Journal
/
/
הנועד מבוסס-ביוטין הנפתח Validate mRNA miRNAs מטרות של הסלולר
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs
DOI:

11:00 min

June 12, 2018

, , ,

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:34Preparation of Streptavidin Coated Magnetic Beads — I
  • 03:52Preparation of Cell Lysate
  • 05:36Preparation of Streptavidin Magnetic Beads — II
  • 06:34Pull-down of Target mRNA-miRNA Complexes
  • 07:35Total RNA Extracted, cDNA Synthesis, and qPCR
  • 08:57Results: Use of MicroRNAs to Capture the Target mRNA
  • 09:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

דו ח זה מתאר שיטה מהירה ואמינה עבור אימות מטרות mRNA miRNAs הסלולר. משתמשת בשיטה biotinylated סינתטי מבוססת מגבר קדם חומצת גרעין נעול miRNA מחקה ללכידת המטרה mRNA. לאחר מכן, מצופים streptavidin beads מגנטי מועסקים הנפתח המטרה mRNA על כימות על ידי תגובת שרשרת של פולימראז qPCR.

Related Videos

Read Article