Journal
/
Genetics
/
Biotin-baserede Pulldown Assay til Valider mRNA mål af cellulære miRNAs
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs

Biotin-baserede Pulldown Assay til Valider mRNA mål af cellulære miRNAs

DOI:
10.3791/57786-v

•

11:00 min

•

June 12, 2018

•

, , ,
1School of Biotechnology,Kalinga Institute of Industrial Technology University, 21. Center for AIDS Health Disparities Research Department of Biochemistry and Cancer Biology,Meharry Medical College, 3Kalinga Institute of Industrial Technology University

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:34Preparation of Streptavidin Coated Magnetic Beads — I
  • 03:52Preparation of Cell Lysate
  • 05:36Preparation of Streptavidin Magnetic Beads — II
  • 06:34Pull-down of Target mRNA-miRNA Complexes
  • 07:35Total RNA Extracted, cDNA Synthesis, and qPCR
  • 08:57Results: Use of MicroRNAs to Capture the Target mRNA
  • 09:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne rapport beskriver en hurtig og pålidelig metode til validering af cellulære miRNAs mRNA mål. De metode bruger syntetiske biotinylated låst nukleinsyre LNA-baserede miRNA efterligner for at fange målrette mRNA. Efterfølgende, streptavidin-belagt magnetiske perler er ansat til pulldown målet mRNA for kvantificering af qPCR polymerase kæde reaktion.

Tags

Biotinylated MiRNA MimicsMRNA TargetsPulldown AssayLocked Nucleic AcidsStreptavidin-coated Magnetic BeadsMiRNA-mRNA InteractionsMiRNA BiologyMiRNA Therapeutics

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Forstyrrelser af Cirkulerende miRNA i irritabel tyktarm Opdagede Ved hjælp af en Multiplexed Højkapacitetsforskning Gene Expression Platform

Peptid-afledt metode til Transport gener og proteiner Across Cellular og Organellar Barrierer i Planter

Analyse af Cap-bindende proteiner i Human celler udsat for Fysiologiske iltforhold

Laser Microirradiation at studere In Vivo cellulære svar til Simple og komplekse DNA-skader

Måling af mRNA niveauer Over tid under gær S. cerevisiae hypoksiske svar

Samtidige Video-EEG-EKG overvågning for at identificere Neurocardiac dysfunktion i musemodeller af epilepsi

RNA Pull-down Procedure til identifikation af en længe ikke-kodende RNA RNA mål

CRISPR/Cas9 gen redigering at gøre betinget mutanter af menneskelige Malaria parasitten, P. falciparum

Kvantitativ analyse af Alternative Pre-mRNA-Splicing i mus hjernen sektioner ved hjælp af RNA In Situ hybridisering Assay

Ved hjælp af in Vitro og i celler form at undersøge lille molekyle induceret Pre-mRNA strukturelle ændringer

Read Article