenol-choloroform Extraction, Ethanol Precipitation, and Preparation of Plasmid DNA Standards
  • 05:55Dot Blot Assay
  • 08:46Hybridization and Washing
  • 10:50Results: AAV Titration and Functional Assessment of AAP Proteins Using a Quantitative Dot Blot Assay
  • 12:58Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este manuscrito detalla un análisis de blot punto sencillo para la cuantificación de los títulos de virus adeno-asociado (AAV) y su aplicación para estudiar la función de activación de montaje proteínas (AAPs), una nueva clase de proteínas virales no estructurales en los AAV serotipos, en la promoción de la Asamblea de cápsida derivado de serotipos AAV cognados y heterólogos.

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